ロドプシントランスジェニックウサギの系統樹立と変性過程の解析

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20592075
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 近藤 峰生 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (80303642)
• 研究分担者: 寺崎 浩子 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40207478) ; 伊藤 逸毅 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 特任准教授 (10313991) ; 加地 秀 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (30345904) ; 米今 敬一 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (40362256)
• キーワード: 網膜色素変性 / ウサギ / トランスジェニック / 網膜電図 / ロドプシン

研究概要

我々は、眼科領域における難治性網膜疾患の1つである網膜色素変性(RP)の治療法開発に向けて、RPの中型動物モデルであるロドプシンP347Lトランスジェニック(Tg)ラビットの作成に世界で初めて成功した(Kondo et al.IOVS, 2009)。今年度は、このTgラビットの網膜を組織学的、および電気生理学的に調べ、その視細胞の変性過程と網膜内層の二次的機能変化を研究した。組織学的検査によって、視細胞の変性は網膜中心部(visual streak)で最も強く、周辺部では変性が比較的軽いことがわかった。これは、ロドプシンの発現の部位的な差によるものであると考えられた。また電子顕微鏡による観察により、Tgラビットの視細胞間には多量の小胞(vesicle)が沈着しており、この中に含まれる異常なロドプシンが視細胞死に関与していることがわかった。電気生理学的検査では、このTgラビットの網膜電図(ERG)は、週齢とともに全ての成分が徐々に減弱し、b波よりもa波の方がより障害されており、律動様小波(OPs)が全ての成分の中で最も保たれていることがわかった。興味深いことに、若いTgウサギのOPsは同じ週齢の野生型ウサギよりも有意に大きかった。薬理学的な実験により、若いTgウサギにみられるこの大きなOPsは、網膜内層の二次的機能変化に起因していることが示唆された(Sakai et al. IOVS, 2009)。以上の結果により、我々の作成したTgラビットは、網膜外層(視細胞)が徐々に変性するとともに網膜内層は二次的な機能変化をおこすという、ヒトのRPに非常によく似た網膜変性様式を示すことがわかった。

研究成果

• [雑誌論文] Gene expression analysis of embryonic photoreceptor precursor cells using BAC-Crx-EGFP transgenic mouse (2010)
  • 著者名/発表者名: Muranishi Y, Sato S, Inoue T, Ueno S, Koyasu T, Kondo M, Furukawa T
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficacy of suprachoroidal-transretinal stimulation in rabbit model of retinal degeneration (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishida K, Kamei M, Kondo M, Sakaguchi H, Suzuki M, Fujikado T, Tano Y
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] TRPM1 is a component of the retinal ON bipolar cell transduction channel in the mGluR6 cascade (2010)
  • 著者名/発表者名: Koike C, Obara T, Uriu Y, Numata T, Sanuki R, Miyata K, Koyasu T, Ueno S, Funabiki K, Tani A, Ueda H, Kondo M, Mori Y, Tachibana M, Furukawa T
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci USA 107 ページ: 332-337
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intravitreal injection of bevacizumab for macular edema secondary to branch retinal vein occlusion : Results after 12 months and multiple regression analysis (2009)
  • 著者名/発表者名: Kondo M, Kondo N, Ito Y, Kachi S, Kikuchi M, Yasuma TR, Ota I, Kensaku M, Terasaki H
  • 雑誌名: Retina 29 ページ: 1242-1248
  • 査読あり
• [雑誌論文] Concentration of vascular endothelial growth factor in aqueous humor of eyes with advanced retinopathy of prematurity before and after intravitreal infection of bevacizumab (2009)
  • 著者名/発表者名: Nonobe NI, Kachi S, Kondo M, Takai Y, Takemoto K, Nakayama A, Havakawa M, Terasaki H
  • 雑誌名: Retina 29 ページ: 579-585
  • 査読あり
• [雑誌論文] Supernormal ERG oscillatory potentials in transgenic rabbit with rhodopsin P347L mutation and retinal degeneration (2009)
  • 著者名/発表者名: Sakai T, Kondo M, Ueno S, Koyasu T, Komeima K, Terasaki H
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 50 ページ: 4402-4409
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of macular hole surgery without internal limiting membrane peeling to eyes with internal limiting membrane peeling with and without indocyanine green staining : three-year follow-up (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Y, Kondo M, Asami T, Terasaki H
  • 雑誌名: Ophthalmic Res 41 ページ: 136-141
  • 査読あり
• [雑誌論文] Focal macular electroretinograms after photodynamic therapy combined with posterior juxtascleral triamcinolone acetonide (2009)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa K, Nishihara H, Ozawa S, Piao CH, Ito Y, Kondo M, Terasaki H
  • 雑誌名: Retina 29 ページ: 803-810
  • 査読あり
• [雑誌論文] Calpain-mediated degradation of G-substrate plays a critical role in retinal excitotoxicity for amacrine cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Shimura M, Mourin R, Kondo M, Yokokura S, Saido TC, Nishida K, Endo S
  • 雑誌名: J Neurosci Res 87 ページ: 1412-1423
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of a transgenic rabbit model of retinal degeneration (2009)
  • 著者名/発表者名: Kondo M, Sakai T, Komeima K, Kurimoto Y, Ueno S, Nishizawa Y, Usukura J, Fujikado T, Tano Y, Terasaki H
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 50 ページ: 1371-1377
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acute retinal necrosis caused by herpes simplex virus type 2 in a 3-year-old Japanese boy (2009)
  • 著者名/発表者名: Tanaka-Kitajima N, Iwata N, Ando Y, Sakurai H, Iwami M, Tsuzuki K, Kondo M, Ito Y, Kimura H
  • 雑誌名: Eur J Pediatr 168 ページ: 1125-1128
  • 査読あり
• [雑誌論文] Asymmetry of focal macular photopic negative responses(PhNRs)in monkeys. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kurimoto Y, Kondo M, Ueno S, Sakai T, Machida S, Terasaki H
  • 雑誌名: Exp Eye Res 88 ページ: 92-98
  • 査読あり
• [雑誌論文] (2009)
  • 著者名/発表者名: 近藤峰生
  • 雑誌名: 眼科特集号 : 黄斑浮腫に対する抗VEGF療法(金原出版) ページ: 665-671
• [学会発表] Assessment of retinal function in genetically-engineered animal model of retinal degeneration. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kondo M, Sakai T, Komeima K, Ueno S, Terasaki H
  • 学会等名: Korea-Japan Joint Symposium of Clinical electro-physiology of Vision
  • 発表場所: Urayasu, Japan
  • 年月日: 2009-10-31
• [学会発表] Assessment of macular function of retinitis pigmentosa using focal macular ERG (2009)
  • 著者名/発表者名: Kondo M, Sugita T, Ito Y, Terasaki H
  • 学会等名: The 24th Congress of the Asia-Pacific Academy of Ophthalmology
  • 発表場所: Bali, Indonesia
  • 年月日: 2009-05-18