| 研究課題/領域番号 |
20590238
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| 研究機関 | 日本医科大学 |
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研究代表者 |
折笠 千登世 日本医科大学, 医学部, 講師 (20270671)
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| 研究分担者 |
佐久間 康夫 日本医科大学, 大学院・医学研究科, 教授 (70094307)
濱田 知宏 日本医科大学, 医学部, 助教 (90312058)
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| キーワード | 脳 / 性差形成 / ステロイド / エストロゲン / SDN-POA / BrdU / カルビンジン |
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| 研究概要 |
視索前野脳室周囲核(SDN-POA)で性差が引き起こされる原因の一つとして、生後のステロイド影響下において、神経細胞新生が行われていると推察した。そこで、細胞新生時期を同定するため、分裂細胞に取り込まれることがわかっているBromodeoxyuridine(BrdU)を胎生期14日、16日、18日目の母ラットにBrdUを投与し、この時期におこる細胞新生がSDN-POAでの性差形成に寄与するか否かについて検討した。生後14日令の雌雄ラットのSDN-POAマーカーとしてカルビンジンに対する抗体を用い性的二型核の特定を行い、BrdU陽性神経細胞との二重染色を試みた。胎生期14日、16日、18日に誕生した細胞は、全てにおいてSDN-POAの性差形成に寄与していないことが判明した。そこで、出生後から5日間連続投与し、BrdU陽性細胞とカルビンジンとの共染色を試み、生後にSDN-POAの細胞新生を検討した。共焦点レーザー顕微鏡を用いて解析を行い、生後の細胞新生がSDN-POAの周囲の細胞に現れることが明らかになった。さらに生後のステロイドによる細胞新生を詳細に検討するため、分裂細胞に取り込まれるEGFPレトロウイルスを側脳室に投与しその後生後2週間後に観察した結果、投与した脳室の周囲には新生細胞を検出できた。今後EGFPレトロウイルス第3脳室周囲に投与しSDN-POAの細胞新生有無をさらに詳細に検討する。
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