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新たなコンジェニックマウス系統の樹立には、性成熟マウスを用いた戻し交配を行うために1世代約3-4ヶ月かかり系統樹立に2-5年という長い時間がかかり本来の目的である遺伝子や表現型に関する研究開始になかなか到達できないという欠点があった。本研究では自然交配の代替として未成熟雄マウスの生殖細胞と多型マイクロサテライトマーカーによる選抜システムを併用することで1世代交代あたりの時間短縮を図る超スピードコンジェニック法の確立を試みた。
去年度までに、(1)未成熟雄マウスの生殖細胞を顕微授精に用いるにあたり、生後22日齢以降の円形精子細胞であれば安定して多数の産仔が得られること、(2)既存の遺伝子改変マウスを用いてC57BL/6(B6)コンジェニック化を試みた。マーカー上でのコンジェニック化完了期間は106-190日で、従来法と比較して半分以下の期間に短縮できることが明らかになった。5系統7ラインのコンジェニック系統の樹立に至った。
今年度はB6以外の系統への応用を目指し、既存の遺伝子改変マウスを用いてNOD/scidを受容系統としたコンジェニック化(2系統2ライン)の検討を行った。生後22-24日齢の円形精子細胞を用いた場合、産仔獲得効率がB6コンジェニック化と比較して低率であったが同様の期間でマーカー上のコンジェニック化が完了した。産仔効率が低い系統を受容系統とする場合、生後28日齢以降の伸張精子細胞を用いたほうがより安定したコンジェニック化が進められることが示唆された。また本法はB6以外の系統でも適用できることが明らかになった。
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