研究課題
細胞のDNA合成レベルが放射線照射後低下することは、生物種を問わない不変の現象である。ところが、X線照射後にDNA合成レベルが上昇するという奇異な現象をゴーリン患者由来細胞で我々は見出した(Fujii et al., Biochem. Biophys.Res.Commun.240, 269-272, 1997)。さらに、ゴーリン患者由来細胞において、X線照射後に発現レベルが低下する遺伝子として、ユビキチン様タンパク質SUMOを同定し、正常ヒト細胞においてアンチセンスオリゴ処理によりSSUMO遺伝子の発現を抑制すると、X線照財後にDNA合成レベルの上昇することを見出している(Mutat.Res.578, 327-332, 2005)。HeLa細胞においても、SUMOのSiRNA処理により、SUMO遺伝子の発現を低下させると、X線照射による合成の誘導現象を再現させることに成功している。そこで、X線照射後に細胞内含有量が変動するタンパクを2次元電気泳動法による網羅的解析で探索したところ、複数のタシパク質の変動が見られたが、その中に、腫瘍転移抑制因子として知られるNM23-H1タンパクが減少することを見出した。NM23-H1遺伝子のsiRNA処理により、発現を抑制させると、X線照射後にDNA合成の増大見られた。さらに、ウェスタンブロッティング解析より、SUMO遺伝子の発現を抑制した細胞において、X線照射後のNM23-H1タンパクの減少を確認できた。また、NM23-H1のsiRNA処理により、X線照射によるDNA合成の誘導現象がみられた。一方、SUMOタンパクを過剰発環させた細胞では、X線照射後にNM23-H1タンパクのSUMO化がみられた。以上の結果から、X線照射後のSUMOが関わるDNA合成上昇にNM23-H1も関わることが示唆された。さらに、NM23-H1のSiRNA処理した細胞では、X線照射にPCNAの発現の増大が見られたことから、PCNAを介したDNA合成機構にSUMOが関わることが示唆された。
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