| 研究課題/領域番号 |
20390504
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| 研究機関 | 独立行政法人国立長寿医療研究センター |
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研究代表者 |
中島 美砂子 独立行政法人国立長寿医療研究センター, 口腔疾患研究部, 室長 (20207773)
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| 研究分担者 |
庵原 耕一郎 国立長寿医療センター(研究所), 口腔疾患研究部, 特任研究員 (60435865)
渡邊 淳 国立長寿医療センター(研究所), 加齢健康脳科学研究部, 室長 (90321843)
中村 洋 愛知学院大学, 歯学部, 教授 (40064878)
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| キーワード | 歯髄マーカー / 歯髄再生 / プロテオーム / 歯髄幹細胞 / 組織幹細胞 |
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| 研究概要 |
本研究は、歯髄細胞、歯髄幹細胞および他組織の幹細胞の差次的プロテオミクスによる網羅的な蛋白質解析により、歯髄幹細胞に特異的なマーカーを得る。これにより、他の組織幹細胞から歯髄幹細胞を誘導し、安全で侵襲性なく象牙質・歯髄再生のための幹細胞源を得る新しい方法を確立することを目的とする。本年度は、まず、同意を得たヒト抜去歯髄組織から酵素消化法にて歯髄細胞を分散させた。その歯髄細胞をCD105抗体でラベルしてフローサイトメトリーにてCD105^+細胞を分取した。また、市販のヒト骨髄細胞およびヒト羊膜間葉系幹細胞から、同様に骨髄CD105^+細胞および羊膜CD105^+細胞を分取した。その3種の細胞からそれぞれ蛋白質を溶出し、二次元電気泳動し、銀染色後、パターンを比較し、歯髄幹細胞に特異的なスポットを切り出し、還元アルキル化を行った後、トリプシン消化を行った。得られたペプチドはnano-LC/MS/MSを用いてショットガン法により解析した。得られた結果はヒトデータベースを用い、歯髄幹細胞に特異的なマーカーの検索を行なった。ペプチド解析の結果、免疫抑制タンパク群のひとつであるFK506 binding proteinならびに中間径フィラメントに類似するunnamed protein productを検出した。unnamed protein productは中間径フィラメントは組織特異性があるといわれており、歯髄幹細胞に特異的なマーカーである可能性があり、現在検討中である。
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