| 研究概要 |
これまで、我々は、種々の細胞において、三量体G蛋白質によるRhoファミリーG蛋白質の活性化機構の存在を示してきた。この機構解明には三量体G蛋白質シグナルによるRhoファミリーG蛋白質に特異的なGTP-GDP交換反応促進因子(RhoGEF)の活性化機構の解明が重要であると考え、本研究ではかずさDNA研究所のデータベースにあるRhoGEFの遺伝子クローン中、三量体G蛋白質βγサブユニットにより活性化されるRhoGEF分子中、特にFLJ00018の細胞内機能を明らかにすることを目的としている。昨年度までに、FLJ00018の持つPHドメインを介する活性調節機構に着目し、FLJ00018の膜との相互作用に関わるとされるPHドメインが、PIP(4,5)2などのある種のリン脂質と結合することを見出し、リン脂質代謝関連酵素のひとつであるホスホリパーゼD2(PLD2)あるいはPLD2により産生されるホスファチジン酸により、FLJ00018の機能が抑制されることや増殖因子刺激によるリン酸化をされることなどを明らかにしてきた。本年度はさらに、これらのことをふまえ、yeast two hybrid法を用い、FLJ00018と相互作用する生体分子を同定することを進めた。その結果、いくつかの分子が相互作用する可能性が示唆された。今後、これらの分子とFLJ00018の相互作用が、生理機能にどうかかわるのかを検討する予定でいる。また、昨年に引き続き、FLJ00018のリン酸化部位の同定を進め、それらに関わる変異体等を作成し、リン酸化の生理的意味を現在検討中である。
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