グルタチオン抱合型胆汁酸の生成と代謝機構に関する研究

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20590164
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 医療系薬学
• 研究機関: 近畿大学
• 研究代表者: 三田村 邦子 近畿大学, 薬学部, 准教授 (70242526)
• 研究分担者: 池川 繁男 近畿大学, 薬学部, 教授 (90111301)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: 胆汁酸 / グルタチオン / N-アセチルシステイン / エレクトロスプレーイオン化 / 質量分析法 / 胆汁 / プロドラッグ / 硫酸抱合

研究概要

胆汁酸の代謝活性中間体を経るグルタチオン(GSH)抱合体の生成と代謝機構の解明を目的として、胆汁酸がin vitro、in vivoでGSH並びにN-アセチルシステイン(NAC)との抱合を受けることを明らかにするとともに、ラット及びヒト胆汁中にGSH抱合型胆汁酸が排出されていることを実証し、胆汁酸の新規代謝経路として提示した。また、NAC抱合型ウルソデオキシコール酸が肝機能改善薬のプロドラッグとなる可能性を示す基礎的知見を得た。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of bile acid S-acyl glutathione conjugates in rat bile by liquid chromatography/electro- spray ionization-linear ion trap mass spectrometry (2011)
  • 著者名/発表者名: Mitamura K, Hori N, Iida T, Hofmann AF, Ikegawa S
  • 雑誌名: Steroids 76 ページ: 68-77
  • 査読あり
• [雑誌論文] Simultaneous determination of tetrahydrocortico-steroid glucuronide by liquid chromato-graphy/electrospray ionization-mass spectrometry (2010)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子,池川繁男
  • 雑誌名: Korean J.Lab.Med. 30(Suppl.2) ページ: S270
• [雑誌論文] Salivary cheno-deoxycholic acid and its glycine-conjugate : Their determination method using LC-MS/MS and variation of their concentrations with increased saliva flow rate (2010)
  • 著者名/発表者名: Higashi T, Shibayama Y. Ichikawa T, Ito K, Toyo'oka T, Shimada K: Mitamura K, Ikegawa S, Chiba H
  • 雑誌名: Steroids 75 ページ: 338-345
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potential corticoid metabolites : chemical synthesis of 3-and 21-mono-and 3,21-disulfate conjugates of tetrahydrocorticosteroids in the 5α- and 5β series (2010)
  • 著者名/発表者名: Okihara R, Mitamura K, Hasegawa M, Mori M, Muto A, Kakiyama G, Iida T, Shimada M, Mano N, Ikegawa S
  • 雑誌名: Chem.Pharm.Bull. 58 ページ: 344-353
  • 査読あり
• [雑誌論文] Simultaneous determination of twelve tetrahydrocorticosteroid glucuronide in human urine by liquid chromatography/ electrospray ionization iinear ion trap mass spectrometry (2009)
  • 著者名/発表者名: Ikegawa S, Hasegawa M, Okihara R, Shimizu C, Chiba H, Iida T, Mitamura K
  • 雑誌名: Anal.Chem. 81 ページ: 10124-10135
  • 査読あり
• [雑誌論文] 胆汁酸のグルタチオン抱合体とLC/MS (2009)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子,堺俊博,池川繁男,若宮建昭
  • 雑誌名: JUSCO Report 51 ページ: 7-13
• [雑誌論文] LC/ESI-MSによる内分泌・代謝疾患の科学診断へのアプローチ (2009)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子,長谷川真紀,沖原梨香,池川繁男
  • 雑誌名: 臨床化学 38 ページ: 291-298
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chemical synthesis of N- acetylcysteine conjugates of bile acids and in vivo formation in cholestatic rats as shown by liquid chromatography/ electrospray ionization -linear ion trap mass spectrometry (2009)
  • 著者名/発表者名: Mitamura K, Watanabe S, Sakai T, Okihara R, Sogabe M, Wakamiya T, Hofmann AF, Ikegawa S
  • 雑誌名: J.Chromatogr.B. 877 ページ: 2630-2638
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chemical Synthesis of bile acid acyl-adenylates and formation by rat liver microsomal fraction (2009)
  • 著者名/発表者名: Ikegawa S, Ito H, Ohshima M, Maeda M, Hofmann AF, Mitamura K
  • 雑誌名: Steroids 74 ページ: 751-757
  • 査読あり
• [雑誌論文] Formation and biliary excretion of glutathione conjugates of bile acids in the rat as shown by liquid chromatog-raphy/electrospray ionization-linear ion trap mass spectrometry (2009)
  • 著者名/発表者名: Mitamura K, Watanabe S, Mitsumoto Y, Sakai T, Sogabe M, Wakamiya T, Ikegawa S
  • 雑誌名: Anal.Biochem. 384 ページ: 224-230
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hofmann AF, Iida T : A facile Synthesis of C-24 and C-25 oxysterols by in situ generated ethyl(trifluoromethyl)dioxirane (2009)
  • 著者名/発表者名: Ogawa S, Kakiyama G, Muto A, Hosoda A, Mitamura K, Ikegawa S
  • 雑誌名: Steroids 74 ページ: 81-87
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production and characterization of monoclonal antibody for capture of proteins tagged with lithocholic acid (2008)
  • 著者名/発表者名: Ikegawa S, Yamamoto T, Miyashita T, Okihara R, Ishiwata S, Sakai T, Chong R-H., Maeda M, Hofmann AF, Mitamura K
  • 雑誌名: Anal.Sci. 24 ページ: 1475-1480
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunoprecipitation and MALDI-MS identification of lithocholic acid- tagged proteins in liver of bile duct-ligated rats (2008)
  • 著者名/発表者名: Ikegawa S, Yamamoto T, Ito H, Ishiwata S, Sakai T, Mitamura K, Maeda M
  • 雑誌名: J.Lipid Res. 49 ページ: 2463-2473
  • 査読あり
• [雑誌論文] コレステロール硫酸転位酵素とコレステロール代謝 (2008)
  • 著者名/発表者名: 布田博敏,三田村邦子,池川繁男
  • 雑誌名: 臨床化学 37 ページ: 148-160
  • 査読あり
• [学会発表] LC/ESI-MS/MSによるヒト胆汁中グルタチオン抱合型胆汁酸の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 日本薬学会第131年会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 20110329-20110330
• [学会発表] グルタチオン抱合型胆汁酸3-サルフェートの合成とラット肝サイトゾール画分における生成 (2011)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 日本薬学会第131年会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 20110329-20110330
• [学会発表] LC/ESI-MS/MSによるヒト胆汁中グルタチオン抱合型胆汁酸の同定 (2011)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第21回日本臨床化学会近畿支部総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2011-02-05
• [学会発表] Analysis of glutathione conjugates of bile acids in rat bile by LC/ESI-MS/MS. XXI International Bile Acid Meeting. (2010)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: Bile Acid as Metabolic Integrators and Therapeutics
  • 発表場所: Freiburg, Germany
  • 年月日: 20101007-20101008
• [学会発表] Chemical synthesis of the (25R)- and (25S)-epimers of 3α,7α,12α-trihydroxy-5α-cholestan-27-oic acid and their glycine and taurine conjugates. XXI International Bile Acid Meeting. (2010)
  • 著者名/発表者名: Iida T
  • 学会等名: Bile Acid as Metabolic Integrators and Therapeutics
  • 発表場所: Freiburg, Germany
  • 年月日: 20101007-20101008
• [学会発表] Simultaneous determination of tetrahydrocorticosteroid glucuronides by liquid chromatography/electrospray ioniza-tion-mass spectrometry. (2010)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: The 12th Asian-Pacific Congress of Clinical Biochemistry(シンポジウム)
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 20101003-20101007
• [学会発表] ヒト血中硫酸抱合型オキシステロールの同位体希釈LC/ESI-MSによる直接一斉分析法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 坂野理絵
  • 学会等名: 第50回日本臨床化学会年次学術集会
  • 発表場所: 甲府
  • 年月日: 20100923-20100925
• [学会発表] イオンクラスター法による胆汁酸代謝活性中間体のチオール基並びにアミノ基との反応性の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第35回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 20100909-20100910
• [学会発表] 内分泌・代謝疾患のLC/MSによるメタボロミクスに用いる多重重水素標識A/B-シス-テトラヒドロコルチコステロイド・サルフェートの合成 (2010)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 第23回バイオメディカル分析科学シンポジウム
  • 発表場所: 松島
  • 年月日: 20100721-20100723
• [学会発表] Quantitative metabolic profiling of twelve tetrahyrocorticosteroid glucur- onides in urine by isotope dilution LC-ESI- linear ion trap MS/MS. (2010)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 58th ASMS Conference on Mass Spectrometry
  • 発表場所: Salt Lake City, USA
  • 年月日: 20100523-20100527
• [学会発表] Identification of novel metabolites of bile acids : S-acyl glutathione conjugates in rat bile by LC/ESI-linear ion trap MS/MS. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hori N
  • 学会等名: 58th ASMS Conference on Mass Spectrometry
  • 発表場所: Salt Lake City, USA
  • 年月日: 20100523-20100527
• [学会発表] ラット胆汁中グルタチオン抱合型胆汁酸の合成とLC/MSによる同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 堀直宏
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 20100328-20100330
• [学会発表] LC/ESI-MS/MSによるラット胆汁中重水素標識N-アセチルシステイン抱合型胆汁酸の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 堺俊博
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 20100328-20100330
• [学会発表] LC/ESI-MS/MSによるヒト尿中テトラヒドロ-並びにヘキサヒドロコルチコステロイド・グルクロニド直接一斉分析法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 20100328-20100330
• [学会発表] LC/ESI-MS/MSによるN-アセチルシステイン抱合型ウルソデオキシコール酸の体内動態に関する基礎的検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 20100328-20100330
• [学会発表] グルタチオン抱合型胆汁酸のラット肝サイトゾール画分における硫酸抱合の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 第32回胆汁酸研究会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2010-11-09
• [学会発表] 胆汁酸のグルタチオン抱合体と胆汁排泄 (2010)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 第27回日本胆膵病態・生理研究会
  • 発表場所: 弘前
  • 年月日: 2010-06-26
• [学会発表] Mass Spectrometric Techniques Applied to the Study of Conjugated Bile Acids, Steroids, and Oxysterols. (2010)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: Research Seminar at Virginia Commonwealth Uni- versity, Medical College of Virginia Campus
  • 発表場所: Richmond, USA(招待講演)
  • 年月日: 2010-05-27
• [学会発表] 重水素標識N-アセチルシステインによる胆汁酸代謝活性中間体のトラッピング (2010)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 第19回日本小児胆汁酸研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-02-20
• [学会発表] 肝・胆・消化機能改善作用を指向したプロドラッグ開発の基礎的検討:重水素標識N-アセチルシステイン抱合型ウルソデオキシコール酸の体内動態の追跡 (2010)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第19回日本小児胆汁酸研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-02-20
• [学会発表] Identification of glutathione conjugates of bile acids in rat bile by LC/ESI-MS2. (2009)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第24回年会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20091127-20091129
• [学会発表] LC/ESI-MS/MSによるN-アセチルシステイン抱合型胆汁酸3-サルフェートのトレースアナリシス (2009)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 日本分析化学会第58年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20090924-20090926
• [学会発表] 同位体希釈LC/ESI-MS/MSによる尿中テトラヒドロコルチコステロイド・サルフェート定量法の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第49回日本臨床化学会年会
  • 発表場所: 長崎
  • 年月日: 20090918-20090920
• [学会発表] 唾液中胆汁酸:LC-ESI-MS/MS定量法と唾液分泌量亢進に伴う濃度変動 (2009)
  • 著者名/発表者名: 東達也
  • 学会等名: 第34回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20090910-20090911
• [学会発表] LC/ESI-MS/MSによるN-アセチルシステイン抱合型胆汁酸のラット肝サイトゾール画分における硫酸抱合の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堺俊博
  • 学会等名: 第34回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20090910-20090911
• [学会発表] ラット胆汁中グルタチオン抱合型胆汁酸の同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀直宏
  • 学会等名: 第34回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20090910-20090911
• [学会発表] 胆汁酸のグルタチオン抱合と胆汁排泄 (2009)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 第22回バイオメディカル分析科学シンポジウム
  • 発表場所: 岐阜
  • 年月日: 20090715-20090717
• [学会発表] LC/MSによる臨床化学へのアプローチ (2009)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 京都(シンポジウム)
  • 年月日: 20090326-20090328
• [学会発表] LC/MSによる硫酸抱合型オキシステロールの高感度定量法の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20090326-20090328
• [学会発表] A/B-trans構造を有するテトラヒドロコルチコステロイド・サルフェートの合成とESI-MSにおける挙動 (2009)
  • 著者名/発表者名: 沖原梨香
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 20090326-20090328
• [学会発表] LC/ESI-MS/MSによるラット胆汁中グルタチオン抱合型胆汁酸の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堺俊博
  • 学会等名: フィジカル・ファーマフォーラム2009
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20090324-20090325
• [学会発表] 肝・胆・消化機能改善薬として期待されるN-アセチルシステイン抱合型ウルソデオキシコール酸の体内動態に関する基礎的研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 第20回日本臨床化学会近畿支部総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-12-26
• [学会発表] 質量分析(LC/MS)と臨床化学 (2009)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 第27回日本臨床化学会関東支部例会
  • 発表場所: 東京(依頼講演)
  • 年月日: 2009-12-05
• [学会発表] ラット胆汁中グルタチオン抱合体の合成とこれらのLC/MSによる同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堀直宏
  • 学会等名: 第31回胆汁酸研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-11-07
• [学会発表] 多重重水素標識テトラヒドロコルチコステロイド・サルフェートの合成とESI-MSnにおける挙動 (2009)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第59回日本薬学会近畿支部大会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-10-24
• [学会発表] LC/MSによる硫酸抱合型オキシステロール直接一斉分析法の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 坂野理絵
  • 学会等名: 第59回日本薬学会近畿支部大会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-10-24
• [学会発表] LC/ESI-MS/MSによるラット並びにヒト胆汁中グルタチオン抱合型胆汁酸の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第19回西日本臨床胆汁酸研究会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-07-25
• [学会発表] ラット胆汁中アミノ酸並びにグルタチオン抱合型胆汁酸の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 堺俊博
  • 学会等名: 第18回日本小児胆汁酸研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-02-21
• [学会発表] テトラヒドロコルチコステロイドのグルクロン酸抱合に関する基礎的検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第19回日本臨床化学会近畿支部総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-01-24
• [学会発表] A new insight in the formation of N-acetylcysteine conjugates of bile acids. (2008)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: 日本薬物動態学会第23回年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 20081030-20081101
• [学会発表] LC/MSによる胆汁酸のグルタチオン抱合に関する研究 (2008)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第33回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 東京(奨励賞受賞講演)
  • 年月日: 20080925-20080926
• [学会発表] N-アセチルシステイン抱合型胆汁酸3-サルフェートの負イオン検出エレクトロスプレーイオン化-タンデムマススペクトロメトリーにおける挙動 (2008)
  • 著者名/発表者名: 堺俊博
  • 学会等名: 第33回日本医用マススペクトル学会年会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20080925-20080926
• [学会発表] 液体クロマトグラフィー/質量分析法による内分泌代謝疾患の科学的診断へのアプローチ (2008)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第48回日本臨床化学会年次学術集会
  • 発表場所: 浜松(学術賞受賞講演)
  • 年月日: 20080829-20080831
• [学会発表] LC/ESI-MSnによる尿中硫酸抱合型テトラヒドロコルチコステロイドの直接一斉分析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 沖原梨香
  • 学会等名: 第48回日本臨床化学会年次学術集会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 20080829-20080831
• [学会発表] LC/MSによる胆汁酸の体内動態解析に基づくプロドラッグの開発 (2008)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第21回バイオメディカル分析科学シンポジウム
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20080806-20080808
• [学会発表] Mechanistic studies on the formation of acyl glutathione conjugate of bile acid in rat liver and its biliary excretion. (2008)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: Falk Symposium 165. XX International Bile Acid Meeting, Bile Acid Biology and Therapeutic Actions
  • 発表場所: Amsterdam, The Netherlands
  • 年月日: 20080613-20080614
• [学会発表] Analysis of lithocholic acid-tagged proteins in the rat liver by using immnoaffinity capture and MALDI-TOF. (2008)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男
  • 学会等名: Falk Symposium 165. XX International Bile Acid Meeting, Bile Acid Biology and Therapeutic Actions
  • 発表場所: Amsterdam, The Netherlands
  • 年月日: 20080613-20080614
• [学会発表] 胆汁酸のN-アセチルシステイン抱合に関する基礎的研究 (2008)
  • 著者名/発表者名: 三田村邦子
  • 学会等名: 第30回胆汁酸研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2008-10-18
• [学会発表] In situ発生ジオキシランを用いるコレスタン側鎖C-25位の直接水酸化とオキシステロール類の単段階合成 (2008)
  • 著者名/発表者名: 柿山玄太
  • 学会等名: 第30回胆汁酸研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2008-10-18
• [図書] 薬学生のための臨床化学 (2010)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男,三田村邦子
  • 総ページ数: 41-46
  • 出版者: 南江堂
• [図書] 薬学分析科学の最前線 (2009)
  • 著者名/発表者名: 池川繁男,三田村邦子, じほう
  • 総ページ数: 130-131