HIV-1Nefによるマクロファージの自然免疫機能撹乱とエイズ病態形成の機構

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20590481
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 横田 恭子 国立感染症研究所, 免疫部, 室長 (20182701)
• キーワード: 病原性 / 自然免疫機能障害

研究概要

HIV-1のコードするアクセサリータンパクNefはエイズ病態形成への関わりが示唆されてはいるがその機能は未だ明らかではない。我々は、ヒトマクロファージ(Mf)にNefの調節性発現が可能な組換えアデノウイルスを感染させてマイクロアレイ解析した結果、Nefの高度発現に伴って低下する自然免疫機能に関わる遺伝子(TLR5やIL-10Rβ等)を検出し、これらを中心にNef発現がMfの自然免疫機能を障害するかどうかをin vitroおよびヒト血液系細胞が分化増殖する免疫不全マウス(ヒト化マウス)を用いて明らかにすることを目的とした。前年度は単球系細胞株U937でNef発現に伴うTLR5やIL-10Rβの発現低下を確認し、5人のドナー単球由来マクロファージ(MDM)に共通してTLR5のリガンドであるflagellin刺激時のIL-6産生がNef発現により低下することを観察した。しかしながらMDMは用いた条件ではTLR5やIL-10Rβのタンパクレベルでの発現が弱く、フローサイトメーターでNef発現によるこれら分子の発現変化を解析することは困難であった。そこでMDMを不活化Salmonella菌やflagellin、IL-10等で刺激し、培養上清中のサイトカイン25種類を網羅的に測定した結果、検出されたサイトカインの中でIL-6の産生のみがNef発現に応じて変化していることが示唆された。また、ヒト化マウスにおけるNefの作用を検証していくために、今年度はHIV-1のマクロファージ指向性ウイルス(R5型)の増殖系を確立し、血中や脾臓・リンパ節、骨髄におけるウイルス感染T細胞の表現型を解析することが可能となった。残念ながらこのマウスではマクロファージ・樹状細胞の分化が乏しく、これらの細胞は骨髄で解析する必要があることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] siRNA inhibiting HIV-1 reactivation restores function of HIV-specific CD4+ T cells in chronically HIV-infected individuals (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto, T., Samri, A., Mitsuki, Y-Y., Mizukoshi, F., Kobayashi, K., Inoue, J.-I., Autran, B., Tsunetsugu-Yokota, Y.
  • 雑誌名: AIDS 23 ページ: 2265-2275
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of newly identified secretory CEACAM1 isoforms in the intestinal epithelium (2009)
  • 著者名/発表者名: Terahara, K., Yoshida, M., Taguchi, F., Igarashi, O., Nochi, T., Gotoh, Y., Yamamoto, T., Tsunetsugu-Yokota, Y., Beauchemin, N., Kiyono, H.
  • 雑誌名: BBRC 383 ページ: 340-346
  • 査読あり
• [雑誌論文] Polyfunctional T-cell induction in neutralizing antibody-triggered simian immunodeficiency virus control (2009)
  • 著者名/発表者名: amamoto, T., Iwamoto, N., Yamamoto, H., Tsukamoto, T., Kuwano, T., Takeda, A., Kawada, M., Tsunetsugu-Yokota, Y., Matano, T.
  • 雑誌名: J.Virol. 83 ページ: 5514-5524
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selective transmission of R5 HIV-1 over X4 HIV-1 at the dendritic cell-T cell infectious synapse is determined by the T cell activation state (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto, T., Tsunetsugu-Yokota, Y., Mitsuki, Y-Y, Mizukoshi, F., Terahara, K., Inagaki, Y., Yamamoto, N., Kobayashi, K., Inoue, J-I.
  • 雑誌名: PLoS Pathogen 5 ページ: e1000279
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation of HIV-1 Gag-specific CD8^+ T cells by yeast-derived VLP-pulsed dendritic cells is influenced by the level of mannose on the VLP antigen (2009)
  • 著者名/発表者名: Mizukoshi, F., Yamamoto, T., Mitsuki, Y-y., Terahara, K., Kawana-Tachikawa, A., Kobayashi, K., Iwamoto, A., Morikawa, Y., Tsunetsugu-Yokota, Y.
  • 雑誌名: Microbes Infect. 11 ページ: 191-197
  • 査読あり
• [学会発表] 樹状細胞を標的としたHIV-1増殖抑制shRNA発現レンチウィルスの開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 渋沢謙太郎、光木裕也、寺原和孝、柳雄介、小林和夫、横田(恒次)恭子
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20091200
• [学会発表] CD4標的レンチウイルスベクターの開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 土屋貴嗣、光木裕也、寺原和孝、渋沢謙太郎、小林和夫、渡邉俊樹、横田(恒次)恭子
  • 学会等名: 第32会日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20091200
• [学会発表] HIV-1感染と麻疹ウイルス感染が相互の及ぼす影響およびその機構の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 光木裕也、水越文徳、渋沢謙太郎、寺原和孝、竹田誠、柳雄介、森川裕子、山岡昇司、横田(恒次)恭子
  • 学会等名: 第57回ウイルス学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20091100
• [学会発表] ウイルス感染に対する生体防御機能とワクチン (2009)
  • 著者名/発表者名: 横田恭子
  • 学会等名: 第27回日本耳鼻咽喉科免疫アレルギー学会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 20090200
• [図書] レトロウイルス進化におけるAIDS、病原体の進化による疾病、特集:生活習慣病HA進化病である、成人病と生活習慣病 (2009)
  • 著者名/発表者名: 横田(恒次)恭子
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: 東京医学社