強皮症線維芽細胞を用いた線維化の機序の解明

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20591350
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 尹 浩信 熊本大学, 生命科学研究部, 教授 (20282634)
• キーワード: collagen / TGF-β / extracellular matrix / signal transduction / transcriptional regulation

研究概要

正常および強皮症培養線維芽細胞を用いて免疫プロット法にてCD36蛋白の発現量を検討したところ強皮症線維芽細胞において発現が低下していた。皮膚組織を用いた免疫染色にて強皮症線維芽細胞におけるCD36蛋白の発現を検討したところCD36発現低下がin vivoにて確認された。またreal-time quantitative PCR法にてCD36 mRNA発現の低下が認められた。CD36蛋白の発現低下はトロンボスポンジン-1の過剰発現、I型コラーゲン過剰発現、α-smooth muscle actin過剰発現、Smad3のリン酸化亢進と相関した。また正常線維芽細胞ではTGF-β刺激にてCD36発現低下が確認され、強皮症線維芽細胞におけるCD36の発現低下はautocrine TGF-β signaling(強皮症線維芽細胞自身が分泌するTGF-βが活性化してTGF-β情報伝達が亢進した結果)によるものと考えられた。また正常線維芽細胞におけるsiRNA CD36を用いたRNA干渉によるCD36発現抑制によってトロンボスポンジン-1の過剰発現、I型コラーゲン過剰発現、α-smooth muscle actin過剰発現、Smad3のリン酸化亢進が誘導され、CD36発現抑制は線維化を誘導する可能性が示唆された。強皮症線維芽細胞におけるCD36発現低下の意義をさらに明らかにするため、正常および強皮症線維芽細胞へのlatent form TGF-β添加によってCD36の発現量、TGF-β活性化、トロンボスポンジン-1の発現量、I型コラーゲン発現童、α-smooth muscle actin発現量、Smad3のリン酸化の程度を検討した。正常線維芽細胞ではlatent form TGF-β添加によってCD36の発現低下、TGF-β活性化、トロンボスポンジン-1の発現亢進、I型コラーゲン発現亢進、α-smooth muscle actin発現亢進、Smad3のリン酸化亢進が確認されたが、強皮症線維芽細胞においてはCD36の発現量、TGF-β活性化、トロンボスポンジン-1の発現量、I型コラーゲン発現量、α-smooth muscle actin発現量、Smad3のリン酸化の程度に変化を認めなかった。さらに強皮症線維芽細胞におけるCD36とトロンボスポンジン-1の介合、CD36とlatent form TGF-βの介合、トロンボスポンジン-1とlatent form TGF-βが確認されたが、正常線維芽細胞では無刺激下では各々認められなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Circulating miR-29a levels in patients with scleroderma-spectrum disorder. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kawashita Y, Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Makino K, Honda N, Masuguchi S, Fukushima S, Inoue Y, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci 巻: 61 ページ: 67-69
  • 査読あり
• [雑誌論文] Altered dynamics of TGF-β receptors in scleroderma fibroblasts. (2011)
  • 著者名/発表者名: Asano Y, Ihn H, Jinnin M, Tamaki K.
  • 雑誌名: Ann Rheum Dis 巻: 70 ページ: 384-387
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD109 expression levels in human malignant melanoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ohshima Y, Yajima I, Yanagishita T, Kumasaka MY, Yanagishita T, Watanabe D, Takahashi M, Inoue Y, Ihn H, Matsumoto Y, Kato M.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci 巻: 57 ページ: 132-146
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prevention of ultraviolet B radiation-induced epidermal damage by expression of heat shock protein 70. (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsuda M, Hoshino T, Yamashita Y, Tanaka KI, Maji D, Sato K, Adachi H, Sobue G, Ihn H, Funasaka Y, Mizushima T.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 285 ページ: 5848-5858
  • 査読あり
• [雑誌論文] The expression of human high molecular weight melanoma-associated antigen in acral lentiginous melanoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishi H, Inoue Y, Kageshita T, Takata M, Ihn H.
  • 雑誌名: Bioscience Trends 巻: 4 ページ: 86-89
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transglutaminase 1 preferred substrate peptide K5 is an efficient tool in diagnosis of lamellar ichthyosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Akiyama M, Sakai K, Yanagi T, Fukushima S, Ihn H, Hitomi K, Shimizu H.
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 176 ページ: 1592-1599
  • 査読あり
• [雑誌論文] Up-regulated type I collagen expression by the inhibition of Rac1 signaling pathway in human dermal fibroblasts. (2010)
  • 著者名/発表者名: Igata T, Jinnin M, Makino T, Moriya C, Muchemwa F, Ishihara T, Ihn H.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 393 ページ: 101-105
  • 査読あり
• [雑誌論文] Supression of melanin production by expression of HSP70. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hoshino T, Matsuda M, Yamashita Y, Takehara M, Fukuya M, Mineda K, Maji D, Ihn H, Adachi H, Sobue G, Funasaka Y, Mizushima T.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 285 ページ: 13254-13263
  • 査読あり
• [雑誌論文] Basic fibroblast growth factor stimulates the proliferation of human dermal fibroblasts via the ERK1/2 and JNK pathways. (2010)
  • 著者名/発表者名: Makino T, Jinnin M, Muchemwa F, Fukushima S, Ihn H.
  • 雑誌名: Br J Dermatol 巻: 162 ページ: 717-723
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum levels of soluble vascular endothelial growth factor receptor-2 in patients with-systemic sclerosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Jinnin M, Makino T, Kajihara I, Honda N, Makino K, Ogata A, Ihn H.
  • 雑誌名: Br J Dermatol 巻: 162 ページ: 751-758
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel COL1A1 exon 14/PDGFB fusion gene in dermatofibrosarcoma protuberans (2010)
  • 著者名/発表者名: Muchemwa FC, Jinnin M, Wakasugi S, Sakamoto M, Inoue Y, Ishihara T, Ihn H.
  • 雑誌名: Eur J Dermatol 巻: 20 ページ: 390-391
  • 査読あり
• [雑誌論文] PDGFB quantification is a useful tool in the diagnosis of dermatofibrosarcoma protuberans : a study of 10 cases. (2010)
  • 著者名/発表者名: Muchemwa FC, Wakasugi S, Honda Y, Ihn H.
  • 雑誌名: Clip Exp Dermatol 巻: 35 ページ: 295-299
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inflixmab monotherapy in Japanese patients with moderate-to-severe plaque psoriasis and psoriatic arthritis.A randomized, double-blind, placebo-controlled multicenter trial. (2010)
  • 著者名/発表者名: Torii H, Nakagawa H, Iizuka H, Aoyagi S, Okuyama R, Ohtsuki M, Abe M, Takamori K, Matsuba S, Terui T, Igarashi A, Kawashima M, Amagai M, Takae Y, Eto H, Ikeda S, Komine M, Saeki H, Hayakawa K, Kitami A, Watanabe H, Takehara K, Shimade S, Kitajima Y, Takigawa M, Morita A, Yamanaka K, Takahashi K, Tarutani M, Tarsi M, Kubota.Y, Nakayama J, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci 巻: 59 ページ: 40-49
  • 査読あり
• [雑誌論文] Amelanoti malignant melanoma where primary lesion was discovered 5 ears after metastasis in the lymph node. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kato T, Inoue Y, Ishihara T, Kageshita T, Ihn H.
  • 雑誌名: J Dermatol 巻: 37 ページ: 730-734
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of monocyte/macrophage subsets in the skin and peripheral blood derived from patients with systemic sclerosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Higashi-Kuwata N, Jinnin M, Makino T, Fukushima S, Inoue Y, Muchemwa FC, Yonemura Y, Komohara Y, Takeya M, Mitsuya H, Ihn H.
  • 雑誌名: Arhritis Res Ther 巻: 12 ページ: R128(1-10)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serum TARC/CCL17 levels are increased in dermatomyositis associated with interstitial lung disease. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawashima T, Tada Y, Asano Y, Yazawa N, Tomita M, Tamaki Z, Kubo M, Ihn H, Sugaya M, Kadono T, Tamaki K, Sato S.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci 巻: 60 ページ: 52-54
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impaired lymphangiogenesis due to excess VEGF-D/Flt-4 signaling in the skin of patients with systemic sclerosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Honda N, Jinnin M, Kajihara I, Makino T, Fukushima T, Ihn H.
  • 雑誌名: Br J Dermatol 巻: 163 ページ: 776-780
  • 査読あり
• [雑誌論文] Down-regulation of mir-424 contributes to the abnormal angiogenesis via MEK1 and cyclin E1 in senile hemangioma : its implications to therapy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakashima T, Jinnin M, Etoh T, Fukushima S, Masuguchi S, Maruo K, Inoue Y, Ishihara T, Ihn H.
  • 雑誌名: PloS One 巻: 5 ページ: e14334
  • 査読あり