|
潰瘍性大腸炎・クローン病の炎症性腸疾患患者および非炎症性腸疾患である大腸ポリープなどの対照患者より小腸・大腸内視鏡検査時に生検サンプルを採取し、RNAを抽出した。RNAよりcDNAを作成した。Real time PCRでTh17型サイトカイン、Th1型サイトカインRNAの発現レベルを解析した。潰瘍性大腸炎、クローン病でTh17型サイトカインIL-17とTh1型サイトカインIFN-γの発現が高レベルの症例を認めた。
ヒトTh17型炎症に対する制御性T細胞の抑制効果を検討する目的で、ヒトナイーヴCD4+T細胞よりTh17細胞の誘導法について更に検討を加えた。健常人末梢血より単核球を分離、磁気ビーズを用いてナイーヴCD4+T細胞(CD4+CD62L+CD25-)をIL-1β、IL-6、IL-23、抗IL-12抗体、抗IFN-γ抗体、抗IL-4抗体存在下に抗CD2抗体/抗CD3抗体/抗CD28抗体付着ビーズで刺激するとIL-17を高レベルに産生する細胞が誘導され、最も至適な条件と考えられた。IFN-γ産生も認めたが低レベルであり、Th17型細胞が誘導されたと考えられる。対照的にナイーヴCD4+T細胞をIL-12、抗IL-4抗体存在下に刺激すると、Th1型細胞が誘導されIFN-γを高レベルに産生したが、IL-17産生はわずかであった。マウスでTh17細胞を誘導するTGF-βの添加は、逆にIL-17産生を抑制した。以上よりヒトTh17型細胞の誘導法が確立された。
|
