棘皮動物マナマコ神経ペプチドの網羅的解析と神経機能分化の探索

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20570057
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 形態・構造
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 吉国 通庸 九州大学, 大学院・農学研究院, 教授 (50210662)
• 連携研究者: 大野 薫 自然科学研究機構, 基礎生物学研究所, 教 (10260035)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: 比較内分泌

研究概要

マナマコ周口神経を含む口器部分のEST 解析と神経抽出物の質量分析を実施したが、神経組織に特有なmRNA・ペプチドの検出数が少なく、組織純度が低すぎることが判明した。高純度の神経組織を調製するために、新規に有機溶媒置換凍結乾燥法を開発した。これにより、神経ペプチドと通常の転写因子遺伝子の発現比(peptide mRNA/EF1α mRNA)から、従来法に比べ神経組織純度が数十倍に向上した。マナマコ神経系から生殖腺刺激ペプチドクビフリンを発見した。

研究成果

• [雑誌論文] Spawning induced by cubifrin in the Japanese common sea cucumber, Apostichopus japonicus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara A, Yamano K, Ohno K, Yoshikuni M.
  • 雑誌名: Fisheries. Science. 76 ページ: 795-801
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular characterization of the major yolk protein of the Japanese common sea cucumber (Apostichopus japonicus) and its expression profile during ovarian development. (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara A, Unuma T, Ohno K, Yamano K.
  • 雑誌名: Comparative Biochemistry and Physiology., Part A. 155 ページ: 34-40
  • 査読あり
• [雑誌論文] A relaxin-like peptide purified from radial nerves induces oocyte maturation and ovulation in the starfish, Asterina pectinifera. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mita M, Yoshikuni M, Ohno K, Shibata Y, Paul-Prasanth B, Pitchayawasin S, Isobe M, Nagahama Y.
  • 雑誌名: Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA 106 ページ: 9507-9512
  • 査読あり
• [雑誌論文] Neuronal peptides induce oocyte maturation and gamete spawning of sea cucumber, Apostichopus japonicus. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kato S, Tsurumaru S, Taga M, Yamane T, Shibata Y, Ohno K, Fujiwara A, Yamano K, Yoshikuni M.
  • 雑誌名: Developmental Biology. 326 ページ: 169-176
  • 査読あり
• [学会発表] Comprehensive analysis of neuropeptides in marine invertebrates. (2011)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 第2回JAMBIOフォーラム
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2011-01-21
• [学会発表] 棘皮動物における卵成熟のホルモン制御 (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 第35回日本比較内分泌学会シンポジウム「無脊椎動物における性と生殖の制御」
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2010-11-18
• [学会発表] 海産無脊椎動物神経ペプチドの網羅的解析の試み (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 第81回日本動物学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-09-23
• [学会発表] クビフリンを用いたin vitro卵成熟誘起によるマナマコ採卵技術の開発-II (2010)
  • 著者名/発表者名: 山野恵祐
  • 学会等名: 平成22年度日本水産学会秋季大会
  • 年月日: 2010-09-22
• [学会発表] The role of neuropeptides in inducing gamete spawning of echinoderm. (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 第11回国際精子学シンポジウム
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 2010-06-24
• [学会発表] ナマコの卵成熟と産卵 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山野恵祐
  • 学会等名: 日本農芸化学会2010年度大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-03-27
• [学会発表] 棘皮動物の生殖を司る神経ペプチド (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 第34回日本比較内分泌学会シンポジウム「新たな生物材料や分子が導く一般解と特殊解」
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-22
• [学会発表] クビフリンを用いたin vitro卵成熟誘起によるマナマコ採卵技術の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山野恵祐
  • 学会等名: 平成21年度日本水産学会秋季大会
  • 年月日: 2009-09-29
• [学会発表] マナマコクビフリンの作用機構の解析:クビフリンアナログの作用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 第80回日本動物学会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2009-09-17
• [学会発表] Spawning behavior of Japanese sea cucumber (Apostichopus japonicus) induced by a neuropeptide, Cubifrin. (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 第16回国際比較内分泌学会議
  • 発表場所: HongKong.
  • 年月日: 2009-06-24
• [学会発表] Proteome analysis of buccal ring nerve and radial nerve of Japanese common sea cucumber, Apostichopus japonicus. (2009)
  • 著者名/発表者名: 鶴丸早織
  • 学会等名: 16回国際比較内分泌学会議
  • 発表場所: HongKong.
  • 年月日: 2009-06-22
• [学会発表] Identification of neural peptides inducing oocyte maturation of Japanese common sea cucumber, Apostichopus japonicus. (2009)
  • 著者名/発表者名: 加藤愼一
  • 学会等名: 16回国際比較内分泌学会議
  • 発表場所: HongKong.
  • 年月日: 2009-06-22
• [学会発表] In vitro oocyte maturation induced by a neuropeptide in the Japanese common sea cucumber and its application to aquaculture. (2009)
  • 著者名/発表者名: 山野恵祐
  • 学会等名: 16回国際比較内分泌学会議
  • 発表場所: HongKong.
  • 年月日: 2009-06-22
• [学会発表] マナマコの放卵・放精を誘起する神経ペプチドの同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 平成21年度日本水産学会春季大会
  • 年月日: 2009-03-27
• [学会発表] 卵成熟誘起能をもつマナマコ神経ペプチドの作用経路 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山野恵祐
  • 学会等名: 平成21年度日本水産学会春季大会
  • 年月日: 2009-03-27
• [学会発表] マナマコの卵成熟を誘起する神経ペプチドの同定 (2008)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 第33回日本比較内分泌学会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2008-12-05
• [学会発表] マナマコ卵成熟を誘起する生理活性物質の単離と同定 (2008)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 学会等名: 第79回日本動物学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2008-09-05
• [図書] 第3章 成熟・産卵,「ナマコ-その生物・産業・文化」(高橋明義編) (2011)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 出版者: 成山堂in press
• [図書] 第1章 海洋生物のホルモン,「天然物化学-海洋生物編」 (2008)
  • 著者名/発表者名: 吉国通庸
  • 総ページ数: 3-21
  • 出版者: APC出版
• [産業財産権] マナマコの放卵・放精誘起剤、およびそれを用いたナマコの生産方法 (2008)
  • 発明者名: 吉国通庸、大野薫、山野恵祐、淡路雅彦、松本才絵、藤原篤志
  • 産業財産権番号: 九州大学、自然科学研究機構、水産総合研究センター・特願,2008-216517号
  • 出願年月日: 2008-08-26