| 研究概要 |
CPVT型突然変異knock-inマウスのSR機能(Ca^<2+>漏出,ドメイン連関)、心機能解析、およびダントロレンの効果をIn vitroおよびIn vivoで評価し、R2474Sのknock-in(KI)マウスにおける致死的不整脈の発現メカニズムを検討した。
ヒトのリアノジン受容体(RyR)突然変異を組み込んだR2474S-KIマウスは,安静時の心機能は正常であり、また,病理・形態的にも異常はなかった。しかし,epinephrine負荷またはtreadmill運動負荷により容易に多源性心室頻拍(VT)が誘発され、ヒトのCPVTと非常に類似したモデルであることが示唆された。In vitroの実験(Ca^<2+>spark assay)では、wild typeのマウスに比較して、R2474S-KIマウスでは、isoproterenol負荷で異常にCa sparkの頻度が増大した。
R2474S/+miceでみられるカテコラミン誘発性多源性心室頻拍は、ダントロレンのinvivo投与(1mg/kg ip,7目間)により完全に抑制された。また、R2474S/+マウスの心筋より単離した心筋細胞では、低濃度のisoproterenolでCa^<2+>spark頻度が増大しdelayed afterdepolarization(DAD)もみられたが、ダントロレン(1μM)の添加により、それらは完全に抑制された。さらに、蛍光消退実験で、cAMPの添加により引き起こされたRyR内のドメイン連関障害が、ダントロレン存在下で、是正されることが証明された。このことから、ダントロレンは、KIマウスおいて、RyR内のドメイン連関障害を是正することにより、RyRからのCa漏出を抑制し、その結果、DADやVTの発生を抑制するこが示唆された。
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