試料発現の新展開:高等植物細胞を利用した成熟型タンパク質の大量発現と選択標識

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20510198
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物分子科学
• 研究機関: 北陸先端科学技術大学院大学
• 研究代表者: 大木 進野 北陸先端科学技術大学院大学, ナノマテリアルテクノロジーセンター, 准教授 (70250420)
• 研究分担者: 森 正之 石川県立大学, 生物資源工学研究所, 准教授 (00320911)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: タンパク質 / 生体分子 / バイオテクノロジー / ウイルス / 植物

研究概要

植物細胞とウイルスベクターを利用した新規のタンパク質試料調製法を確立した.また,これを用いて,一般的な大腸菌利用の系では調製できないタンパク質の発現に成功した.この系を用いて安定同位体標識サンプルが調製できるようになった.このシステムの有用性を示すため,大腸菌などでは調製困難な1つのタンパク質を例にとり,タンパク質の発現・標識・3次元構造解析を行った.本研究を通じて,多くの調製困難なタンパク質を解析できるかもしれない新しい技術が確立できた.

研究成果

• [雑誌論文] Structure of Calmodulin Binding Region of mGluR 7 and Its Interaction with Calmodulin (2011)
  • 著者名/発表者名: N.Isozumi, A.Nakatomi, N.Nemoto, M.Yazawa, S.Ohki
  • 雑誌名: J.Biochem. 149 ページ: 463-476
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stable-Isotope Labeling using an Inducible Virus Vector and Suspension Cultured Plant Cells (2008)
  • 著者名/発表者名: S.Ohki, K.Dohi, A.Tamai, M.Mori.
  • 雑誌名: J.Biomol.NMR 42 ページ: 271-277
  • 査読あり
• [学会発表] 気孔密度を正に制御するストマジェンの構造解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 竹内誠, 菅野茂夫, 嶋田知生, 西村いくこ, 森正之, 大木進野
  • 学会等名: 第49回NMR討論会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20101115-20101117
• [学会発表] Protein sample preparation with plant cells ; expression and labeling (2010)
  • 著者名/発表者名: 大木進野, 竹内誠, 玉井淳史, 森正之
  • 学会等名: 24th ICMRBS
  • 発表場所: Cairns, Australia
  • 年月日: 20100822-20100827
• [学会発表] 新規な手法で調製したタンパク質試料の品質評価 (2010)
  • 著者名/発表者名: 森正之, 竹内誠, 大木進野
  • 学会等名: 第8回ナノテクシンポジウム
  • 発表場所: 奈良
  • 年月日: 2010-03-19
• [学会発表] 植物培養細胞と誘導可能なウイルスベクターを利用したタンパク質試料の調製 (2009)
  • 著者名/発表者名: 竹内誠, 玉井淳史, 森正之, 大木進野
  • 学会等名: 第48回NMR討論会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20091110-20091112
• [学会発表] タンパク質試料調製技術の開発と評価 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大木進野
  • 学会等名: 第6回ナノテクシンポジウム
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2009-03-13
• [学会発表] 植物培養細胞と誘導可能なウィルスベクターを利用したタンパク質試料の調製 (2008)
  • 著者名/発表者名: 竹内誠, 玉井淳史, 土肥浩二, 森正之, 大木進野
  • 学会等名: 第47回NMR討論会
  • 発表場所: つくば
  • 年月日: 20081112-20081114
• [学会発表] Stable-Isotope labeling using plant cells and Inducible-virus vector (2008)
  • 著者名/発表者名: 大木進野, 土肥浩二, 玉井淳史, 竹内誠, 森正之
  • 学会等名: 23rd ICMRBS
  • 発表場所: San Diego, USA
  • 年月日: 20080824-20080829
• [備考] ホームページ等 所属機関の研究者総覧 に研究業績を記載.
  • URL: http://www.jaist.ac.jp/profiles/info.php?profile_id=00338
• [備考] また,研究室のホームページ にも研究内容を紹介.
  • URL: http://www.jaist.ac.jp/nmcenter/labs/s-ohki-www/