インターロイキン27と自然免疫応答のクロストークによるウイルス増殖抑制

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20591208
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 岸田 綱郎 京都府立医科大学, 医学部, 博士研究員 (00370205)
• キーワード: ウイルス / 感染症 / 微生物 / サイトカイン

研究概要

ウイルスRNA→RIG-I/MDA5→IPS-1→TBK1・IKKε→IRF→I型IFN→ウイルス抑制効果というパスウェイについてはすでに多くの報告がある。さらに前述のように、研究代表者らは最近、IL-27シグナルがRIG-I/MDA5の発現を亢進すること、I型IFNの産生を誘導すること、抗ウイルス作用を惹起することを見出した。しかしながら、IL-27レセプターを介するシグナルが如何にしてRIG-I/MDA5の発現誘導にリンクするのかに関しては、未だブラックボックスである。そこで本研究では、まずこのブラックボックスに関与する可能性が想定しうる既知の分子群について、分子生物学的手法によって解明した。
IL-27刺激細胞、または非刺激細胞に、非感染、またはEMCVを感染させて培養後、RNAと蛋白を調整する。WSX-1、gp130下流のシグナル分子群であるSTAT1、STAT3、SOCS3、p38MAPK、T-bet、LFA-1、ERK1/2の発現量の変化と活性化を、リアルタイムRT-PCRとウェスタンブロッティングをもちいて、また分子間の相互作用を免疫沈降法等で解析する。さらに、これらの分子をターゲットとしたsiRNAを、初代培養心筋細胞に導入後、EMCVを感染させることにより、IL-27の抗ウイルス作用における各分子の貢献度を検証する。それらの結果を総合し、IL-27がRIG-I/MDA5を亢進させる細胞内シグナル伝達機構の理解につなげる。さらに、クリティカルと思われる分子について、その遺伝子のノックアウトマウスより初代心筋細胞を樹立し、上記と同様の解析を行う。

研究成果

• [雑誌論文] N-acetylcysteine prevents nitric oxide-induced chondrocyte apoptosis and cartilage degeneration in an experimental model of osteoarthritis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa S, Arai Y, Mazda O, Kishida T, Takahashi KA, Sakao K, Saito M, Honjo K, Imanishi J, Kubo T.
  • 雑誌名: J Orthop Res. 28(2) ページ: 156-163
  • 査読あり
• [雑誌論文] MDR1a/1b gene silencing enhances drug sensitivity in rat fibroblast-like synoviocytes. (2010)
  • 著者名/発表者名: Honjo K, Takahashi KA, Mazda O, Kishida T, Shinya M, Tokunaga D, Arai Y, Inoue A, Hiraoka N, Imanishi J, Kubo T.
  • 雑誌名: J Gene Med. 12(2) ページ: 219-227
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mitf silencing cooperates with IL-12 gene transfer to inhibit melanoma in mice. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakai N, Kishida T, Hartmann G, Katoh N, Imanishi J, Kishimoto S, Mazda O.
  • 雑誌名: Int Immunopharmacol. 10(4) ページ: 540-545.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Raspberry-like assembly of cross-linked nanogels for protein delivery. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hasegawa U, Sawada S, Shimizu T, Kishida T, Otsuji E, Mazda O, Akiyoshi K.
  • 雑誌名: J Control Release 140(3) ページ: 312-317
  • 査読あり
• [雑誌論文] Asporin and transforming growth factor-beta gene expression in osteoblasts from subchondral bone and osteophytes in osteoarthritis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sakao K, Takahashi KA, Arai Y, Saito M, Honjyo K, Hiraoka N, Kishida T, Mazda O, Imanishi J, Kubo T.
  • 雑誌名: J Orthop Sci. 14(6) ページ: 738-747
  • 査読あり
• [雑誌論文] Early-stage blocking of Notch signaling inhibits the depletion of goblet cells in dextran sodium sulfate-induced colitis in mice.
  • 著者名/発表者名: Shinoda M, Shin-Ya M, Naito Y, Kishida T, Ito R, Suzuki N, Yasuda H, Sakagami J, Imanishi J, Kataoka K, Mazda O, Yoshikawa T.
  • 雑誌名: J Gastroenterol. (印刷中)
  • 査読あり
• [学会発表] IL-21の多彩なin vivo生理活性と分子病態制御への応用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 岸田綱郎、菅井学、清水章、今西二郎、横田義史、松田修
  • 学会等名: 免疫ワークショップ
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-11-21
• [学会発表] Nonviral gene administration by means of the Epstein-Barr virus (EBV)-based episomal vectors and its application to gene therapy and regener ative medicine (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsunao Kishida, Osam Mazda, Masahiro Matsui, Hiroshi Nakano, Koichiro Yoshimoto, Taketoshi Shimada, Shigeru Nakai, Jiro Imanishi, Yasuo Hisa
  • 学会等名: MHS2009
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2009-11-10