上皮系幹細胞採取法に基づくヒト角膜輪部幹細胞マーカーの同定および分離法の確立

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20592072
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 眼科学
• 研究機関: 東京女子医科大学
• 研究代表者: 山上 聡 東京女子医科大学, 医学部, 准教授 (10220245)
• 研究分担者: 横尾 誠一 東京大学, 医学部, 特任研究員 (20345052)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: 角膜上皮細胞 / 幹細胞 / ラミニン5 / 結膜上皮細胞 / 杯細胞

研究概要

細胞外基質であるラミニン5を高発現する高付着能細胞を単離することを利用した幹細胞単離法により扁平上皮である結膜上皮幹細胞の単離を試みた。結果としてヒト結膜から、組織形成能がある結膜上皮幹・前駆細胞の単離が可能であり、我々は、この細胞を増殖因子の影響下に上皮系細胞と杯細胞という全く異なった細胞に分化誘導できた。今後この結膜上皮幹細胞と角膜輪部幹細胞の比較から分離マーカーが同定される可能性がある。

研究成果

• [雑誌論文] Adhesion, migration, and proliferation of cultured human corneal endothelial cells by laminin-5. (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi M, Ebihara N, Shima N, Kimoto M, Funaki T, Yokoo S, Murakami A, Yamagami S
  • 雑誌名: Investigative Ophthalmology & Visual Science 52 ページ: 679-84
  • 査読あり
• [雑誌論文] 羊膜を使った第角膜再生 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山上聡
  • 雑誌名: 治療 92 ページ: 176-180
• [雑誌論文] Isolation of adult progenitor cells with neuronal potential from rabbit corneal epithelial cells in serum-and feeder layer-free culture conditions. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Yamagami S, Uchida S, Yokoo S, Ono K, Usui T, Amano S
  • 雑誌名: Molecular Vision 24;16 ページ: 1712-1719
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selective isolation of young cells from human corneal endothelium by the sphere-forming assay. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Yamagami S, Yokoo S, Usui T, Amano S
  • 雑誌名: Tissue Engeering Part C Methods. 16 ページ: 803-812
  • 査読あり
• [雑誌論文] スティーブンス・ジョンソン症候群 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山上聡
  • 雑誌名: 全身疾患と眼所見Current Therapy 27 ページ: 50-52
• [雑誌論文] Human corneal endothelial cells expressing programmed death-ligand 1(PD-L1) suppress PD-1^+ T helper 1 cells by a contact-dependent mechanism. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugita S, Usui Y, Horie S, Futagami Y, Yamada Y, Ma J, Kezuka T, Hamada H, Usui T, Mochizuki M, Yamagami S
  • 雑誌名: Investigative Ophthalmology & Visual Science 50 ページ: 263-272
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunologic mechanisms of corneal allografts reconstituted from cultured allogeneic endothelial cells in an immune-privileged site. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hayashi T, Yamagami S, Tanaka K, Yokoo S, Usui T, Amano S, Mizuki N
  • 雑誌名: Investigative Ophthalmology & Visual Science 50 ページ: 3151-3158
  • 査読あり
• [雑誌論文] 拒絶反応の無い理想的な角膜移植手術を目指して-全層角膜移植から内皮細胞移植へ- (2008)
  • 著者名/発表者名: 山上聡
  • 雑誌名: 日本眼科学会雑誌 112 ページ: 266-278
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation and distribution of rabbit keratocyte precursors. (2008)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Amano S, Yokoo S, Uchida S, Usui T, Yamagami S
  • 雑誌名: Molecular Vision 14 ページ: 197-203
  • 査読あり
• [雑誌論文] A mouse model of allogeneic corneal endothelial cell transplantation. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hayashi T, Yamagami S, Tanaka K, Yokoo S, Usui T, Amano S, Mizuki N
  • 雑誌名: Cornea 27 ページ: 699-705
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human corneal epithelial equivalents for ocular surface reconstruction in complete serum free culture system without unknown factors. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yokoo S, Yamagami S, Usui T, Amano S, Araie M
  • 雑誌名: Investigative Ophthalmology & Visual Science 49 ページ: 2438-2443
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anovel isolation technique of progenitor cells in human corneal epithelium using non-tissue culture dishes. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yokoo S, Yamagami S, Shimada T, Usui T,Sato T, Amano S, Araie M, Hamuro J
  • 雑誌名: Stem Cells 26 ページ: 1743-1748
  • 査読あり
• [学会発表] Fibroblast growth factor 2 promotes differentiation of human keratinocyte progenitor cells to goblet cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: 山上聡, 横尾誠一
  • 学会等名: ARVO (The Association for Research in Vision and Ophthalmology)
  • 発表場所: Fort Lauderdale, USA
  • 年月日: 2010-05-03
• [学会発表] 浮遊細胞用培養皿を用いたヒト第角膜輪部上皮前駆細胞の新規単離法 (2010)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一
  • 学会等名: 第114回日本眼科学会総会 日本眼科学会学術奨励賞記念講演
  • 年月日: 2010-04-17
• [学会発表] EGF刺激による角膜輪部上皮前駆細胞の細胞内シグナル伝達経路 (2010)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一、山上聡、天野史郎、新家眞
  • 学会等名: 第114回日本眼科学会総会
  • 年月日: 2010-04-15
• [学会発表] KGF添加無フィーダー細胞・無血清角膜上皮細胞シートのサイトケラチン15の発現 (2010)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一、山上聡、天野史郎、新家眞
  • 学会等名: 第34回角膜カンファランス・第26回日本角膜移植学会
  • 年月日: 2010-02-11
• [学会発表] 角膜内皮細胞の免疫学的特徴と再生医療への期待 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山上聡
  • 学会等名: 第63回日本臨床眼科学会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 2009-10-09
• [学会発表] ヒト角膜輪部上皮前駆細胞の分化能の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一、臼井智彦、三村達哉、杉崎顕史、天野史郎、山上聡
  • 学会等名: 第113回日本眼科学会総会
  • 年月日: 2009-04-17
• [学会発表] Anovel isolation technique of limbal epithelial progenitor cells using uncoated dishes. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamagami S, Yokoo S , Usui T, Amano S
  • 学会等名: ARVO (The Association for Research in Vision and Ophthalmology)
  • 発表場所: Fort Lauderdale, USA
  • 年月日: 2008-05-01
• [学会発表] 眼科幹細胞研究の現状.角膜の幹細胞研究 (2008)
  • 著者名/発表者名: 山上聡
  • 学会等名: 第112回日本眼科学会総会シンポジウム
  • 発表場所: 横浜市
  • 年月日: 2008-04-17
• [学会発表] ヒト角結膜の組織幹細胞・前駆細胞の特徴シンポジウム 眼科幹細胞研究の現状 (2008)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一
  • 学会等名: 第112回日本眼科学会総会
  • 年月日: 2008-04-17
• [図書] 細胞分離・操作技術の最前線(ヒト第角膜の前駆細胞・組織幹細胞の分離) (2008)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一、山上聡
  • 総ページ数: 278-286