遺伝子破壊マウスを用いたACTH受容体(MC2R)シグナルの機能解析

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20591086
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 清水 力 北海道大学, 大学病院, 講師 (00292029)
• 研究分担者: 三好 秀明 北海道大学, 大学病院, 助教 (30360902)
• キーワード: ACTH受容体 / 遺伝子破壊マウス / シグナル

研究概要

本研究は下垂体ホルモンである副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)のあらたな生理的作用および細胞内情報伝達についてACTH受容体(MC2R)を遺伝子操作により破壊したマウス(MC2RKOマウス)を用いて解析することにある。MC2R遺伝子の蛋白翻訳領域はひとつのエクソンで構成されており、それを欠失させるノックアウトベクターを用いてMC2R欠損マウスを作製、これまでC57BL/6系を用いて交配を続けていたが、ホモの仔は出生するも生後まもなく死亡することにより解析対象とすることができなかった。そのため、129系統でバッククロスを開始し、継代4世代までの雌雄ヘテロマウスが得られている。継代を続ける一方、ヘテロ同士を交配させたところ、ホモマウスは出生するもののいまだ離乳時期を越える個体は得られていない(ホモマウスの生存出生数も少なく生後数日で死亡)。そのため、129系統でのバッククロスによるホモマウス取得は断念し、ホモマウスの約半数が離乳時期まで生存可能なB6/Ba1bcの混合遺伝背景をもつMC2RKOマウスを入手し、現在繁殖を進めている。現時点において、オスホモマウスに対して10匹のメスヘテロマウスとの交配を試み、いずれも妊娠は確認できたが、実際に仔が成長したのは1匹のメスヘテロマウスから得られた5匹(オスホモ2匹、メスヘテロ3匹)だけであり、更なる交配を進めることによりホモマウスを多数取得し、研究目的にある諸実験を行いたいと考えている。

研究成果

• [雑誌論文] Simultaneous Determination of Twelve Tetrahydrocorticosteroid Glucuronides in Human Urine by Liquid Chromatography/Electrospray Ionization-Linear Ion Trap Mass Spectrometry (2009)
  • 著者名/発表者名: Ikegawa S, Hasegawa M, Okihara R, Shimizu C, Chiba H, Iida T, Mitamura K
  • 雑誌名: Anal.Chem 81 ページ: 10124-10135
  • 査読あり
• [雑誌論文] Angiotensin II receptor Blocker, Valsartan, Increses Myocardial Blood Volume and Regresses Hypertrophy in Hypertensive Patients (2009)
  • 著者名/発表者名: Komatsu H, Yamada S, Iwano H, Okada M, Onozuka H, Mikami T, Yokoyama S, Inoue M, Kaga S, Nishida M, Shimizu C, Matsuno K, Tsutsui H.
  • 雑誌名: Circulation J 73 ページ: 2098-2103
  • 査読あり
• [雑誌論文] Right ventricular diastolic dysfunction in patients with left ventricular hypertrophy : analysis of right ventricular myocardial relaxation using two-dimentional speckle tracking imagine (2009)
  • 著者名/発表者名: Kaga S, Mikami T, Onozuka H, Omotehara S, Abe A, Yamada S, Okada M, Komatsu H, Inoue M, Yokoyama S, Nishida M, Shimizu C, Matsuno K, Tsutsui H
  • 雑誌名: J Echocardiogr 7 ページ: 25-33
  • 査読あり
• [学会発表] Mutation Analysis of SDHB and SDHD gene in pheochromocytomas and paragangliomas : identification of a novel nonsense mutation(Q168X) (2010)
  • 著者名/発表者名: Shimizu S, Oishi Y, Nagai S, Yoshida M, S Fujisawa S, Sazawa A, Shinohara N, Nonomura K, Matsuno K
  • 学会等名: 14^<th> International Congress of Endocrinology(ICE2010)
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2010-03-29