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表皮基底膜は表皮-真皮接合に重要な役割を果たしており、基底膜構成成分の欠損あるいは構成成分に対する自己抗体の産生により、水疱症を生じることが知られている。これら疾患の病態生理あるいは表皮基底膜の生物学的意義・役割を解明するためには、各構成成分間の相互作用を明らかにする必要がある。本研究では、in vivoにおける基底膜構成成分の相互作用について明らかにすることを目的として、ラミニン332(旧・ラミニン5)欠損ヒト皮膚組織において、他の基底膜構成成分がどのような存在様式を示すのかについて、免疫電顕的に検討する。
本年度は、対象となるHerlitz致死型接合部型表皮水疱症(ラミニン332の欠損により発症)患者について、症例の集積を図るとともに、遺伝子レベルでの診断を行い、ラミニン332が欠損していることを確認した。すなわち、臨床症状等に加えて、光顕・電顕による病理組織学的検討、さらには免疫組織学による基底膜構成成分のタンパクレベルでの発現の検討も行い診断を確定し、ラミニン332をコードする遺伝子における変異の同定を行い、診断をより確実なものにするとともに、本研究の主旨に合致する症例である事を確認した。これにより、本研究遂行に必要な症例を確保しつつある。この過程において、ラミニン332のy2鎖をコードするLAMC2遺伝子における日本人高頻度変異の可能性を見出すことができ、遺伝型一表現型相関の解析、遺伝子検索の効率化等へ寄与するものと考えられる。
また患者皮膚組織を採取し、凍結固定・凍結置換法により、次年度以降に実施予定の免疫電顕実施に必要な基質となる免疫電顕用ブロックを作製した。
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