新しい腫瘍マーカーMK-1の癌の診断と治療における有用性の検討

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20590593
• 研究機関: 福岡大学
• 研究代表者: 黒木 政秀 福岡大学, 医学部, 教授 (40122692)
• キーワード: 癌 / 免疫学 / バイオテクノロジー / モノクローナル抗体 / MK-1

研究概要

新しい腫瘍マーカーであるヒト上皮細胞抗原MK-1について、癌の診断と治療における有用性について調べるもので、平成22年度は以下の点を検討した。
まず、確立したMK-1測定用のELISAを利用し、癌患者と正常人血清中のMK-1を測定した。正常人30例ではすべて検出感度(2ng/ml)未満であった。種々の癌患者血清では100例中10例が陽性(2ng/ml以上)で、最高例は75ng/mlであった。主な内訳は、膵臓癌10例中1例(10%)、子宮頚癌7例中1例(14%)、大腸癌23例中2例(8%)、乳癌17例中2例(11%)が陽性を示した。本研究では健常者のMK-1血清濃度は非常に低いことと、癌患者での血清MK-1陽性率は他のマーカーに比べ低い結果が得られた。しかし血清中に高値を示す例があり、MK-1を標的とする画像診断や免疫療法時に留意する必要が示唆された。
つづいて、ヒト型抗MK-1抗体の免疫療法における有用性を検討した。具体的には、ヒト抗MK-1モノクローナル抗体(抗体M13-57)を産生するハイブリドーマ細胞よりヒト抗体のH鎖およびL鎖のV領域を挟むプライマーを用いてH鎖およびL鎖のV領域遺伝子を単離した。次いで、単離したH鎖およびL鎖のV領域遺伝子をリンカーで挟んで結合し、単鎖抗体(scFv)遺伝子を作製するとともに、IL-2との融合タンパクの作製を試みた。これを酵母発現ベクターであるpPICZαに組み込み、酵母の一種であるピキア・パストリスに発現させたところ、従来の大腸菌に比べて容易に精製できた。この融合タンパクは腫瘍細胞に対するNK-LAK細胞活性をインビボでもインビトロでもMK-1特異的にターゲットした。この低免疫原性でより優れた組織透過性を持つ融合タンパクを用いることにより、NK-LAK細胞をMK-1産生腫瘍特異的に作用させることが期待された。

研究成果

• [雑誌論文] HB-EGF orchestrates the signals illvolved in triple-negative and trastuzumab-resistant breast cancer (2010)
  • 著者名/発表者名: Yotsumoto, F., Oki, E., Tokunaga, E., Maehara, Y., Kuroki, Ma., et al.
  • 雑誌名: International Journal of Cancer 巻: 127 ページ: 2707-2717
  • 査読あり
• [雑誌論文] Amphiregulin regulates the activation of ERK and Akt through EGFR and HER3 signals involved in the progression of pancreatic cancer (2010)
  • 著者名/発表者名: Yotsumoto, F., Fukami, T., Yagi, H., Funakosi, A., Yoshizato, T., Kuroki, Ma., et al.
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 101 ページ: 2351-2360
  • 査読あり
• [雑誌論文] Emerging strategies for ErbB ligand-based targeted the rapy for cancer (2010)
  • 著者名/発表者名: Tsujioka, H., Yotsumoto, F., Shirota, K., Horiuchi, S., Yoshizato, T., Kuroki, Ma., et al.
  • 雑誌名: Anticancer Research 巻: 30 ページ: 3107-3112
  • 査読あり
• [学会発表] Secreted production of bifunctional sc-Fv antibody-based fusion protein of IL-2 and FU-MK-1(VH-Vκ)in Pichia pastoris. (2011)
  • 著者名/発表者名: Anuleechan, S., Palaga, T., Kuroki, Mo., Kuroki, Ma., Chanprateep, S.
  • 学会等名: Nano in Cancer : Linking Chemistry, Biology, and Clinical Applications In Vivo
  • 発表場所: マイアミ (アメリカ)
  • 年月日: 2011-01-14
• [図書] Peptide Science 2009 (2010)
  • 著者名/発表者名: Mizoe, Y., Shioi, N., Terada, S., Uchida, Y., Kuroki, M, Lee, S.
  • 総ページ数: 491
  • 出版者: The Japanese Peptide Society(Osaka)