口腔扁平上皮癌細胞株MOK205の細胞集塊(MCA)を作製し、MCAの細胞表面のβ1インテグリンを抗β1インテグリン抗体を用いてcross-linkingにより活性化したところ、明らかなMCA崩壊は捉えられなかったが、細胞表面に小突起形成を認めた。さらに蛍光抗体染色によってFAK発現の細胞膜直下における軽度増強を確認した。またMCAをラミニン5またはI型コラーゲンをcoatingしたプレート上に移すとMCAは速やかにmonolayerに変化し、さらにラミニン5では著しい細胞分散を生じたが、この現象はScr familyチロシンキナーゼ拮抗剤(PP1)により完全に抑制された。同様にERK、Akt、MEK、MAPK、PI3キナーゼなどに対する拮抗剤により細胞分散の変化を検索中である。 また抗リン酸化Src抗体を用いて、MOK205MCAのラミニン5上での細胞分散過程でチロシンリン酸化Srcの局在を検索したところ、Src-Tyr215リン酸化とSrc-Tyr529リン酸化が細胞間接着に強く発現していたのに対して(Src-Tyr529pは核にも発現)、Src-Tyr418リン酸化の細胞間接着部の発現は微弱であった。なおSrc-Tyr215pとSrc-Tyr529pの発現はラミニン5のない対象プレート上では認めなかった。かかる所見から、SrcのTyr215とTyr529のリン酸化が細胞分散の惹起に関与することが示唆された。
|