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CHOPノックアウトマウスとそのコントロールマウス(野生型マウス)を用いて、MCD食とコントロール食を与えて以下の検討を行った。
1.肝組織での免疫染色での検討
肝組織での染色で、TUNEL assayでは、1週目でノックアウトマウスは、野生型マウスに比べ陽性細胞数の減少を認めたが、2週目では差がなくなっていた。酸化ストレスマーカーである8-OHdGによる免疫染色では、1週目でノックアウトマウスは、野生型マウスに比べ陽性細胞数の減少を認めた。またCaspase 12の免疫染色では、1週目でノックアウトマウスは、野生型マウスに比べ陽性細胞数の減少を認めたが、2週目では差がなくなっていた。現在結果の再現性に関して検討中である。
2.脂質関連酵素の発現の検討
SREBP-1などの発現を肝組織中のmRNAに関して検討した。PPAR gamma mRNAは、MCD食投与後1週でmRNAがコントロールマウスに比べノックアウトマウスで増加していた。現在結果の再現性に関して検討中である。
3.CHOP上流の小胞体ストレス関連蛋白の発現の検討
PERKやeIF2αなどの肝組織中の蛋白発現をWestern blotで検討した。現在結果の再現性に関して検討中である。
4.アポトーシス関連蛋白の発現の検討
Caspase 3などの肝組織中の蛋白発現をWestern blotで検討した。現在結果の再現性に関して検討中である。Bax mRNAはMCD投与1週目で野生型に比べてノックアウトマウスで減少していた。
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