| 研究概要 |
我々はマウス肝発癌過程ではPI3K-Akt経路の下流でmTORが活性化していることに注目して担肝癌マウスにrapamycin(Rap)処理を行ったところ、約30%の肝癌で効果が見られたが、残りのものでは効果が部分的か、または全く見られず、また前癌病変では全く効果が見られなかった。これらのRap耐性肝腫瘍組織について4E-BP1、S6Kの燐酸化を調べたところ、著明に低下していたことからRapは十分にmTORの活性を抑制していると考えられた。しかし,Rapが蛋白翻訳マシナリーを十分抑制しているにもかかわらず、HIF-1αの発現は依然として維持されていた.したがって、肝癌ではRap耐性の蛋白合成メカニズムがあり、それはCap依存的な蛋白翻訳マシナリーが抑制されても癌関連遺伝子の発現は維持できる機能を備えていることを示している。そのようなメカニズムの一つとして蛋白翻訳がCap siteからではなく、mRNAの途中から開始されるinternal ribosomal entry site (IRES)が知られている。HIF-1α mRNAの5'非翻訳領域にIRES機能があるか否かを検討するために、renilla luciferaseとfirefly luciferaseのcDNAの間にHIF-1α遺伝子の5'非翻訳領域を組み込んだベクターを作製した。さらにこのベクターをマウス肝癌細胞に導入してRap処理を行い、renilla luciferaseとfirefly luciferaseの活性をルミノメーターにより測定したところ、HIF-1αの5'非翻訳領域にはIRES活性が証明された。
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