プロテオミクスによる筋無力症・筋炎特異的自己抗体の検索とバイオマーカーの確立

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20590993
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 神経内科学
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 犬塚 貴 岐阜大学, 医学系研究科, 教授 (50184734)
• 研究分担者: 保住 功 岐阜大学, 医学系研究科, 准教授 (20242430) ; 田中 優司 岐阜大学, 医学系研究科, 助教 (70377654) ; 木村 暁夫 岐阜大学, 医学系研究科, 助教 (00362161)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: プロテオミクス / 抗筋抗体 / 炎症性筋炎 / バイオマーカー

研究概要

ラットの骨格筋蛋白を抗原とする二次元免疫ブロット法と質量分析法を組み合わせたプロテオミクスの手法を用いて、筋炎の患者血清中に存在する特異的抗筋抗体の検索を行った。対象とした血清は、筋生検で確認された10例の特発性炎症性筋炎(多発性筋炎7例、壊死性筋炎2例、皮膚筋炎1例)、対照として筋強直性ジストロフィー11例、健常人10例であった。特発性炎症性筋炎(IIM)の患者血清に有意に高頻度に反応する7スポットを検出し、LC-MS/MS質量分析法により、これらから2つの新たな抗体認識抗原を同定した。myosin-binding protein(fast type)[MBP C]とpyruvate kinase isozyme M1/M2[PK M1/M2]という筋特異的分子であり、前者は免疫グロブリンスーパーファミリーの一つで骨格筋や心筋のthick filamentに存在し、後者は骨格筋に豊富に存在するフォスフェノールピルビン酸をピルビン酸に変換する酵素である。いずれも実験的自己免疫性筋炎を動物に惹起しうる抗原として報告されている。IIMにおける抗MBP C抗体は9/10で陽性、抗PK M1/M2抗体は5/10で陽性であった。抗体の病因的意義についての検討は今後の課題であるが、両抗体組み合わせた場合のIIM診断感受性は50%、特異性は80%であり、多発性筋炎の診断については感受性は71%、特異性は92%であり、有力な診断バイオマーカーの候補となることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Antibodies in patients with neuropsychiatric systemic lupus erythematosus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura A, Kanoh Y, Saukurai T, Koumura A, Yamada M, Hayashi Y, Tanaka Y, Hozumi I, Takemura M, Seishima M, Inuzuka T
  • 雑誌名: Neurology 74 ページ: 1372-1379
  • 査読あり
• [雑誌論文] High prevalence of autoantibodies against phosphoglycerate mutase 1 in patients with autoimmune central nervous system diseases. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura A, Sakurai T, Koumura A, SuzukiY, Tanaka Y, Hozumi I, Tanaka R, Takemura M, Seishima M, Inuzuka T
  • 雑誌名: J Neuroimmunology 219 ページ: 105-108
  • 査読あり
• [雑誌論文] No relapse of neuromyelitis optica during drug-induced B-lymphopenia with hypogammaglobulinemia. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tanaka Y, Kimura K, Kawachi I, Inuzuka T
  • 雑誌名: Neurology. 75 ページ: 1745-1747
  • 査読あり
• [雑誌論文] 膠原病に伴う神経・筋障害-診断と治療の進歩膠原病における新たな抗神経抗体の検索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 木村暁夫, 犬塚貴
  • 雑誌名: 日本内科学会雑誌 99 ページ: 115-120
• [雑誌論文] Proteomic analysis of autoantibodies in neuropsychiatric systemic lupus erythematosus patient with white matter hyperintensities on brain MRI. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kimura A, Sakurai T, Tanaka Y, Hozumi I, Takahashi K, Takemura M, Saito K, Seishima M, Inuzuka T
  • 雑誌名: Lupus 17 ページ: 16-20
  • 査読あり
• [雑誌論文] Longitudinal analysis of cytokines and chemokines in the cerebrospinal fluid of a patient with neuro-Sweet disease presenting with recurrent encephalomeningitis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kimura A, Sakurai T, Koumura A, Suzuki Y, Tanaka Y, Hozumi I, Nakajima H, Ichiyama T, Inuzuka T
  • 雑誌名: Internal Medicine 47 ページ: 135-141
  • 査読あり
• [雑誌論文] Progressive multifocal leuko-encephalopathy and CD4+ T-lymphocytopenia in a patient with Sjogren syndrome. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hayashi Y, Kimura A, Kato S, Koumura A, Sakurai T, Tanaka Y, Hozumi I, Sunden Y, Orba Y, Sawa H, Takahashi H, Inuzuka I
  • 雑誌名: J Neurol Sci. 268 ページ: 195-198
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selective cards, equine hypertrophy with idiopathic inflammation. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hayashi Y, Sakurai T, Kimura A, Ikeda T, Matsuyama Z, Suzuki Y, Tanaka Y, Hozumi I, Hosoe H, Takahashi H, Inuzuka T
  • 雑誌名: Muscle Nerve 38 ページ: 1065-1069
  • 査読あり
• [雑誌論文] Creutafeldt-Jakob病と類似の臨床経過を示したBasedow病と伴った橋本脳症の1例 (2008)
  • 著者名/発表者名: 櫻井岳郎, 田中優司, 香村彰宏, 林祐一, 木村暁夫, 保住功, 米田誠, 犬塚貴
  • 雑誌名: BRAIN and NERVE 60 ページ: 559-565
  • 査読あり
• [雑誌論文] 介護従事者にみられた水痘脊髄炎 (2008)
  • 著者名/発表者名: 鈴木真理子、林祐一、木村暁夫、永澤守、香村彰宏、櫻井岳郎、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 雑誌名: BRAIN and NERVE 60 ページ: 79-83
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of antibodies as biological markers in serum from multiple sclerosispatients by immunoproteomic approach.
  • 著者名/発表者名: Sakurai T, Kimura A, Yamada M, Koumura A, Hayashi Y, Tanaka Y, Hozumi I, Inuzuka T
  • 雑誌名: J Neuroimmunology in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Elevated anti-heat shock protein 60 antibody titer is related to white matter hyperintensities.
  • 著者名/発表者名: Kimura A, Sakurai T, Yamada M, Koumura A, Hayashi Y, Tanaka Y, Hozumi I, Takemura M, Seishima M, Inuzuka T
  • 雑誌名: Journal of stroke cerebrovascular disease in press
  • 査読あり
• [学会発表] Anti-Endothelial Cell Antibodies in the Elderly with Extended White Matter Hyperintensity. (2011)
  • 著者名/発表者名: 木村暁夫, 櫻井岳郎, 山田恵, 林祐一, 田中優司, 保住功, 犬塚貴
  • 学会等名: American Academy of Neurology 63^<st> Annual Meeting
  • 発表場所: Honolulu, USA
  • 年月日: 2011-04-13
• [学会発表] Stress 70 protein抗体の特異性に関する検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 櫻井岳郎、木村暁夫、山田恵、香村彰宏、林祐一、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 学会等名: 第51回日本神経学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-05-22
• [学会発表] Motor-dominant CIDP患者の臨床的検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 木村暁夫、櫻井岳郎、山田恵、香村彰宏、林祐一、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 学会等名: 第51回日本神経学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-05-21
• [学会発表] プロテオミクス解析を用いた通常型多発性硬化症における疾患特異的抗神経抗体の検索 (2009)
  • 著者名/発表者名: 櫻井岳郎、木村暁夫、山田恵、林祐一、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 学会等名: 第50回日本神経学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2009-05-22
• [学会発表] 抗Hsp60抗体と大脳白質病変に関する研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 木村暁夫、櫻井岳郎、山田恵、林祐一、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 学会等名: 第50回日本神経学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2009-05-20
• [学会発表] Identification of Antibodies Against Brain Antigen in Sera of Patients with Neuropsychiatric Systemic lupus erythematosus. (2009)
  • 著者名/発表者名: 木村暁夫, 櫻井岳郎, 山田恵, 林祐一, 田中優司, 保住功, 犬塚貴
  • 学会等名: American Academy of Neurology 61^<st> Annual Meeting
  • 発表場所: Seattle, USA
  • 年月日: 2009-04-29
• [学会発表] 多発性硬化症患者における抗Phosphoglycerate mutase 1抗体の特異性に関する検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 木村暁夫、櫻井岳郎、山田恵、林祐一、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 学会等名: 第21回日本神経免疫学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-03-13
• [学会発表] プロテオミクス解析を用いた通常型多発性硬化症における疾患特異的抗神経抗体の検索 (2009)
  • 著者名/発表者名: 櫻井岳郎、木村暁夫、山田恵、林祐一、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 学会等名: 第21回日本神経免疫学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-03-13
• [学会発表] 通常型多発性硬化症における抗 (2008)
  • 著者名/発表者名: 櫻井岳郎、木村暁夫、山田恵、香村彰宏、林祐一、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 学会等名: 第49回日本神経学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2008-05-16
• [学会発表] CNSループス患者におけるプロテオミクス解析を用いた自己抗体認識抗原の同定 (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村暁夫、櫻井岳郎、山田恵、林祐一、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 学会等名: 第49回日本神経学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2008-05-16
• [学会発表] プロテオミクス解析を用いた中枢神経ループス特異的抗神経抗体の検索 (2008)
  • 著者名/発表者名: 木村暁夫、櫻井岳郎、山田恵、林祐一、田中優司、保住功、犬塚貴
  • 学会等名: 第20回日本神経免疫学会学術集会
  • 発表場所: 新潟
  • 年月日: 2008-04-18
• [備考] ホームページ等