研究課題
ハンチントン病(HD)は舞踏運動、精神および知能障害を特徴とする遺伝性の神経難病で、ハンチンチン遺伝子に存在するCAGトリプレットリピートの伸長[翻訳産物は伸長ポリグルタミン(polyQ)]が原医で発症する。ナトリウムチャネルβ4サブユニット(ベータ4、β4)は主として線条体で発現し、HDトランスジェニックマウス(TG)では神経症状、病理所見がみられる前に発現が顕著に抑制される。昨年度までの研究で、β4プロモーター制御下で蛍光タンパク質を発現し、HD TGと交配すると発現が抑制されるTGの作製に成功した。本年度は線条体よりフローサイトメーターで神経細胞(β4を発現しHDで障害される)を分離し、分子生物学的手法で解析することを試みた。β4 promoter-Venus TG の線条体をパパインで処理し、β4 promoter でドライブされたVenus の蛍光を指標にフローサイトメーターでβ4を発現している神経細胞を精製した。精製した神経細胞における内在性β4とβ4 promoterでドライブされたVenusの発現をTaqMan RT-PCR法で定量したところ、分離した神経細胞は内在性のβ4、トランスジーンにコードされたVenusを発現し、伸長polyQによりそれらの発現が抑制されることが分かった。この神経細胞では、Penk1、DARPP-32などHDで発現抑制が起こる遺伝子も同様に発現の低下が認められた。このことから、"HDで障害される神経細胞"を分離に成功したと考えた(Oyama et al投稿準備中)。現在DNA microarray法で神経細胞における伸長polyQによる遺伝子発現抑制に関係する遺伝子を検索中である。
すべて 2010
すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件)
Proc.Natl.Acad.Sci.USA.
巻: 107 ページ: 2283-2288
