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2009 年度 実績報告書

変異体構造解析による光化学系II複合体の構造制御機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 20570038
研究機関岡山大学

研究代表者

沈 建仁  岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 教授 (60261161)

キーワード光合成 / 光化学系II / 膜タンパク / 結晶化 / 結晶構造解析 / タンパク質複合体 / 酸素発生 / 変異体
研究概要

本研究の目的は、光合成光化学系II複合体(以下PSIIとする)における各低分子量サブユニ2ットの役割を、それぞれのサブユニット欠失変異体を用いて、結晶化・X線結晶構造解析と機能解析を組み合わせて解析し、PSII複合体の構造形成・制御機構を明らかにすることである。本年度では、PsbM, PsbI欠失変異体からPSIIを単離精製・結晶化し、構造解析と機能解析を行った。PsbMはPSII二量体の中心に位置し、2つのPSII単量体をつなぐ境界に存在していることから、PSII二量体の形成と安定化に重要であるとされてきた。一方、PsbIはPSII二量体の周辺部、D1サブユニットの外縁に存在し、立体構造から二量体の形成や安定化に関与しないことが推測される。PsbM, PsbI欠失変異株由来PSIIの結晶構造解析により、それぞれのサブユニットの存在位置を確認した。PsbM変異体では、PSII二量体の量が減少したので、PsbMが二量体の形成に重要であるという立体構造からの推定と一致した。しかし、PsbMが欠失しても二量体が相当量形成され、PsbMがなくてもPSII二量体が形成できることが示された。一方、PsbI変異体でもこ量体の量が減少し、立体構造からの推定と異なった結果となった。両変異体から精製したPSII二量体の安定性を調べるため、高温・界面活性剤処理を行った。その結果、この処理に対して野生株やPsbI変異株由来の二量体は安定であったが、PsbM変異株由来二量体は単量体へ解体された。これらの結果から、PsbIはinvivoでのPSII二量体の形成に必要であり、一旦形成された二量体はPsbIがなくても安定であるのに対し、PsbMを欠いたPSII二量体は不安定になり、界面活性剤処理により単量体へ分解されたことが結論付けられた。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2009

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Towards structural elucidation of eukaryotic photosystem II : Purification, crystallization and preliminary X-ray diffraction analysis of photosystem II from a red alga2009

    • 著者名/発表者名
      H.Adachi, Y.Umena, I.Enami, T.Henmi, N.Kamiya, J.-R.Shen
    • 雑誌名

      Biochim. Biophys. Acta 1787

      ページ: 121-128

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Probing tyrosine Z oxidation in photosystm. II core complex isolated from spinach by EPR at liquid helium temperatures2009

    • 著者名/発表者名
      Y.Ren, C.Zhang, H.Bao, J.-R.Shen, J.Zhao
    • 雑誌名

      Photosynthesis Research 99

      ページ: 127-138

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Location of chloride and its possible functions in oxygen-evolving photosystem II revealed by X-ray crystallography2009

    • 著者名/発表者名
      K.Kawakami, Y.Umena, N.Kamiya, J.-R.Shen
    • 雑誌名

      Proc. Natl. Acad. Sci. USA 106

      ページ: 8567-8572

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 光化学系IIの例から見る膜タンパク質複合体の結晶化と構造解析2009

    • 著者名/発表者名
      沈建仁・川上恵典
    • 雑誌名

      光合成研究 19

      ページ: 19-25

  • [雑誌論文] 系II複合体の精製法2009

    • 著者名/発表者名
      沈建仁・榎並勲
    • 雑誌名

      低温科学 67

      ページ: 275-283

  • [雑誌論文] 電子伝達活性2009

    • 著者名/発表者名
      沈建仁
    • 雑誌名

      低温科学 67

      ページ: 551-560

  • [学会発表] Structure and function of oxygen-evolving photosystem II2009

    • 著者名/発表者名
      J.-R.Shen
    • 学会等名
      Pre-RCE Workshop on Catalysis for Efficient and Sustainable Energy
    • 発表場所
      シンガポール
    • 年月日
      2009-05-28

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公開日: 2011-06-16   更新日: 2016-04-21  

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