| 研究課題/領域番号 |
20390402
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| 研究機関 | 大分大学 |
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研究代表者 |
吉岡 秀克 大分大学, 医学部, 教授 (00222430)
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| 研究分担者 |
松尾 哲孝 大分大学, 医学部, 准教授 (10284788)
住吉 秀明 大分大学, 医学部, 助教 (60343357)
浜中 良志 大分大学, 医学部, 助教 (60274750)
二宮 善文 岡山大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (70126241)
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| キーワード | コラーゲン / 遺伝子発現 / 骨 / 軟骨 / 細胞外マトリックス / 転写調節 |
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| 研究概要 |
間葉系幹細胞より骨芽細胞、軟骨細胞、筋芽細胞、歯芽細胞が分化する。分化後、これらの細胞はコラーゲン分子を産生するようになる。その中で、私たちは組織に比較的微量に存在するV/XI型コラーゲンの遺伝子発現及び機能に関する研究を行っている。平成22年度は以下の2点について主な結果を得た。
1)V型コラーゲンα1鎖(α1(V))遺伝子の転写調節:以前、横紋筋肉腫細胞を用いた研究において、この遺伝子の近位プロモーター領域に転写因子CBF/NF-Yが結合することを認めた。本年度は骨芽細胞を用い、骨芽細胞に特異的に発現する転写因子Sp7/Osterixの関与について調べた。その結果、Sp7/OsterixはSp1結合部位に結合し、Sp1よりもV型コラーゲンα1遺伝子の転写活性を増加させた。また、特異的なRNAiで25%程度抑制することができた。また、前骨芽細胞を骨芽細胞に分化させると成熟するにつれ、Sp7/Osterixの発現が増加し、それに比例し、V型コラーゲンα1鎖遺伝子の転写活性が増加した。
2創傷治癒におけるV型コラーゲンα3鎖(α3(V))遺伝子の発現:マウス背部に全層欠損マウスを作製し、フィブリル型コラーゲンの発現をRT-PCR法で定量した。その結果、他の鎖に比べ、発現量は低く、4～10日にかけて一過性であった。特異抗体を作製し、免疫電顕を行ったところ、α1鎖が細いフィブリルに存在しているのに対し、この鎖はコラーゲン線維や細いフィブリルには見られず、不定型な構造の中に存在していた。また、以前のin vitroの研究で示唆したように、ヘパラン硫酸と一緒に同部位に存在していた。
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