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2009 年度 実績報告書

振動と光を用いたタンパク質物性の多次元解析と機能制御

研究課題

研究課題/領域番号 20510100
研究機関東京工業大学

研究代表者

川崎 剛美  東京工業大学, 大学院・生命理工学研究科, 助教 (60334504)

キーワード水晶発振子 / 金異常反射 / 粘弾性測定 / DNA / プロテアーゼ
研究概要

本研究では、水晶発振子マイクロバランス法(QCM)と光反射測定を組み合わせた同時測定に関するものでもあるが、光測定法として21年度においては、酸化チタン/チタン薄膜を用いた反射干渉分光法が本系に応用できるか検討することとした。QCM上に蒸着した金属チタンを陽極酸化することにより、光干渉層としての酸化チタン薄膜を作成した。この表面に対して有機物が吸着することで干渉スペクトルのシフトが起こり、これにより吸着物質量の定量を行うことができる。結果として、理論道理の感度の向上が達成された。この装置を用い、各種タンパク質の表面への吸着過程のQCM/光反射同時測定を行った。その結果、タンパク質固有の粘弾性に依存したパラメータの算出が可能となることが示された。
また本年度は、昨年度から引き続き行っているQCMと金の異常反射(AR)を組み合わせた測定装置を、これまでのフロー式から変え、バッチ式で行えるように新たに開発を行った。これによって、長時間の反応追跡が行えるようになった。この装置のキャリブレーションを行うとともに、DNAの構造に依存したQCM/AR同時測定による構造特異性を明らかにすることができた。具体的には二本鎖と一本鎖DNAの鎖長に依存した同時測定パラメータが得られ、これが高分子溶液粘度の分子量依存性を示すMark-Houwink-Sakurada式とよい相関があることが示された。分子量範囲と精度を上げた結果であったが、フロー式で得られたものの再現性も確認された。
さらに、プロテアーゼの酵素活性の振動効果についての検討もQCM/光反射同時測定装置によって行った。その結果、基質タンパク質の粘弾性に応じて、反応動力学パラメータが振動の有る無しで変化し得ることが分かった。

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2010 2009

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件) 学会発表 (3件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] Covalent Modification of DNA with Azetidinium Lipids2010

    • 著者名/発表者名
      Yusuke Yonamine, Takayoshi Kawasaki, Yoshio Okahata
    • 雑誌名

      Chemistry Letters 39

      ページ: 84-85

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Laser Response of a Quartz Crystal Microbalance : Frequency Changes Induced by Light Irradiation in the Air Phase2009

    • 著者名/発表者名
      Takayoshi Kawasaki, Tetsuhiro Mochida, Jun-ichi Katada, Yoshio Okahata
    • 雑誌名

      Analytical Sciences 25

      ページ: 1069-1075

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Pulse Frequency-dependent Regulation of the Lysozyme Reactivity under Pulsed Ultrasound Irradiation2009

    • 著者名/発表者名
      Takayoshi Kawasaki, Momoko Toyoda, Yoshio Okahata
    • 雑誌名

      Chemistry Letters 38

      ページ: 538-539

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Pulsed Ultrasound Effect on DNA Polymerase Reaction Monitored on a QCM2009

    • 著者名/発表者名
      Takayoshi Kawasaki, Momoko Toyoda, Yu Hoshino, Yoshio Okahata
    • 雑誌名

      Chemistry Letters 38

      ページ: 536-537

    • 査読あり
  • [学会発表] 光干渉法と水晶発振マイクロバランス法を組み合わせた表面吸着膜の測定2010

    • 著者名/発表者名
      川崎剛美
    • 学会等名
      日本化学会第90春季年会
    • 発表場所
      近畿大学本部キャンパス
    • 年月日
      2010-03-29
  • [学会発表] 光反射QCM法を用いたタンパク質の硬さに依存する加水分解反応2009

    • 著者名/発表者名
      川崎剛美
    • 学会等名
      第58回高分子討論会
    • 発表場所
      熊本大学黒髪キャンパス
    • 年月日
      2009-09-16
  • [学会発表] 光反射QCMの金基板の多重表面修飾による感度向上2009

    • 著者名/発表者名
      小島泰輔
    • 学会等名
      第58回高分子討論会
    • 発表場所
      熊本大学黒髪キャンパス
    • 年月日
      2009-09-16
  • [産業財産権] 反射スペクトル測定用積層構造および薄膜厚測定方法2010

    • 発明者名
      川崎剛美、岡畑恵雄
    • 権利者名
      東京工業大学
    • 産業財産権番号
      特願2010-053556
    • 出願年月日
      2010-03-10

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公開日: 2011-06-16   更新日: 2016-04-21  

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