骨軟部悪性腫瘍の生体内蛍光イメージング -原発巣から転移,治療まで

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20390396
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 整形外科学
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 土屋 弘行 金沢大学, 医学系, 教授 (40227434)
• 連携研究者: 富田 勝郎 金沢大学, 医学系, 教授 (00092792) ; 白井 寿治 金沢大学, 医学系, 助教 (20397186) ; 林 克洋 金沢大学, 附属病院, 助教 (80507054)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: 骨・軟部腫瘍学 / 蛍光タンパク / イメージング / 転移

研究概要

蛍光をつかった生体内の肉腫イメージングに関して研究した。骨代謝に関連するアルカリフォスファターゼの抗体など用いることで、骨肉腫を蛍光標識できることがわかった。蛍光色はGFP(緑)が広く使われるが、直視下での観察の際は自家蛍光による問題があり、赤色または、赤外線を用いることでより良好な観察ができた。マウス肺転移モデルでのリアルタイムイメージングを行い、肺転移早期と免疫細胞の関係をみた。また、液体窒素処理を行った腫瘍による免疫活性作用を樹状細胞の培養を行い、抗腫瘍効果の増強を確認した。

研究成果

• [雑誌論文] Real-time imaging of single cancer-cell dynamics of lung metastasis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura H, Hayashi K, Yamauchi K, Yamamoto N, Tsuchiya H, Tomita K, Kishimoto H, Bouvet M, Hoffman RM.
  • 雑誌名: J Cell Biochem 109 ページ: 58-64
  • 査読あり
• [雑誌論文] Color-coded real-time cellular imaging of lung T-lymphocyte accumulation and focus formation in a mouse asthma model. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa A, Hayashi K, Kishimoto H, Yang M, Tofukuji S, Suzuki K, Nakajima H, Hoffman RM, Shirai M, Nakayama T.
  • 雑誌名: J Allergy Clin Immunol 125 ページ: 461-468
  • 査読あり
• [雑誌論文] Targeted therapy of spinal cord glioma with a genetically modified Salmonella typhimurium. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura H, Zhang L., Zhao M, Hayashi K, Tsuchiya H, Tomita K, Bouvet M, Wessels J, Hoffman RM.
  • 雑誌名: Cell Prolif 43 ページ: 41-48
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pedicle frozen autograft reconstruction in malignant bone tumors. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya H, et al.
  • 雑誌名: J Orthop Sci 15 ページ: 340-349
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cryoimmunologic antitumor effects enhanced by dendritic cells in osteosarcoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawano M, Nishida H, Nakamoto Y, Tsumura H, Tsuchiya H.
  • 雑誌名: Clin Orthop Relat Res 468 ページ: 1373-1383
  • 査読あり
• [雑誌論文] 転移リアルタイムイメージング. (2010)
  • 著者名/発表者名: 林克洋.
  • 雑誌名: 臨床整外 45 ページ: 1134-1138
  • 査読あり
• [雑誌論文] UV light killing efficacy of fluorescent protein-expressing cancer cells in vitro and in vivo. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura H, Lee C, Tsuchiya H, et al.
  • 雑誌名: J Cell Biochem 110 ページ: 1439-1346
• [雑誌論文] Long-working-distance fluorescence microscope with high-numerical-aperture objectives for variable-magnification imaging in live mice from macro-to subcellular. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura H, Momiyama M, Tomita K, Tsuchiya H, Hoffman RM.
  • 雑誌名: J Biomed Opt 15 ページ: 066029
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cancer metastasis directly eradicated by targeted therapy with a modified Salmonella typhimurium. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hayashi K, Zhao M, Yamauchi K, Yamamoto N, Tsuchiya H, Tomita K, Hoffman RM.
  • 雑誌名: J Cell Biochem 106 ページ: 992-998
• [雑誌論文] In vivo gene transfer between interacting human osteosarcoma cell lines is associated with acquisition of enhanced metastatic potential. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tome Y, Tsuchiya H, et al.
  • 雑誌名: J Cell Biochem 108 ページ: 362-367
  • 査読あり
• [雑誌論文] A color-coded orthotopic nude-mouse treatment model of brain-metastatic paralyzing spinal cord cancer that induces angiogenesis and neurogenesis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hayashi K, Yamauchi K, Yamamoto N, Tsuchiya H, Tomita K, Bouvet M, Wessels J, Hoffman RM.
  • 雑誌名: Cell Prolif 42 ページ: 75-82
  • 査読あり
• [雑誌論文] Systemic targeting of primary bone tumor and lung metastasis of high-grade osteosarcoma in nude mice with a tumor-selective strain of Salmonella typhimurium. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hayashi K, Zhao M, Yamauchi K, Yamamoto N, Tsuchiya H, Tomita K, Kishimoto H, Bouvet M, Hoffman RM.
  • 雑誌名: Cell Cycle 8 ページ: 870-875
  • 査読あり
• [雑誌論文] 骨・軟部腫瘍のバイオイメージング (2008)
  • 著者名/発表者名: 林克洋,土屋弘行
  • 雑誌名: 関節外科 27(2008) ページ: 245-251
  • 査読あり
• [学会発表] Leading technology for in vivo fluorescent sarcoma imaging. (2011)
  • 著者名/発表者名: Katsuhiro Hayashi, Norio Yamamoto, Toshiharu Shirai Hideji Nishida, Akihiko Takeuchi, Hiroaki Kimura, Robert M Hoffman, Akihiko Takeuchi.
  • 学会等名: AAOS American Academy of Orthopaedic Surgeons
  • 発表場所: USA
  • 年月日: 20110215-20110219
• [学会発表] #1 "State of Art" Lecture : Impact of caffeine-potentiated chemotherapy on musculoskeletal sarcoma treatment #2 Surgical management of skeletal metastatic tumour. (2010)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行.
  • 学会等名: 17th Hong Kong International Cancer Congress (招待講演)
  • 発表場所: Cheung Kung Hai Conference Centre (Hong Kong)
  • 年月日: 20101103-20101105
• [学会発表] Anti β lintegrin antibody inhibits osteosarcoma cell lung seeding and metastasis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura H, Tsuchiya H, et al.
  • 学会等名: combined meeting of orthopedic research society
  • 発表場所: 京都国際会議場(京都府)
  • 年月日: 20101016-20101020
• [学会発表] Cryoimmunology in bone sarcoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行.
  • 学会等名: ブラジル骨軟部腫瘍学会(招待講演)
  • 発表場所: Porto de Galinhas(Brazil)
  • 年月日: 20100421-20100424
• [学会発表] Real-time in vivo color-coded imaging of the interaction between immunocytes and tumor cells during cancer therapy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura H, Tsuchiya H, et al.
  • 学会等名: American Association for Cancer Research
  • 発表場所: Washington Convention Center (USA)
  • 年月日: 20100417-20100421
• [学会発表] Real-time imaging of nuclear-cytoplasmic dynamics in UV light killing of cancer cells expressing fluorescent proteins. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura H, Tsuchiya H, et al.
  • 学会等名: American Association for Cancer Research
  • 発表場所: Washington Convention Center (USA)
  • 年月日: 20100417-20100421
• [学会発表] 骨腫瘍の治療における創意と工夫. (2010)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行.
  • 学会等名: 京都運動器疾患フォーラム(招待講演)
  • 発表場所: 京都ホテルオークラ(京都府)
  • 年月日: 2010-12-05
• [学会発表] 骨腫瘍に対する最近の外科的治療. (2010)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行.
  • 学会等名: 第223回大阪臨床整形外科医会研修会(招待講演)
  • 発表場所: ANAクラウンプラザホテル大阪(大阪府)
  • 年月日: 2010-11-20
• [学会発表] サルモネラ変異株を応用したリンパ節転移の治療と蛍光イメージング. (2010)
  • 著者名/発表者名: 林克洋、土屋弘行.
  • 学会等名: 日本整形外科学会基礎学術集会
  • 発表場所: 京都国際会議場(京都府)
  • 年月日: 2010-10-14
• [学会発表] 骨腫瘍の診断と治療:悪性腫瘍に対する治療. (2010)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行.
  • 学会等名: 日本小児整形外科学会第17回研修会(招待講演)
  • 発表場所: 大正製薬株式会社(東京都)
  • 年月日: 2010-08-22
• [学会発表] Targeting of primary tumor and lung metastasis of high-grade osteosarcoma in nude mice with a tumor-selective strain of Salmonella typhymurium. (2010)
  • 著者名/発表者名: 林克洋, 土屋弘行.
  • 学会等名: 日本整形外科学会学術総会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム(東京都)
  • 年月日: 2010-05-27
• [学会発表] カフェイン併用化学療法の過去・現在・未来. (2010)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行.
  • 学会等名: ひむかセミナー(招待講演)
  • 発表場所: ホテルJALシティ宮崎(宮崎県)
  • 年月日: 2010-05-15
• [学会発表] 蛍光蛋白を使用した悪性腫瘍の転移リアルタイムイメージング. (2009)
  • 著者名/発表者名: 林克洋、土屋弘行.
  • 学会等名: 第24回日本整形外科学会基礎学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
  • 年月日: 20091105-20091106
• [学会発表] 蛍光蛋白を使用した癌細胞のリンパ節転移のリアルタイムイメージング. (2009)
  • 著者名/発表者名: 林克洋 土屋弘行 山本憲男 白井寿治 山内健輔 ロバートホフマン 富田勝郎.
  • 学会等名: 第18回日本がん転移学会学術集会・総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20090723-20090724
• [学会発表] 蛍光蛋白を使用した癌細胞のリンパ節転移のリアルタイムイメージング. (2009)
  • 著者名/発表者名: 林克洋、土屋弘行.
  • 学会等名: 第42回日本整形外科学会骨軟部腫瘍学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
  • 年月日: 20090717-20090918
• [学会発表] Dual color imaging of angiogenesis and its inhibition in bone and soft tissue sarcoma. (2009)
  • 著者名/発表者名: 林克洋、土屋弘行
  • 学会等名: 第52回日本整形外科学会学術総会
  • 発表場所: 福岡国際会議場(福岡)
  • 年月日: 20090514-20090517
• [学会発表] Real Time Imaging of Cancer Cell Seeding to the Lung in Live Mouse. (2009)
  • 著者名/発表者名: K Hayashi, H Tsuchiya, N Yamamoto, T Shirai, H Nishida, A Takeuchi, A Takeuchi, H Kimura, K Tomita, M Bouvet, RM.Hoffman.
  • 学会等名: 100th American Association for Cancer Research
  • 発表場所: Colorado Convention Center (USA)
  • 年月日: 20090412-20090416
• [学会発表] Biological reconstruction after tumor resection. (2009)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行
  • 学会等名: 5th International Scientific Symposium of Total Knee Arthroplasty
  • 発表場所: City Hall of Krakow (Poland)
  • 年月日: 2009-10-08
• [学会発表] 骨腫瘍再建術のUp-to-Date. (2009)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行
  • 学会等名: 第83回東京医科歯科大学整形外科集談会
  • 発表場所: 東京医科歯科大学(東京)
  • 年月日: 2009-07-04
• [学会発表] Biological reconstruction for tumor surgery. (2009)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行
  • 学会等名: The 50th Memorial International Orthopaedic Symposium in Kyungpook National University
  • 発表場所: Kyungpook National University (韓国)
  • 年月日: 2009-05-30
• [学会発表] Biological reconstruction in lim-savingsUrgery. (2009)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行
  • 学会等名: 台北栄民総医院50周年院慶骨科医学最新進展国際検討会
  • 発表場所: 台北栄民総医院(台湾)
  • 年月日: 2009-05-23
• [学会発表] Biological Reconstruction. (2009)
  • 著者名/発表者名: 土屋弘行
  • 学会等名: Orthopedic Seminar at South Valley University
  • 発表場所: South Valley University (Egypt)
  • 年月日: 2009-04-27
• [学会発表] マイケルブベイ,ロバートホフマンTargeted therapy of bone tumor and lung metastasis in mice with atumor-selective strain of Salmonella typhymurium. (2008)
  • 著者名/発表者名: 林克洋, ミンショ, 山内健輔, 山本憲男, 土屋弘行, 富田勝郎, 岸本浩行
  • 学会等名: 第67回日本癌学会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(名古屋)
  • 年月日: 2008-12-20
• [学会発表] マウス内での蛍光蛋白を使った腫瘍と血管新生のイメージング. (2008)
  • 著者名/発表者名: 林克洋, 土屋弘行, 山本憲男, 白井寿治, 山内健輔, 大成一誓, 武内章彦, 河野正典, 富田勝郎
  • 学会等名: 第111回中部日本整形外科災害外科学会・学術集会
  • 発表場所: 石川音楽堂(石川)
  • 年月日: 2008-10-17
• [学会発表] Imaging angiogenesis in bone and soft tissue tumors in nestin-driven green fluorescent protein transgenic nude mouse. (2008)
  • 著者名/発表者名: Katsuhiro Hayashi, Hiroyuki Tsuchiya, Norio Yamamoto, Toshiharu Shirai, Kensuke Yamauchi, Akihiko Takeuchi, Hiroaki Kimura, Yasunori Tome, Masanori Kawano, Robert M.Hoffman, Katsuro Tomita
  • 学会等名: 7th Asia Pacific Musculoskeletal Tumor Society
  • 発表場所: China National Convention Center (China)
  • 年月日: 2008-09-26
• [学会発表] 蛍光イメージングとがん治療. (2008)
  • 著者名/発表者名: 林克洋, 土屋弘行, 山本憲男, 白井寿治, 山内健輔, 大成一誓, 武内章彦, 河野正典, 富田勝郎
  • 学会等名: 第11回骨軟部腫瘍セミナー
  • 発表場所: 金沢都ホテル(石川)
  • 年月日: 2008-09-06
• [学会発表] ロバートホフマンサルモネラ変異株を応用したリンパ節転移の治療と蛍光イメージング. (2008)
  • 著者名/発表者名: 林克洋, ミンジョ, 山内健輔, 山本憲男, 土屋弘行, 富田勝郎
  • 学会等名: 第17回日本がん転移学会
  • 発表場所: サンロイヤルホテル鹿児島(鹿児島)
  • 年月日: 2008-07-24
• [学会発表] 蛍光蛋白を使った腫瘍と血管新生のイメージング. (2008)
  • 著者名/発表者名: 林克洋, 土屋弘行, 山本憲男, 白井寿治, 山内健輔, 武内章彦, 木村浩明, 當銘保則, 河野正典, ロバートホフマン, 富田勝郎
  • 学会等名: 第41回日本整形外科学会骨軟部腫瘍学術集会
  • 発表場所: アクトシティ浜松(静岡)
  • 年月日: 2008-07-18
• [学会発表] Hoffman An imageable nude-mouse treatment model of metastatic paralyzing spinal-cord cancer. (2008)
  • 著者名/発表者名: Katsuhiro Hayashi, Ming Zhao, Kensuke Yamauchi, Norio Yamamoto, Hiroyuki Tsuchiya, Katsuro Tomita, Hiroyuki Kishimoto, Michael Bouvet, Robert M.
  • 学会等名: 99th American Association for Cancer Research
  • 発表場所: San Diego Convention Center (USA)
  • 年月日: 2008-04-12
• [学会発表] Hoffman Cancer metastasis cured by specific targeting of a modified Salmonella Typhymurium. (2008)
  • 著者名/発表者名: Katsuhiro Hayashi, Ming Zhao, Kensuke Yamauchi, Norio Yamamoto, Hiroyuki Tsuchiya, Katsuro Tomita, Hiroyuki Kishimoto, Michael Bouvet, Robert M.
  • 学会等名: 99th American Associati for Cancer Research
  • 発表場所: San Diego Convention Center (USA)
  • 年月日: 2008-04-12
• [学会発表] Hoffman Targeting of primary bone tumor and lung metastasis of high-grade osteosarcoma in nude mice with a tumor-selective strain of Salmonella typhymurium. (2008)
  • 著者名/発表者名: Katsuhiro Hayashi, Ming Zhao, Kensuke Yamauchi, Norio Yamamoto, Hiroyuki Tsuchiya, Katsuro Tomita, Hiroyuki Kishimoto, Michael Bouvet, Robert M.
  • 学会等名: 99th American Association for Cancer Research
  • 発表場所: San Diego Convention Center (USA)
  • 年月日: 2008-04-12
• [備考] ホームページ
  • URL: http://web.kanazawa-u.ac.jp/~med27/kenkyu/pages/bone_group.html