糖尿病網膜症の発症、進展における全身因子、眼局所因子の関連機序の解明

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20592065
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 緒方 奈保子 関西医科大学, 医学部, 准教授 (60204062)
• キーワード: 糖尿病網膜症 / VEGF / tight junction / 小胞体ストレス / tight junction

研究概要

糖尿病網膜症の発症に小胞体ストレスが関与することが示唆されはじめている。糖尿病網膜症では血管の透過性の亢進、黄斑浮腫など細胞のtight junctionが変化して起こってくる病態が多くみられる。そこで、糖尿病黄斑浮腫に関与する網膜色素上皮のtight junctionが小胞体ストレス下でどのように変化するか検討した。
培養ヒト網膜色素上皮細胞(ARPE19)に小胞体ストレスを惹起するTunicamycin(TM:1μg/ml)及びThapsigargin(TG:1μM)をそれぞれ添加し、6、12、24、48時間後にmRNA、蛋白発現を検討した。その結果、TMおよびTG負荷で小胞体ストレス発現の指標であるGRP78/BipおよびCHOP mRNAは6、12、24、48時間後有意な上昇を示し、TM及びTG負荷で小胞体ストレスが生じていることを確認できた。Tight junctionのZO-1はTG負荷においてmRNA及びタンパクレベルで有意な上昇を認めた。Occludinとclaudin-1はTM及びTG負荷でmRNA及びタンパクレベルで有意な上昇を認めた。
免疫染色を用いてtight junctionの変化を検討したところTM及びTG負荷にてZO-1、occludin、claudin-1いずれにおいても蛍光強度の増強を認めた。
さらに透過性に関連する因子として血管内皮増殖因子(VEGF)の発現をreal time PCR法で検討したところTM及びTG負荷にてVEGF mRNAの発現が有意に上昇していた。
これらの結果から、小胞体ストレスによって網膜色素上皮のtight junctionや透過性に変化が生ずることがあきらかになった。

研究成果

• [雑誌論文] Plasma levels of vascular endothelial growth factor and pigment epithelium derived factor before and after intravitreal injection of Bevacizumab (2010)
  • 著者名/発表者名: Kayako Matsuyama, Nahoko Ogata, et al.
  • 雑誌名: British Journal of Ophthalmology 94(in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] (2010)
  • 著者名/発表者名: Nahoko Oeata, Joyce Tombran-Tink
  • 雑誌名: Experimental Approaches to Diabetic Retinopathy(KARGER Switzerland) ページ: 124-141
• [雑誌論文] Genetic analysis of typical wet-type age-related macular degeneration and polypoidal choroidal vasculopathy in Japanese population (2009)
  • 著者名/発表者名: Asako Goto, Naoko Ogata., et al.
  • 雑誌名: Journal of Ocular Biology, Disease, and Informatics 2 ページ: 165-175
  • 査読あり
• [雑誌論文] Levels of Vascular Endothelial Growth Factor and Pigment Epithelium Derived Factor in Eyes Before and After Intravitreal Injection of Bevacizumab (2009)
  • 著者名/発表者名: Kayako Matsuyama, Nahoko Ogata, et al.
  • 雑誌名: Japanese Journal of Ophthalmology 53 ページ: 243-248
  • 査読あり
• [学会発表] 教育セミナー「網膜光凝固術の適応と限界」糖尿病網膜症に対する光凝固 (2010)
  • 著者名/発表者名: 緒方奈保子
  • 学会等名: 第33回日本眼科手術学会
  • 発表場所: 東京・東京国際フォーラム
  • 年月日: 2010-01-23
• [学会発表] 糖尿病網膜症患者における bevacizumab 投与前後の血中VEGFと血中サイトカインの経過 (2009)
  • 著者名/発表者名: 松山加耶子, 緒方奈保子, 他
  • 学会等名: Now2009第48回網膜硝子体学会
  • 発表場所: 名古屋・名古屋国際会議場
  • 年月日: 2009-12-04
• [学会発表] 教育セミナー「網膜光凝固術の適応と限界」糖尿病網膜症に対する光凝 (2009)
  • 著者名/発表者名: 松岡雅人, 緒方奈保子, 他
  • 学会等名: Now2009第48回網膜硝子体学会
  • 発表場所: 名古屋・名古屋国際会議揚
  • 年月日: 2009-12-04
• [学会発表] Bevacizumab 投与眼及びその僚眼の前房水中血管内皮細胞増殖因子(VEGF) (2009)
  • 著者名/発表者名: 松山加耶子, 緒方奈保子, 他
  • 学会等名: 第63回日本臨床眼科学会
  • 発表場所: 福岡・福岡国際会議場
  • 年月日: 2009-10-09
• [学会発表] 眼組織の血管新生におけるオステオポンチンの役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 藤田識人, 緒方奈保子, 雑賀司珠也, 他
  • 学会等名: 第14回眼創傷治癒研究会
  • 発表場所: 仙台・江陽グランドホテル
  • 年月日: 2009-08-08