| 研究概要 |
我々はBrdUラベリング法を用いて、組織幹細胞に共通する「分裂速度の非常に遅い」という性質を持つ細胞、いわゆるSlow-cycling Cellが成体腎に存在することを確認し、さらに腎障害後の再生過程でその細胞が増殖・分化し尿細管再構築に大きく貢献する、腎幹細胞的な役割を果たすことを明らかにしてきた(J Am Soc Nephrol 14:3138-3146, 2003, J Am Soc Nephrol 17:188-98, 2006)。
本研究ではこの腎幹細胞に焦点を当てて、加齢に伴う腎機能低下と腎幹細胞数の相関を検討している。具体的にはOsmoticポンプを用いて、様々な週齢のラットに1週間BrdUラベルし、2週間の観察期間をおいて、BrdU陽性細胞を免疫染色により検出。これにより腎幹細胞がBrdU標識される。その結果、加齢に伴い腎幹細胞数は減少することが判明した。さらに上記ラットに虚血・再灌流障害急性腎不全モデルを作成したところ、障害後観察される増殖細胞(再生細胞)の数は加齢に伴い減少していることを確認した(PCNA染色)。一方、加齢に伴い尿細管周囲の毛細血管網の減少も観察され、腎幹細胞の数は血管内皮細胞由来因子により制御されている可能性が高いことが判明した。
本年度はさらにIn vitroの検討を行った。培養ヒト尿細管細胞をゲル内で3次元培養し、様々な培養環境を試行錯誤し、最終的に「尿細管再生のIn vitroモデル」を確立した。血管内皮細胞と共培養することにより、尿細管細胞の管腔形成能が著明に促進されることが確認できた。以上のことから、尿細管再生には血管内皮由来因子が重要な役割を果たしていることが明らかになった。
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