糖鎖に作用するグルコシダーゼの構造と機能の解明

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20570103
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 東京農工大学
• 研究代表者: 殿塚 隆史 東京農工大学, 大学院・農学研究院, 准教授 (50285194)
• 連携研究者: 西河 淳 東京農工大学, 大学院・農学研究院, 教授 (30218127)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: X線結晶解析 / 糖タンパク質糖鎖 / グルコシダーゼ

研究概要

本研究は、N結合型糖鎖に作用するグルコシダーゼおよび関連酵素の構造機能相関、および、N結合型糖鎖がタンパク質の構造に果たす役割の解明を目的とした。その結果、プロセシングα-グルコシダーゼIと相同性を有するタンパク質の立体構造を明らかにし、本酵素によるオリゴ糖の創出に成功した。また、糸状菌プロセシングα-グルコシダーゼIの発現系の構築を行い詳細な酵素化学的性質を明らかにした。関連酵素として細菌由来のエンド-α-1,2-マンノシダーゼと相同性を有するタンパク質の研究を行い、細菌の酵素として初めて酵素化学的性質を明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Heterologous expression, purification, and characterization of an a -mannosidase belonging to glycoside hydrolase family 99 from Shewanella amazonensis (2011)
  • 著者名/発表者名: Matsuda, K., Kurakata, Y., Miyazaki, T., Matsuo, I., Ito, Y., Nishikawa, A., Tonozuka, T.
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Blochem. 75 ページ: 797-799
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural similarity between a starch-hydrolyzing enzyme and an N-glycan-hydrolyzing enzyme : exohydrolases cleaving a-1, X-glucosidic linkages to produce a -glucose (2011)
  • 著者名/発表者名: Tonozuka, T., Miyazaki, T., Nishikawa A.
  • 雑誌名: Trends Glycosci.Glycotechnol 23 ページ: 93-102
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural insights into the substrate specificity and function of Escherichia coli K12 YgjK, a glucosidase belonging to the glycoside hydrolase family 63. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kurakata, Y., Uechi, A., Yoshida, H., Kamitori, S., Sakano, Y., Nishikawa, A., Tonozuka, T.
  • 雑誌名: JMol Biol. 381 ページ: 116-128
  • 査読あり
• [学会発表] Shewanella amazonenszs 由来 GH99 αMannosidase の発現系の構築と性質の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 松田佳奈、倉方悠馬、宮崎剛亜、松尾一郎、伊藤幸成、西河淳、殿塚隆史
  • 学会等名: 日本農芸化学会
  • 発表場所: 京都(京都女子大学)
  • 年月日: 2011-03-27
• [学会発表] Molecular cloning and heterologous production of Aspergillus Niger processing a -glucosidase I (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮崎剛亜, 松本雄治, 武田陽一, 松尾一郎, 伊藤幸成, 西河淳, 殿塚隆史
  • 学会等名: Plant Polysaccharide and Applied Glvcoscience Workshop2010
  • 発表場所: 東京(笹川記念会館)
  • 年月日: 20100729-20100731
• [学会発表] 機能未知酵素を用いた新規な糖の創出 (2010)
  • 著者名/発表者名: 殿塚隆史
  • 学会等名: アグリビジネス創出フェア
  • 発表場所: 千葉(幕張メッセ)
  • 年月日: 2010-11-26
• [学会発表] Structure and function of Escherichia coli YgjK, a glucosidase belonging to the glycoside hydrolase family 63, and a comparison with related enzymes (2009)
  • 著者名/発表者名: 倉方悠馬, 松本雄治, 伊藤幸成, 西河淳, 殿塚隆史
  • 学会等名: 8th Carbohydrate Bioengineering Meeting
  • 発表場所: Ischia, Naples, Italy
  • 年月日: 20090510-20090513
• [学会発表] イソプルラナーゼの活性中心近傍に存在する残基Tyr440の役割の解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮崎剛亜、矢代浩之、西河淳、殿塚隆史
  • 学会等名: 日本応用糖質科学会
  • 発表場所: 弘前(弘前大学文京町キャンパス)
  • 年月日: 2009-09-16
• [学会発表] Glycoside Hydrolase Family 63に属する二種類の酵素の機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 倉方悠馬、松本雄治、武田陽一、松尾一郎、伊藤幸成、西河淳、殿塚隆史
  • 学会等名: 日本農芸化学会
  • 発表場所: 福岡(マリンメッセ福岡)
  • 年月日: 2009-03-28
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.tuat.ac.jp/-seika/tonozuka/