| 研究課題/領域番号 |
20580316
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| 研究機関 | 近畿大学 |
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研究代表者 |
三谷 匡 近畿大学, 先端技術総合研究所, 准教授 (10322265)
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| 研究分担者 |
佐伯 和弘 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (10298937)
松本 和也 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (20298938)
田口 善智 近畿大学, 生物理工学部, 講師 (70309269)
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| キーワード | ABCトランスポーター / Bcrp1 / 発現制御 / ES細胞 / リアルタイムPCR / 分化誘導 |
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| 研究概要 |
本研究では、ES細胞の未分化状態の維持におけるABCトランスポーターファミリー・Bcrp1による制御機構に関する分子基盤を明らかにすることを目的とする。本年度は以下の研究を行った。
(1)ES細胞におけるBcrp1 mRNAアイソフォームの発現解析
平成20年度において、未分化ES細胞ではBcrp1 mRNAアイソフォームAの発現が最も高く、またアイソフォームAの上流約1kbの転写活性は胎子線維芽細胞比べES細胞で著しく高いことを明らかにした。そこで、同アイソフォームA上流約1kbの発現制御領域についてさらに詳細な解析を行った。その結果、同アイソフォームの転写を大きく促進・抑制する領域を数カ所見出した。さらに、転写促進に関わると推測されるいくつかの転写因子結合モチーフに対し部位特異的突然変異導入により解析した結果、未分化ES細胞での同アイソフォームの発現に強く関わる転写因子を同定した。
(2)ES細胞の分化過程におけるBcrp1過剰発現の影響
Bcrp1過剰発現ES細胞を作製し、平成20年に引き続き体外分化誘導過程における分化関連遺伝手およびBcrp1の発現の変動について解析した。その結果、外来Bcrp1の過剰発現により、内在性のBcrp1の発現自身も亢進されることが示された。さらにOct3/4の発現が亢進され、その結果、内胚葉細胞系譜で特徴的なAFPの発現が誘導されるとともに形態的にもES細胞が内胚葉系の細胞へと分化する可能性が示された。
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