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2009 年度 実績報告書

大腸菌染色体複製関連タンパク質における相互作用解析

研究課題

研究課題/領域番号 20570110
研究機関九州大学

研究代表者

阿部 義人  九州大学, 大学院・薬学研究院, 准教授 (60315091)

研究分担者 片山 勉  九州大学, 大学院・薬学研究院, 教授 (70264059)
キーワードDNA複製 / NMR / 蛋白質構造 / 蛋白質間相互作用 / 蛋白質複合体
研究概要

大腸菌染色体複製に関与する蛋白質の構造解析を行い、その構造をもとに相互作用を調べ、さらにはその相互作用が実際に生物機能に関与しているのかを以下検討した。
1) 細胞分裂機構再活性化因子CedAに関する機能解析
CedAのC末領域は構造比較から二本鎖DNAに結合する構造モチーフをもっており、今回初めて配列特異的なDNA配列を同定した。さらに一方構造を持たないN末領域はRNApolymeraseと結合することがわかっていたが、化学修飾法を用いてRNA polymeraseの結合部位を同定し、またN末領域が細胞分裂機構再活性化に深く関与することを明らかにし、CedAの細胞内機能を推定した。この結果は現在J. Mol. Biol.に投稿中である。
2) 大腸菌複製開始調節因子HSPQに関する機能解析
HSPQ変異体作成し、HSPQの機能に関与する部位を特定し、HSPQの細胞内機能の推定を行った。
3) 大腸菌複製再開始プライモソーム構成因子の機能解析
プライモソーム構成因子の構造解析を行いながら、相互作用の検討を行った。PriCに関しては、ドメインごとの発現系の構築、およびN末ドメインの構造決定およびC末ドメインの構造機能の解析を行った。またDnaTに関してもドメイン化に成功し、N末ドメイン、C末ドメインの機能解析及び構造決定を行った。

  • 研究成果

    (16件)

すべて 2010 2009

すべて 雑誌論文 (11件) (うち査読あり 10件) 学会発表 (5件)

  • [雑誌論文] Helical image reconstruction of the outward-open human erythrocyte band 3 membrane domain in tubular crystals2010

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi, et al.
    • 雑誌名

      Journal of structural biology 169

      ページ: 406-412

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Evaluation of the conformational equilibrium of reduced hen egglysozyme by antibodies to the native form2010

    • 著者名/発表者名
      Oda, et al.
    • 雑誌名

      Archives of biochemistry and biophysics 494

      ページ: 145-150

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effects of His mutations on the fibrillation of amyloidogenic Vλ6 protein Wil under acidic and physiological conditions2010

    • 著者名/発表者名
      Mishima, et al.
    • 雑誌名

      Biochemical and biophysical research communication 391

      ページ: 615-620

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structure of membrane domain of human erythrocyte anion exchanger 1 revealed by electron crystallography2010

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi, et al.
    • 雑誌名

      Journal of molecular biology 397

      ページ: 179-189

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mutation of His 834 in human anion exchanger 1 affects substrate binding2010

    • 著者名/発表者名
      Takazaki, et al.
    • 雑誌名

      BBA- biomembrane 1710

      ページ: 903-968

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Evidence for the binding of phosphate ion to the C-terminus region in Ass1-40 using heteronuclear NMR analyses2010

    • 著者名/発表者名
      Nagata-Uchiyama, et al.
    • 雑誌名

      Protein and peptide letters 17

      ページ: 172-175

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effect of protein concentration and pH on the chitinase activity of Tapes japonica lysozyme2010

    • 著者名/発表者名
      Goto, et al.
    • 雑誌名

      Protein and peptide letters 17

      ページ: 176-180

    • 査読あり
  • [雑誌論文] DiaA dynamics are coupled with changes in initial origin complexes leading to helicase loading2009

    • 著者名/発表者名
      Keyamura, et al
    • 雑誌名

      Journal of biological chemistry 284

      ページ: 25038-25050

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Residual Structures in the Acid-Unfolded States of Vlambda6 Proteins Affect Amyloid Fibrillation2009

    • 著者名/発表者名
      Mishima, et al
    • 雑誌名

      Journal of molecular biology 392

      ページ: 1033-1043

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Factor G Utilizes a Carbohydrate-Binding Cleft That Is Conserved between Horseshoe Crab and Bacteria for the Recognition of {beta}-1, 3-d-Glucans2009

    • 著者名/発表者名
      Ueda, et al.
    • 雑誌名

      Journal of immunology 183

      ページ: 3810-3818

    • 査読あり
  • [雑誌論文] アサリ貝リゾチームの構造と機能2009

    • 著者名/発表者名
      阿部義人, 他
    • 雑誌名

      生化学 81

      ページ: 314-319

  • [学会発表] 大腸菌DNA複製再開始因子PriCのドメイン化およびその構造と機能について2009

    • 著者名/発表者名
      荒牧峻彦, 他
    • 学会等名
      P&P合同公開シンポジウム「生命活動を制御する高次複合体の構造と機能」
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2009-12-23
  • [学会発表] 構造生物学アプローチによる大腸菌細胞分裂阻害再活性化因子CedAの機能解析2009

    • 著者名/発表者名
      阿部義人, 他
    • 学会等名
      P&P合同公開シンポジウム「生命活動を制御する高次複合体の構造と機能」
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2009-12-23
  • [学会発表] 大腸菌熱ショック蛋白質HSPQの機能解析2009

    • 著者名/発表者名
      中田光, 他
    • 学会等名
      蛋白質科学会
    • 発表場所
      熊本
    • 年月日
      2009-12-23
  • [学会発表] 大腸菌プライモソーム構成因子PriC N末ドメインのNMR構造解析2009

    • 著者名/発表者名
      荒牧峻彦, 他
    • 学会等名
      日本生化学会九州支部会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2009-05-16
  • [学会発表] DNA複製再開に関わるプライモソーム構成因子 DnaT のドメイン化及びNMRに よる構造解析2009

    • 著者名/発表者名
      谷純也, 他
    • 学会等名
      日本生化学会九州支部会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2009-05-16

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公開日: 2011-06-16   更新日: 2016-04-21  

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