プロペプチドの分子内シャペロン機能の解明と新規生理活性ペプチドの創作

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20510207
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物分子科学
• 研究機関: 近畿大学
• 研究代表者: 日高 雄二 近畿大学, 理工学部, 教授 (70212165)
• 連携研究者: 山口 宏 関西学院大学, 理工学部, 教授 (10252719)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2011
• キーワード: フォールディング / 生理活性ペプチド / プロペプチド / 前駆体 / ウログアニリン / グアニル酸シクラーゼ / 構造生物学 / 結晶構造

研究概要

本研究は、ペプチドホルモンの前駆体蛋白質の立体構造形成の意義を明らかにすること、プロ領域の分子内シャペロン機能を有効利用することを目的として行われた。題材として腸管水分調節ホルモン(ウログアニリン)の前駆体プロウログアニリンを用い、その結晶構造の解明、変異体の立体構造形成反応を追跡した。その結果、分子進化における生理活性構造の形成と進化・保持に関する重要な知見を得ることができた。

研究成果

• [雑誌論文] Chemical Method to Investigate Peptide and Protein Folding (2012)
  • 著者名/発表者名: Masaki Okumura, Shigeru Shimamoto, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: FEBS Journal 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stem-forming regions that are essential for the amyloidogenesis of prion proteins (2012)
  • 著者名/発表者名: Masatoshi Saiki, Yuji Hidaka, Masayuki Nara, and Hisayuki Morii
  • 雑誌名: Biochemistry 巻: 51 ページ: 1566-1576
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cooperative Communication between the Mature and the Pro-Peptide Region in Prouroguanylin during Folding (2012)
  • 著者名/発表者名: Yu-ichiro Yoshida, Masaki Okumura, Shigeru Shimamoto, Kyohei Hasegawa, Hiroshi Yamaguchi, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2011 ページ: 193-196
  • 査読あり
• [雑誌論文] Folding Analysis of Prouroguanylin via Specific Intermediates Using Protein Disulfide Isomerase (2012)
  • 著者名/発表者名: Masaki Okumura, Yu-ichiro Yoshida, Takuma Maekawa, Kumiko Sumi, Hiroshi Yamaguchi, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2011 ページ: 227-228
  • 査読あり
• [雑誌論文] High Level Expression of Proopiomelanocortin Using an Artificial Gene in E. Coli Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Tadafumi Konogami, Kenji Watanabe, Shigeru Shimamoto, Ajoy Basak, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2011 ページ: 367-368
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of Leu66 in the Folding of Uroguanylin Assisted by the Pro-peptide Region (2011)
  • 著者名/発表者名: Yu-ichiro Yoshida, Masaki Okumura, Hiroshi Yamaguchi, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2010 ページ: 163-163
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acceleration of Disulfide-Coupled Protein Folding Using Glutathione Derivatives (2011)
  • 著者名/発表者名: Masaki Okumura, Masatoshi Saiki, Hiroshi Yamaguchi, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: FEBS Journal 巻: 278 ページ: 1137-1144
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fiber Formation of a Synthetic Spider Peptide Derived from Nephila Clavata (2011)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka, Ko-ichi Kontani, Rina Taniguchi, Masatoshi Saiki, Sayoko Yokoi, Kenji Yukuhiro, Hiroshi Yamaguchi and Mitsuhiro MiyazawaFiber
  • 雑誌名: Biopolymers 巻: 96 ページ: 222-227
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fiber Formation of a Synthetic Peptide Derived from Spider Dragline Silk of Nephila (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka, Kouich Kon-tani, Masatoshi Saiki, Sayoko Yokoi, Rina Taniguchi, Hiroshi Yamaguchi, Kenji Yukuhiro, and Mitsuhiro Miyazawa, Fiber
  • 雑誌名: clavata Peptide Science 巻: 2009 ページ: 113-114
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression and Purification of Selenomethionyl Proopiomelanocortin (2010)
  • 著者名/発表者名: Kenji Watanabe, Yohei Hosokawa, Len Ito, Ajoy Basak, Hiroshi Yamaguchi, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2009 ページ: 421-422
  • 査読あり
• [雑誌論文] Folding Analyses of Gly or Ala mutants to evaluate the intra-molecular chaperone (2010)
  • 著者名/発表者名: Hironori Konishi, Masaki Okumura, Masatoshi Saiki, Hiroshi Yamaguchi, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2009 ページ: 25-28
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of the Extracellular Domain of the Human Amyloid Precursor Protein (2010)
  • 著者名/発表者名: Atsushi Matsuoka, Tomoaki Yamashita, Ami Arai, Len Ito, Masaki Okumura, Hiroshi Yamaguchi, Michio Niinobe, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2009 ページ: 427-430
  • 査読あり
• [雑誌論文] Thermodynamic Analysis of the Propeptide-mediated Folding of de novo-designed Disulfide Hybrid Protein (2010)
  • 著者名/発表者名: Masaki Okumura, Hironori Konishi, Yuhei Yamazaki, Hiroshi Yamaguchi, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2009 ページ: 203-206
  • 査読あり
• [雑誌論文] Post-translational Modifications of Tubulin in the Nervous System (2009)
  • 著者名/発表者名: Nobuyuki Fukushima, Daisuke Furuta, Yuji Hidaka, Ryutaro Moriyama, and Toshifumi Tsujiuchi
  • 雑誌名: Journal of Neurochemistry 巻: 109 ページ: 683-693
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recognition of the N-Terminal Histone H2A and H4 Peptides by Peptidylarginine Deiminase IV (2009)
  • 著者名/発表者名: Masatoshi Saiki, Mayumi Watase, Hironori Matsubayashi, and Yuji Hidaka
  • 雑誌名: Protein and Peptide Letters 巻: 16 ページ: 1012-1016
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystallization and Preliminary X-ray Structural Studies of Human Prouroguanylin (2008)
  • 著者名/発表者名: Len Ito, Yuji Hidaka, Masaki Okumura, Hironori Konishi, Adermann Knut, and Hiroshi Yamaguchi
  • 雑誌名: Acta Crystallogr. Sect F Struct Biol Cryst Commun 巻: 64(8) ページ: 771-772
  • 査読あり
• [学会発表] Acceleration of disulfide-coupled protein folding by positively charged glutathione derivative (2012)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 発表場所: San Diego(USA)
  • 年月日: 2012-02-26
• [学会発表] Role of Leu66 in the Folding of Uroguanylin-assisted by Intra-molecular Chaperone (2012)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 発表場所: San Diego(USA)
  • 年月日: 2012-02-26
• [学会発表] High Level Expression of Proopiomelanocortin in E. Coli Cells using Optimized Codons (2012)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 発表場所: San Diego(USA)
  • 年月日: 2012-02-26
• [学会発表] Folding Mechanism of a Precursor Protein of A Peptide Hormone Mediated by an Intra-molecular Chaperone (2012)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 発表場所: San Diego(USA)
  • 年月日: 2012-02-26
• [学会発表] Cooperative Communication between the Mature and the Pro-Peptide Region in Prouroguanylin during Folding (2011)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-28
• [学会発表] High Level Expression of Proopiomelanocortin Using an Artificial Gene in E. Coli Cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-28
• [学会発表] Folding Analysis of Prouroguanylin via Specific Intermediates Using Protein Disulfide Isomerase (2011)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-27
• [学会発表] Heparin-Induced Conformational Changes in the Extracellular Domain ofυ-Amyloid Precursor Protein (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 学会等名: 5th International Peptide Symposium
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-12-05
• [学会発表] Role of Leu66 in the Folding of Uroguanylin Assisted by the Pro-peptide Region (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 学会等名: 5th International Peptide Symposium
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-12-05
• [学会発表] Oxidative Folding of Prouroguanylin (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 学会等名: 5th International Peptide Symposium
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-12-05
• [学会発表] Fiber Formation of Peptide Fragments Derived from Spider Dragline Silk Protein (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuji Hidaka
  • 学会等名: 5th International Peptide Symposium
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-12-05
• [図書] 最新ペプチド合成技術とその創薬への応用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 奥村正樹、日高雄二、メディカルドゥ
  • 総ページ数: 192-198
  • 出版者: (株)メディカルドゥ
• [産業財産権] ジスルフィド結合交換反応を利用した蛋白質の立体構造形成促進試薬 (2010)
  • 発明者名: 日高雄二
  • 権利者名: 日高雄二
  • 産業財産権番号: 特許、特願2010-270195
  • 出願年月日: 2010-12-03