高度好熱菌とそのファージのポストゲノム研究に有用な遺伝子組換え技術の開発

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20570156
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物物理学
• 研究機関: 東京薬科大学
• 研究代表者: 玉腰 雅忠 東京薬科大学, 生命科学部, 准教授 (10277254)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: 高度好熱菌 / ベクター / ファージ / 膜蛋白質 / 挿入配列

研究概要

高度好熱菌のインテグレーションベクター系を改良し、ヒスタグおよびFLAGタグを付加した膜タンパク質複合体を好熱菌で発現させた。その複合体はタグに対する抗体を用いて特異的に検出でき、効率よく調製できた。またファージベクターを開発するために温泉水より単離した好熱菌ファージの受容体遺伝子を同定した。さらに好熱菌の変異株ライブラリーの作製を目指して機能的な挿入配列を単離し、配列解析を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Crystal structures and enzymatic properties of a triamine/agmatine aminopropyltransferase from Thermus thermophilus. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohnuma M, Ganbe T, Terui Y, Niitsu M, Sato T, Tanaka N, Tamakoshi M, Samejima K, Kumasaka T, Oshima T.
  • 雑誌名: J.Mol.Biol. 408 ページ: 971-986
• [雑誌論文] Transcription profile of Thermus thermophilus CRISPR systems after phage infection. (2010)
  • 著者名/発表者名: Agari Y., Sakamoto K., Tamakoshi M., Oshima T., Kuramitsu S., Shinkai A.
  • 雑誌名: J.Mol.Biol. 395 ページ: 270-281
• [雑誌論文] ATP hydrolysis and synthesis of a rotary motor V-ATPase from Thermus thermophilus (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakano M., Imamura H., Toei M., Tamakoshi M., Yoshida M., Yokoyama K.
  • 雑誌名: J.Biol.Chem. 283 ページ: 20789-20796
• [雑誌論文]
  • 著者名/発表者名: Jormakka M., Yokoyama K., Yano T., Tamakoshi M., Akimoto S., Shimamura T., Curmi P., Iwata S.
  • 雑誌名: Nat.Struct.Mol.Biol. 15 ページ: 730-737
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilusに見出された機能的挿入配列ISTth8 (2010)
  • 著者名/発表者名: 玉腰雅忠、奥田桃子、山岸明彦
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会 第83回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸(ポスター発表)
  • 年月日: 20101200
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilusに感染するファージの解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 玉腰雅忠、杉澤幹起、山岸明彦
  • 学会等名: 第3回ファージ研究会 大阪大学蛋白質研究所セミナー 合同シンポジウム
  • 発表場所: 大阪(ポスター発表)
  • 年月日: 20100900
• [学会発表] Mobile genetic elements of Thermus thermophilus : a functional insertion sequence and novel phages (2010)
  • 著者名/発表者名: Masatada Tamakoshi, Momoko Okuda, Motoki Sugisawa, Akihiko Yamagishi
  • 学会等名: 高度好熱菌 丸ごと一匹 プロジェクト 第9回連携研究会
  • 発表場所: 理研播磨(口頭発表)
  • 年月日: 20100800
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilusの外膜蛋白質PilQの精製 (2010)
  • 著者名/発表者名: 玉腰雅忠、尾方美沙樹、鹿島絢子、山岸明彦
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 札幌(ポスター発表)
  • 年月日: 20100600
• [学会発表] Thermus thermophilus HB8株におけるCRISPRシステムの転写調節機構 (2009)
  • 著者名/発表者名: 上利佳弘、坂本恵子、玉腰雅忠、大島泰郎、倉光成紀、新海暁男
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜(ポスター発表)
  • 年月日: 20091200
• [学会発表] □YS40および□TMAの感染に必要な高度好熱菌Thermus thermophilusの線毛構造タンパク質遺伝子の同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 常泉賢司、玉腰雅忠、山岸明彦
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸(ポスター発表)
  • 年月日: 20091000
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilus HB27由来線毛外膜貫通チャネルタンパク質PilQの調製 (2009)
  • 著者名/発表者名: 尾方美沙樹、玉腰雅忠、山岸明彦
  • 学会等名: 第10回極限環境微生物学会年会
  • 発表場所: 東京(ポスター発表)
  • 年月日: 20091000
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilus HB27由来イソプロピルリンゴ酸イソメラーゼの発現調節と変異株の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 奥田桃子、玉腰雅忠、山岸明彦
  • 学会等名: 第10回 第10回極限環境微生物学会年会
  • 発表場所: 東京(ポスター発表)
  • 年月日: 20091000
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilusの線毛に関する研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 玉腰雅忠
  • 学会等名: 第8回 Thermus連携研究会
  • 発表場所: 理研播磨(口頭発表)
  • 年月日: 20090800
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilusにおけるFLAGタグシステムの利用に関する研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 玉腰雅忠、鹿島絢子、早川豪人、山岸明彦
  • 学会等名: 第9回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 熊本(ポスター発表)
  • 年月日: 20090500
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilusにおけるDeoxyhypusine synthase-like (Dsl)タンパクのポリアミン生合成経路への関与 (2009)
  • 著者名/発表者名: 竹田悠見子、太田敏博、玉腰雅忠、森屋利幸、大島泰郎
  • 学会等名: 日本ポリアミン研究会 第23回研究発表会
  • 発表場所: 大阪(口頭発表)
  • 年月日: 20090100
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilusのポリアミン代謝の謎 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大沼みお、竹田悠見子、太田敏博、玉腰雅忠、森屋利幸、大島泰郎
  • 学会等名: 日本ポリアミン研究会 第23回研究発表会
  • 発表場所: 大阪(口頭発表)
  • 年月日: 20090100
• [学会発表] 超好熱菌由来の多基質アミノトランスフェラーゼ (2008)
  • 著者名/発表者名: 金城健太、赤沼哲史、玉腰雅忠、田之倉優、山岸明彦
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸(ポスター発表)
  • 年月日: 20081200
• [学会発表] 高度好熱菌Thermus thermophilus HB8の線毛構造遺伝子の探索 (2008)
  • 著者名/発表者名: 常泉賢司、玉腰雅忠、山岸明彦
  • 学会等名: 第7回極限環境微生物学会年会
  • 発表場所: 東京(ポスター発表)
  • 年月日: 20081100
• [学会発表] Thermus thermophilus HB8およびHB27の線毛関連現象:DNAの取り込み、twitching、ファージ感染、バイオフィルム凝集 (2008)
  • 著者名/発表者名: 玉腰雅忠、常泉賢司、千葉直也、山岸明彦
  • 学会等名: 第7回 Thermus連携研究会
  • 発表場所: 理研播磨(口頭発表)
  • 年月日: 20080900
• [図書] Genetics of Thermophiles In Extremophiles Hndbook(edited by Horikoshi K., Antranikian G., Bull A.T., Robb F.T., Stetter K.O.) (2010)
  • 著者名/発表者名: Tamakoshi M., Oshima T.
  • 総ページ数: 547-566
  • 出版者: Springer
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.ls.toyaku.ac.jp/~lcb-7/tamakoshi/index.html