| 研究課題/領域番号 |
20591854
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| 研究機関 | 浜松医科大学 |
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研究代表者 |
大園 誠一郎 浜松医科大学, 医学部, 教授 (00183228)
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| 研究分担者 |
高山 達也 浜松医科大学, 医学部, 助教 (90324350)
高岡 直央 浜松医科大学, 医学部, 特任研究員 (30467229)
寺谷 工 国立がんセンター, がん転移研究室, 研究員 (70373404)
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| キーワード | 腎癌 / 脳型遊離脂肪酸結合蛋白 / S100蛋白 / 低酸素バイオロジー / バイオマーカー |
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| 研究概要 |
これまでに腎細胞癌のバイオマーカーとして脳型脂肪酸結合蛋白質(B-FABP=FABP7)を同定し、その有用性についていくつかの学会で報告した。最も低侵襲な尿による早期診断キット開発の第一段階として、モノクローナル抗体を作成するためS100A1, S100A5, S100A10、B-FABP遺伝子を大腸菌の発現ベクターに導入し、形質転換した大腸菌より発現クローン株を選抜し、組み換え蛋白質をHis-Tagカラムで精製した。また、並行してB-FABPに対するかなり特異性の高いポリクローナル抗体を作成した。
次いで、B-FABP蛋白質の機能を解明するため、プロモーター解析を行った。開始コドンより-1000bpの核酸をルシフェラーゼ発現ベクターにサブクローニングした。プロモーターアッセイによりB-FABPの発現にNF1の関与が示唆された。これは脂質代謝の面からも興味深い結果である。
また、癌の基本環境は低酸素状態であり、細胞の低酸素ストレス応答反応として、解糖系の活性化や血管新生の誘導がおこる。腎癌におけるB-FABPの発現がこの点にどのように関与しているかを検討するために、腎癌のいくつかのcell lineで低酸素培養を行った。HIF2αの発現がほとんどのcell lineで認められた。S100A10プロモーターの解析を含めたさらなる解析が必要である。
さらに、S100蛋白ファミリーの中で癌の浸潤や転移に関与している可能性の高いS100A4の発現を免疫染色により観察した。High Gradeなほど高発現している印象がある。今後、S100A4の細胞内局在との関連と合わせて、悪性度や予後との関係を明らかにする予定である。
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