| 研究課題/領域番号 |
20390342
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
清水 一治 京都大学, 薬学研究科, 教授 (50456836)
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| 研究分担者 |
辻本 豪三 京都大学, 薬学研究科, 教授 (80172013)
佐藤 史顕 京都大学, 薬学研究科, 准教授 (20467426)
土屋 創健 京都大学, 薬学研究科, 助教 (80423002)
戸井 雅和 京都大学, 医学研究科, 教授 (10207516)
上野 貴之 京都大学, 医学研究科, 助教 (40452362)
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| キーワード | 乳癌 / microRNA |
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| 研究概要 |
本課題の目的は、乳癌の臨床に応用できるマイクロRNA(miR)の探索にある。課題の初年度として、まず、miRの検出系であるmiRマイクロアレイのデータの再現性と、in vitroの実験系で乳癌に関連するmiRの探索を行った。
(1) miRマイクロアレイの信頼性の検証:市場で入手可能な5種類のmiRマイクロアレイについて調査したところ、アジレント社と東レ社の製品はプラットフォーム内再現性が高く、プラットフォーム間データの一致性が高かった。また、定量的PCR法によるmiR定量データとの相関も高く、データの信頼性が高いと考えられ、今後のプロジェクトに東レ製miRマイクロアレイを使用することになった。(Sato F, et al. PLoS One, 2009, in press)
(2) Herceptin感受性:乳癌細胞株11株を蒐集し、そのHer2増幅の有無とHerceptin感受性を調べた。11株中Her2増幅株は3株あり、その中で、2株(SK-BR-3、BT-474)が明らかなHerceptin感受性を示した。そこで、感受性株であるSK-BR-3から、Herceptin長期暴露により、Herceptin耐性株の樹立を試みたが、2か月以上の長期暴露でも、Herceptin耐性が得られなかった。
(3)乳癌細胞株のmiRプロファイリング:正常乳管上皮細胞と乳癌細胞株11株のmiR発現を上記マイクロアレイ法で取得した。Herceptin感受性株で発現の変動をしているmiR8個(上昇:6個、低下:2個)を選択した。今後は、これらのmiRに対して定量的RT-PCRによる発現量の検証、機能解析、臨床標本におけるmiR発現の意義を解析していく予定である。
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