胃粘膜幹細胞におけるCdx2の機能解析

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20590341
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 人体病理学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 横崎 宏 神戸大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10200891)
• 研究分担者: 仙波 秀峰 神戸大学, 大学院・医学研究科, 准教授 (00302092)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: 病理学 / 胃癌 / 幹細胞 / Cdx2 / 分化 / 増殖 / 腸上皮化生 / 異時多発胃癌

研究概要

がん幹細胞の観点からCdx2の機能解析を試み、最終的には病理組織学的診断に有効な形態学的特徴と関連づけることを目標として、以下の研究を行った。まず、Cdx2発現とPTEN活性化の関連を見るため、胃癌細胞株TMK-1細胞に野生型及び不活型PTEN発現ベクターを導入したところ、野生型PTEN導入細胞のみにCdx2と腸型クローディン(Claudin-3、Claudin-4)の速やかな発現誘導が見られた。クロマチン免疫沈降法により、Cdx2は腸型クローディン遺伝子プロモーター領域に直接結合することが確認された。胃癌症例の免疫組織化学的検索より、核内PTENとリン酸化型Akt発現レベルは逆相関し、核内PTEN陰性例は予後不良で、腸型分化傾向も低かった。以上より、胃癌細胞の分化を司るCdx2の機能発揮にはPTENのフォスファターゼ活性が必要であることが判明した。次に、Cdx2陰性CD133陽性SW480細胞にCdx2を強制発現することにより、増殖抑制、形態学的変化、造腫瘍能抑制が認められ、CD133陽性並びに陰性細胞の発現遺伝子の比較より、CD133陽性細胞ではTGF-βレセプター発現が高く、これはCdx2発現細胞では低下する傾向が確認され、がん幹細胞性維持にTGF-β高感受性が必要とみなされた。3次元培養においてTGF-β存在下で腺管構造の延長や分岐抑制が観察され、TGF-βはtumor sphere表面でのSnail発現を亢進させ、これはSW480細胞の腫瘍形成能を増加させることがSnail発現ベクター導入実験より明らかとなった。腫瘍表面でのTGF-β誘導性Snail発現は大腸癌腫瘍先進部でのtumor budding像と関連し、そのがん幹細胞性再獲得との密接な関連性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] 多発胃癌の病理学的特徴-分子病理学的立場から (2011)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏、仙波秀峰
  • 雑誌名: 胃と腸 46巻 ページ: 23-29
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of PTEN expression by the SWI/SNF chromatin-remodelling protein BRG1 in human colorectal carcinoma cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Watanabe T, Semba S, Yokozaki H
  • 雑誌名: Br.J.Cancer 104巻 ページ: 146-154
  • 査読あり
• [雑誌論文] Negativre gulation of the tight junction protein tricellulin by snail-induced epithelial- mesenchymal transition in gastric carcinoma cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Masuda R, Semba S, Mizuuchi E, Yanagihara K, Yokozaki H
  • 雑誌名: Pathobiology 77巻 ページ: 106-113
  • 査読あり
• [雑誌論文] Constitutive suppression of PRL-3 inhibits invasion and proliferation of gastric cancer cell in vitro and in vivo. (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsukawa Y, Semba S, Kato H, Koma Y, Yanagihara K, Yokozaki H
  • 雑誌名: Pathobiology 77巻 ページ: 155-162
  • 査読あり
• [雑誌論文] Loss of WW domain-containing oxidoreductase expression in the progression and development of gastric carcinoma : clinical and histopathologic correlations. (2010)
  • 著者名/発表者名: Maeda N, Semba S, Nakayama S, Yanagihara K, Yokozaki H
  • 雑誌名: Virchows Arch. 457巻 ページ: 423-432
  • 査読あり
• [雑誌論文] Requirement of phosphatase of regenerating liver-3 for the nucleolar localization of nucleolin during the progression of colorectal carcinoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Sembe S, Mizuuchi E, Yokozaki H
  • 雑誌名: Cancer Sci. 101巻 ページ: 2254-2261
  • 査読あり
• [雑誌論文] Down-modulation of keratin 8 phosphorylation levels by PRL-3 contributes to colorectal carcinoma progression. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mizuuchi E, Semba S, Kodama Y, Yokozaki H
  • 雑誌名: Int.J.Cancer 124巻 ページ: 1802-1810
  • 査読あり
• [雑誌論文] Alternative lengthening of telomeres frequently occurs in mismatch repair system-deficient gastric carcinoma. (2009)
  • 著者名/発表者名: Omori Y, Nakayama F, Li D, Kanemitsu K, Semba S, Ito A, Yokozaki H
  • 雑誌名: Cancer Sci. 100巻 ページ: 413-418
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hypermethylation-mediated reduction of WWOX expression in intraductal papillary mucinous neoplasms of the pancreas. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakayama S, Semba S, Maeda N, Matsushita M, Kuroda Y, Yokozaki H
  • 雑誌名: Br.J.Cancer 100巻 ページ: 1438-1443
  • 査読あり
• [雑誌論文] Superficially elevated-type serrated hyperplastic lesion of the stomach with minute adenocarcinoma. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hasuo T, Semba S, Satake S, Shirasaka D, Aoyama N, Yokozaki H
  • 雑誌名: Dig.Endosc. 21巻 ページ: 101-105
  • 査読あり
• [雑誌論文] Direct cancer-stromal interaction increafibroblast proliferation and enhances invasive properties of scirrhous-type gastric carcinoma cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Semba S, Kodama Y, Ohnuma K, Mizuuchi E, Masuda R, Yashiro M, Hirakawa K, Yokozaki H
  • 雑誌名: Br.J.Cancer 101巻 ページ: 1365-1373
• [雑誌論文] Role of the WWOX gene, encompassing fragile region FRA16D, in suppression of pancreatic carcinoma cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakayama S, Semba S, Maeda N, Aqeilan RI, Huebner K, Yokozaki H
  • 雑誌名: Cancer Sci. 99巻 ページ: 1370-1376
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of cell adhesion molecule 1 in malignant pleural mesothelioma as a cause of efficient adhesion and growth on mesothelium. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ito A, Hagiyama M, Mimura T, Matsumoto M, Wakayama T, Iseki S, Yokozaki H, Okada M
  • 雑誌名: Lab.Invest. 88巻 ページ: 504-514
• [雑誌論文] Tight junction proteins claudin-2 and -12 are critical for vitamin D-dependent Ca^<2+> absorption between enterocytes. (2008)
  • 著者名/発表者名: Fujita H, Sugimoto K, Inatomi S, Maeda T, Osanai M, Uchiyama Y, Yamamoto Y, Wada T, Kojima T, Yokozaki H, Yamashita T, Kato S, Sawada N, Chiba H
  • 雑誌名: Mol.Biol.Cell 19巻 ページ: 1912-1921
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cell adhesion molecule 1 is a novel pancreatic-islet cell adhesion molecule that mediates nerve-islet cell interactions. (2008)
  • 著者名/発表者名: Koma Y, Furuno T, Hagiyama M, Hamaguchi K, Nakanishi M, Masuda M, Hirota S, Yokozaki H, Ito A
  • 雑誌名: Gastroenterology 134巻 ページ: 1544-1554
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prognostic significance of intestinal claudins in high-risk synchronous and metachronous multiple gastric epithelial neoplasias after initial endoscopic submucosal dissection. (2008)
  • 著者名/発表者名: Semba S, Hasuo T, Satake S, Nakayama F, Yokozaki H
  • 雑誌名: Pathol.Int. 58巻 ページ: 371-377
• [雑誌論文] Snail-associated epithelial-mesenchymal transition promotes oesophageal squamous cell carcinoma motility and progression. (2008)
  • 著者名/発表者名: Usami Y, Satake S, Nakayama F, Matsumoto M, Ohnuma K, Komori T, Semba S, Ito A, Yokozaki H
  • 雑誌名: J.Pathol. 215巻 ページ: 330-339
• [雑誌論文] Hypermethylation-modulated downregulation of claudin-7 expression promotes the progression of colorectal carcinoma. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakayama F, Semba S, Usami Y, Chiba H, Sawada N, Yokozaki H
  • 雑誌名: Pathobiology 75巻 ページ: 177-185
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphatase activity of nuclear PTEN is required for CDX2-mediated intestinal differentiation of gastric carcinoma.
  • 著者名/発表者名: Semba S, Satake S, Matsushita M, Yokozaki H
  • 雑誌名: Cancer Lett. 274巻 ページ: 143-150
  • 査読あり
• [学会発表] 骨髄由来間葉系幹細胞との直接的接触による胃癌細胞の幹細胞性再獲得機構 (2010)
  • 著者名/発表者名: 仙波秀峰, 横崎宏, 他
  • 学会等名: 第21回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 長野県
  • 年月日: 2010-11-18
• [学会発表] CD133 positive tumor cell ratio is a marker for the prediction of sensitivity to preoperative chemotherapy in distal rectal cancer (2010)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏, 仙波秀峰, et al.
  • 学会等名: 20th International Symposiium of Hiroshima Cancer Seminar
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2010-10-31
• [学会発表] The effect of Cdx2 transfection on colon cancer stem cell (2010)
  • 著者名/発表者名: Yusra, 仙波秀峰, 横崎宏, 他
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪市
  • 年月日: 2010-09-24
• [学会発表] 胃癌の増殖、転移における骨髄由来間葉系幹細胞の役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 西村加奈子, 仙波秀峰, 横崎宏
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪市
  • 年月日: 2010-09-23
• [学会発表] 遠位直腸癌術前放射線化学療法効果予測における治療前生検組織内CD133陽性癌細胞比率測定の有用性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏, 仙波秀峰, 他
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪市
  • 年月日: 2010-09-23
• [学会発表] 遠位直腸がん術前放射線化学療法効果予測における治療前生検組織内CD133陽性癌細胞比率測定の有用性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏, 仙波秀峰, 他
  • 学会等名: 第30回日本分子腫瘍マーカー研究会
  • 発表場所: 大阪市
  • 年月日: 2010-09-21
• [学会発表] 大腸癌細胞株におけるCD133発現細胞と放射線感受性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宇佐美悠, 仙波秀峰, 横崎宏, 他
  • 学会等名: 第99回日本病理学会総会
  • 発表場所: 東京都
  • 年月日: 2010-04-28
• [学会発表] 低酸素環境下における癌細胞の悪性度獲得機構の解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 橋本興人, 仙波秀峰, 横崎宏, 他
  • 学会等名: 第99回日本病理学会総会
  • 発表場所: 東京都
  • 年月日: 2010-04-27
• [学会発表] スキルス胃癌の組織形成と進展における胃癌細胞と間質細胞の相互作用因子の同定及び解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 増田理沙代, 仙波秀峰, 横崎宏, 他
  • 学会等名: 第99回日本病理学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-04-27
• [学会発表] 胃癌の増殖、転移における骨髄由来間葉系幹細胞の役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 仙波秀峰, 横崎宏, 他
  • 学会等名: 第99回日本病理学会総会
  • 発表場所: 東京都
  • 年月日: 2010-04-27
• [学会発表] 遠位直腸癌における術前放射線化学療法効果予測に関する解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏, 仙波秀峰, 他
  • 学会等名: 第99回日本病理学会総会
  • 発表場所: 東京都
  • 年月日: 2010-04-27
• [学会発表] 胃癌の増殖、転移における骨髄由来間葉系幹細胞の役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 西村加奈子、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第20回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2009-11-27
• [学会発表] スキルス胃癌の組織形成と進展における胃癌細胞と間質細胞の相互作用因子の同定及び解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 増田理沙代、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第20回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2009-11-27
• [学会発表] 低酸素環境下における癌細胞の悪性度獲得機構の解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 橋本興人、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第20回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2009-11-27
• [学会発表] 胃癌の細胞不死化制御機構におけるDNAミスマッチ修復系不活化の関与 (2009)
  • 著者名/発表者名: 仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第20回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2009-11-27
• [学会発表] Snailによる上皮間葉系形質転換は食道扁平上皮癌の運動と悪性度に関与する (2009)
  • 著者名/発表者名: 宇佐美悠、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第20回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2009-11-27
• [学会発表] 消化管癌の組織発生における癌・間質相互作用の役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏、仙波秀峰
  • 学会等名: 第20回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 広島市(招待講演)
  • 年月日: 2009-11-26
• [学会発表] ヒト大腸癌におけるWwox発現回復はリン酸化型Aktを抑制し、p53核内移行を促進する (2009)
  • 著者名/発表者名: 仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第20回日本消化器癌発生学会総会
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2009-11-26
• [学会発表] Direct cancer-stromal interaction increases fibroblast proliferation and enhances invasive properties of scirrhous-type gastric carcinoma cells (2009)
  • 著者名/発表者名: 仙波秀峰, 横崎宏, et al.
  • 学会等名: 19th Hiroshima Cancer Seminar International Symposium
  • 発表場所: 広島市
  • 年月日: 2009-11-01
• [学会発表] Alternative lengthening of telomeres frequently occurs in mismatch repair system-deficient gastric carcinoma (2009)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏、仙波秀峰, 他
  • 学会等名: 第68回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2009-10-03
• [学会発表] Requirement of PRL-3 phosphatase for the nucleolar localization of nucleolin during the progression of colorectal cancer (2009)
  • 著者名/発表者名: 仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第68回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2009-10-02
• [学会発表] Negative regulation of tight junction protein tricellulin by epithelial mesenchymal transition in gastric carcinoma (2009)
  • 著者名/発表者名: 増田理沙代、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第68回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2009-10-02
• [学会発表] The role of bone-marrow derived mesenchymal stem cells in progression and metastasis of gastric cancer (2009)
  • 著者名/発表者名: 西村加奈子、仙波秀峰、横崎宏
  • 学会等名: 第68回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2009-10-02
• [学会発表] Hypoxia induces tumor aggressiveness via acquired sternness in pancreatic cancer (2009)
  • 著者名/発表者名: 橋本興人、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第68回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2009-10-01
• [学会発表] The tumor suppressing pathway of WW domain containing oxidoreductase (WWOX) in human colorectal carcinogenesis (2009)
  • 著者名/発表者名: 松下麻衣、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第68回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2009-10-01
• [学会発表] 胃癌におけるミスマッチ修復系の不活化とテロメラーゼ非依存性細胞不死化の関連 (2009)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏、仙波秀峰, 他
  • 学会等名: 第29回日本分子腫瘍マーカー研究会
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2009-09-30
• [学会発表] Hypoxia induces tumor aggressiveness via acquired stemness in pancreatic cancer (2009)
  • 著者名/発表者名: 橋本興人、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第18回日本がん転移学会学術集会
  • 発表場所: 旭川市
  • 年月日: 2009-07-23
• [学会発表] 低酸素応答における癌細胞の悪性度獲得機構の解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 橋本興人、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第28回分子病理学研究会
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 2009-07-18
• [学会発表] 胃癌の増殖、転移における骨髄由来間葉系幹細胞の役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 西村加奈子、仙波秀峰、横崎宏
  • 学会等名: 第28回分子病理学研究会
  • 発表場所: 神戸市
  • 年月日: 2009-07-18
• [学会発表] ヒト大腸癌における癌制御遺伝子WW domain containing oxidoreductase (WWOX)シグナル経路についての検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 松下麻衣、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2009-05-02
• [学会発表] 膵臓癌において低酸素はacquired stemnessを介して腫瘍進行を誘導する (2009)
  • 著者名/発表者名: 橋本興人、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2009-05-02
• [学会発表] 胃癌の増殖、転移における骨髄由来間葉系幹細胞の役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 西村加奈子、仙波秀峰、横崎宏
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2009-05-02
• [学会発表] PRL-3結合タンパクとしてのNucleolinの同定と生物学的意義についての検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2009-05-02
• [学会発表] 胃癌・大腸癌の細胞不死化制御機構におけるDNAミスマッチ修復系不活化の関与 (2009)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏、仙波秀峰, 他
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2009-05-02
• [学会発表] 胃癌におけるtricellulin発現と上皮間葉移行に関する検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 増田理沙代、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第98回日本病理学会総会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2009-05-01
• [学会発表] 胃癌の細胞不死化制御機構におけるDNAミスマッチ修復系不活化の関与 (2008)
  • 著者名/発表者名: 大森靖弘、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第67回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋市
  • 年月日: 2008-10-28
• [学会発表] タイトジャンクション関連分子claudin発現調節メカニズムと胃粘膜分化マーカーとしての有用性に関する検討 (2008)
  • 著者名/発表者名: 増田理沙代、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第28回日本分子腫瘍マーカー研究会
  • 発表場所: 名古屋市
  • 年月日: 2008-10-27
• [学会発表] Cdx2発現は腸への分化を誘導し、胃癌における細胞周期を遅延させる (2008)
  • 著者名/発表者名: 仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第97回日本病理学会総会
  • 発表場所: 金沢市
  • 年月日: 2008-05-15
• [学会発表] スキルス胃癌細胞の組織形成と進展における胃癌細胞と間質細胞の相互作用因子の同定及び解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 児玉良典、仙波秀峰、横崎宏, 他
  • 学会等名: 第97回日本病理学会総会
  • 発表場所: 金沢市
  • 年月日: 2008-05-15
• [図書] スキルス胃癌(曽和融生、井藤久雄・編)(V.2)2.増殖因子) (2010)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏、仙波秀峰
  • 総ページ数: 131-136
  • 出版者: 医療ジャーナル社(改訂版 新編)
• [図書] 解明病理学病気のメカニズムを解く(青笹克之・編)(各論第3章消化器) (2009)
  • 著者名/発表者名: 横崎宏
  • 総ページ数: 319-366
  • 出版者: 医歯薬出版
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.med.kobe-u.ac.jp/gs/field/basic/patho.html