| 研究概要 |
血管内皮細胞における内在性ガレクチン9の役割を検討する目的で、siRNAによるノックダウンを行った結果、無刺激状態におけるStat1のリン酸化が亢進するとともに、典型的なIFN応答遺伝子産物であるCXCL10/IP-10の産生が増加した。この効果は抗IFN-β抗体によりほぼ完全に抑制されること、また対照siRNAや他のガレクチン(ガレクチン1,3)に対するsiRNAはこのような効果を示さないことから、短鎖RNAによる非特異的な作用ではないと判断した。しかし、ガレクチン9のノックダウンに使用したsiRNA mixture(4種類のsiRNA[siG9-5,-6,-7,-8]の混合物)の各成分の効果を個別に検討した結果、siG9-6はStat1リン酸化の亢進とCXCL10産生を誘導したが、ガレクチン9に対するノックダウン効果を示さなかった。一方、SiG9-5,-7,-8はガレクチン9に対するノックダウン効果を示したが、Stat1リン酸化やCXCL10産生に影響を与えなかった。このデータは、これまでに得られた結果がsiG9-6のオフターゲット効果によるものであることを示している。このため、低濃度で十分なノックダウン効果が得られる新世代のsiRNA (Ambion社製)を用いて、データの取り直しを進めている。予備的な実験から、オフターゲット効果の現れない濃度において、ガレクチン9に対する十分なノックダウン効果を示すことが分かった。
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