尿路病原性大腸菌が産生するUSPの作用解析と粘膜ワクチンの開発

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20590436
• 研究機関: 帯広畜産大学
• 研究代表者: 倉園 久生 帯広畜産大学, 畜産学部, 教授 (90186487)
• 研究分担者: 山本 新吾 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (80322741) ; 山崎 栄樹 帯広畜産大学, 畜産学部, 助教 (40514708)
• キーワード: 細菌 / 尿路感染症 / 蛋白質 / 免疫学 / 粘膜

研究概要

1アミノ酸置換無毒化USP融合蛋白(mUSP-GST)を高純度に精製して抗mUSP-GST家兎血清を調整し、この抗血清を更にmUSP-GSTを結合させたAffinityカラムで精製してmUSP-GST特異IgGを作製した。この特異IgGを用いたSandwich-ELISA系を構築して精製mUSP-GSTに対する検出感度を検討したところ、検出限界は500pg/mlであった(論文準備中)。現在、この検出系を用いてUPEC臨床分離株のUSP産生量の調査とIntactなUSPの精製を行っている。
下部尿路感染患者に対して行う抗生物質の経口投与方法の基準化を検討した。102名の女性患者にgatifloxacinを1日当たり200mg、3日連続投与し、5-9日後に尿検査と問診を行い、4-6週後に症状の有無に関するアンケート調査を実施した。93.1%(95/102)の患者が治癒し、このうち感受性菌が原因の患者の治癒率は94.7%(89/94)、耐性菌が原因の患者の治癒率は75%(6/8)であった。4-6週後のアンケート調査では、55.9%(57/102)の患者から回答がよせられ、10.5%(6/57)の患者から症状の訴えがあった。今回の結果から、フルオロキノロンを1日1回、3日連続で経口投与する治療法は単純性膀胱炎患者の治療には効果的であると考えられる(Yamamoto S et al, J.Infect. Chemother.15:104-107,2009)。

研究成果

• [雑誌論文] A V_HH that neutralizes the zinc-metalloproteinase activity of botulinum neurotoxin type A. (2010)
  • 著者名/発表者名: Thanongsaksrikul J, Srimanote P, Maneewatch S, Choowongkomom K, Tapchaisri P, Makino S-I, Kurazono H, Chaicumpa W.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 285 ページ: 9657-9666
  • 査読あり
• [雑誌論文] Direct binding of gangliosides to Helicobacter pylori vacuolating cytotoxin(VacA)neutralizes its toxin activity. (2010)
  • 著者名/発表者名: Wada A, Hasegawa M, Wong P F, Shirai E, Shirai N, Tan L J, Llanes R, Hojo H, Yamasaki E, Ichinose A, Ichinose Y, Senba M
  • 雑誌名: Glycobiology (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Current therapy of acute uncomplicated cystitis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto S, Higuchi Y, Nojima M
  • 雑誌名: International Journal of Urology (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human monoclonal ScFv neutralize lethal Thai cobra, Naja kaouthia, neurotoxin. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kulkeaw K, Sakolvaree Y, Srimanote P, Tongtawe P, Maneewatch S, Sookrung N, Tungtrongchitr A, Tapchaisri P, Kurazono H, Chaicumpa W.
  • 雑誌名: Journal of Proteomics 72 ページ: 270-282
  • 査読あり
• [雑誌論文] ピロリ菌の空胞化毒素VacAの多機能性-感染における役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山崎栄樹, 磯本一, 平山壽哉
  • 雑誌名: 蛋白質核酸酵素 54 ページ: 607-613
• [雑誌論文] Genetic profiles of fluoroquinolone-resistant Escherichia coli isolated from cystitis : phylogeny, virulence factors, PAIusp-subtypes, and mutation patterns. (2009)
  • 著者名/発表者名: Takahashi A, Muratani T, Yasuda M, Takahashi S, Monden K, Ishikawa K, Kiyota H, Arakawa S, Matsumoto T, Shima, H, Kurazono H, Yamamoto S
  • 雑誌名: Journal of Clinical Microbiology 47 ページ: 791-785
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical efficacy of oral administration of 200mg gatifloxacin once daily for 3 days for the treatment of patients with uncomplicated cystitis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto S, Akiyama K, Yoshimoto T, Kanokogi M, Yabumoto H, Ihara H, Ishikawa E, Yoshioka M, Kokura K, Hiroki Shima
  • 雑誌名: Journal of infection and chemotherapy 15 ページ: 104-107
  • 査読あり
• [学会発表] 尿路病原性大腸菌の産生するUSPに対する特異的同定法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山崎栄樹, 高橋彰, 山本新吾, 星英之, 牧野壮一, 倉園久生
  • 学会等名: 第83回日本細菌学会総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 20100328-20100329
• [学会発表] Diversity in the expression of Salmonella enterotoxin that has a cytotoxic effect on cultured cells by various Salmonella species. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamasaki E, Nakano M, Hoshi H, Seto Y, Chongsa-nguan M, Chicumpa W, Nair G B, Makino S-I, Hirayama T, Kurazono H
  • 学会等名: 3rd ASM Conference on Salmonella : Biology, Pathogenesis & Prevention
  • 発表場所: Aix-en-Provence, フランス
  • 年月日: 2009-10-07
• [学会発表] Diversity in the expression of Salmonella enterotoxin that has a cytotoxic effect on cultured cells by various Salmonella species. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamasaki E, Nakano M, Hoshi H, Seto Y, Chongsa-nguan M, Chicumpa W, Nair G B, Makino S-I, Hirayama T, Kurazono H
  • 学会等名: 平成21年度日米医学協力会コレラ・細菌性腸管感染症専門部会総会
  • 発表場所: 京都大学稲盛記念ホール
  • 年月日: 2009-07-29
• [学会発表] The phylogenetic and virulence profiles of quinolone-resistant Escherichia coli isolated from cystitis are different from quinolone-susceptible counterparts. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto S, Takahashi A, Muratani T, Yasuda M, Takahashi S, Monden K, Ishikawa K, Kiyota H, Arakawa S, Matsumoto T, Shima H, Kurazono H
  • 学会等名: America Urology Association Annual Meeting
  • 発表場所: シカゴ、米国
  • 年月日: 2009-04-28