| 研究概要 |
膵癌(大部分は浸潤性膵管癌)ならびに胆道癌(特に胆管癌・胆嚢癌)は、難治性癌の代表とされている。これらの病態には、癌細胞増殖および血管新生の特性が関与する。生物時計が制御する概日リズムの下で、癌の細胞増殖や腫瘍血管の新生が行われるとの作業仮説に基づき、これを個体レベルで証明することで高悪性度の病態を解明する。本年度の実績は、以下の通りである。
1.癌細胞の時計遺伝子と血管新生遺伝子との関連解析
免疫沈降法を用いて以下の実験を行う。癌細胞株に、DEC1ないしDEC2発現プラスミドを導入してから、HIF-1αおよびARNT1の抗体で免疫沈降し、VEGF遺伝子プロモーター上のHREに結合するHIF-1αおよびARNT1タンパク質とDECタンパク質との相互作用を解析し、VEGF発現活性の検討を行った。
2.抗腫瘍性サイトカインが時計遺伝子発現・癌細胞増殖に及ぼす影響
癌細胞株に、抗腫瘍性サイトカイン(TNF-α,IFN-α,β,γなど)を導入してから、血清刺激を行い、概日リズム下における癌細胞の時計遺伝子の位相の変化を解析する。さらに概日リズム下での抗腫瘍性サイトカイン投与効果による、癌細胞の増殖能・浸潤能をMTT assay, matrigel invasion assayを用いて検討した。
今後、細胞レベルから個体レベルでの研究展開を図るための準備を行った。
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