肝移植後肝癌再発に対する核酸シャペロンを用いた新規ILー12遺伝子治療の開発

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20591528
• 研究機関: 独立行政法人国立病院機構九州がんセンター臨床研究部
• 研究代表者: 副島 雄二 独立行政法人国立病院機構(九州がんセンター臨床研究部), 統括診療部, 消化器外科医長 (30325526)
• 研究分担者: 前原 喜彦 九州大学, 医学研究院, 教授 (80165662) ; 武冨 紹信 九州大学, 大学病院, 助教 (70363364)
• キーワード: インターロイキン12 / ヒアルロン酸くし型共重合体 / 遺伝子治療

研究概要

腫瘍接種モデルの確立:MH134肝癌細胞株を用いたC3H(H-2^k)マウス皮下腫瘍モデルにて検討した。IL-12遺伝子を組み込んだplasmidを、エレクトロポレーション法を用いて腫瘍内に100μg遺伝子導入し(Day0)、その2日後にLPSにて活性化させたDCを腫瘍内に5×10^5個導入した(Day2)。DC導入後6日目(Day8)よりFK506の腹腔内投与(3mg/kg)を連日行って免疫抑制状態とし、Balb/c(H-2^d)マウスのスキングラフトを作製して、免疫抑制の指標とした。無治療群、DC単独群、IL-12単独群、IL-12/DC併用群の4群に分類し、遺伝子治療開始後28日目(Day28)まで各群で原発腫瘍に対する直接的な抗腫瘍効果と、肺及び肝の遠隔転移巣に対する腫瘍抑制効果を検討した。評価項目としては(1)Day28における原発皮下腫瘍容積の比較、(2)Day28における肺及び肝への遠隔転移巣を、パラフィン包埋切片(最大割面)を用いて、転移巣の有無、個数、最大腫瘍径にて比較、(3)脾細胞を用いて、MH134肝癌細胞に対する腫瘍特異的CTLの比較、(4)ELISAを用いて、原発皮下腫瘍内におけるIL-12、IFN-γ蛋白濃度の比較を施行した。
Day28における各4群間での原発皮下腫瘍容積の比較を行ったところ、Mock群:7.61+-0.20cm^3、DC群:4.75±0.14cm^3、IL12群:2.09±0.10cm^3、IL12/DC群:1.71±0.11cm^3であり、IL12/DC群で他の3群と比較して有意に腫瘍抑制効果を認めた。
PLL-g-HA/pCAGGS-mIL-12による肝類洞内皮細胞への遺伝子発現の確認はできなかった。

研究成果

• [雑誌論文] "All-in-one" ex vivo self-reconstruction technique using an autologous inferior vena cava for a right lobe liver graft with multiple and complex venous orifices. (2010)
  • 著者名/発表者名: Soejima Y., Takeishi K., Ikegami T., Uchiyama H., Taketomi A., Maehara Y.
  • 雑誌名: Liver Transpl. 巻: 16 ページ: 909-913
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinicopathological prognostic factors after hepatectomy for patients with mass-forming type intrahepatic cholangiocarcinoma : relevance of the lymphatic invasion index. (2010)
  • 著者名/発表者名: Shirabe K., Mano Y., Taketomi A., Soejima Y., Uchiyama H., Aishima S., Kayashima H., Ninomiya M., Maehara Y.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol. 巻: 17 ページ: 1816-1822
  • 査読あり
• [雑誌論文] Improved results of a surgical resection for the recurrence of hepatocellular carcinoma after living donor liver transplantation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Taketomi A., Fukuhara T., Morita K., Kayashima H., Ninomiya M., Yamashita Y., Ikegami T., Uchiyama H., Yoshizumi T., Soejima Y., Shirabe K., Maehara Y.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol. 巻: 17 ページ: 2283-2289
  • 査読あり
• [学会発表] All-in-one ex vivo self-reconstruction technique using an autologous inferior vena cava for a right lobe graft with multiple and complex venous orifices. (2010)
  • 著者名/発表者名: Soejima Y., Shirabe K, Taketomi A., Yoshizumi T., Uchiyama H., Ikegami T., Ninomiya M., Maehara Y.
  • 学会等名: ILTS第16回国際肝臓移植学会
  • 発表場所: 香港
  • 年月日: 20100616-20100617
• [図書] 腹腔鏡下肝切除術と知っておきたい高難易度肝切除術 (2010)
  • 著者名/発表者名: 副島雄二、調憲、矢永勝彦、前原喜彦
  • 総ページ数: 14
  • 出版者: メディカルビュー社