| 研究概要 |
本研究課題の目的は,生体内発癌要因としての低酸素・再酸素化を結論付けるために,これまでに得られた非上皮系組織由来の細胞株のほかに,1)上皮由来の細胞株からの癌腫発生と,2)個体レベルでの発癌の証明を行うことにある.第一に,上皮系細胞株としてヒト大腸腺腫細胞(FPCK-1-1),ラット不死化小腸上皮細胞(IEC-6)およびヒト不死化胎児腎上皮細胞(HEK293)の計3種類を用い,これらを低酸素インキュベーター(1%酸素濃度)と通常酸素インキュベーター(20%酸素濃度)の培養環境間を12時間毎に交置培養し,低酸素再酸素化環境に曝した.一定の継代毎に処理細胞を回収し,ヌードマウス皮下に移植して造腫瘍性の獲得の有無を検討した.その結果,これまでの非上皮系細胞株に比べて,上皮系細胞株では長期にわたる継代の後に癌化することを一部の細胞株に見出した。従って,低酸素再酸素化環境は細胞レベルにおいて発癌要因となる可能性が示唆された.さらに,低酸素再酸素化による発癌に関連して変動する遺伝子をDNAマイクロアレイ法により包括的に解析した結果,多くの遺伝子の発現変動が観察された.中でも低酸素再酸素化による細胞癌化において複数の細胞株に共通する分子を見出した,この分子を遺伝子導入して発現調節(過剰発現もしくは発現減少)すると,生体内における造腫瘍性の有無と呼応することから,新たな発癌制御分子と考えられた.第二に,個体に低酸素再酸素化を付加した際の発癌性に関し,これまでマウス左腎動静脈を遮断し,その後血流を再開させる虚血再灌流傷害を反復させてきた.遮断時間および虚血再灌流回数等の条件を整え,実験を繰り返した.観察期間も最長2年を超えているが,これまでに虚血再灌流を施行した臓器での発癌には至っていない.現在,腎以外の臓器を対象とした実験を検討している.
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