| 研究課題/領域番号 |
20592365
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
伊東 大典 東京医科歯科大学, 硬組織疾患ゲノムセンター, 特任講師 (40286844)
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| 研究分担者 |
岩瀬 正泰 昭和大学, 歯学部, 講師 (50193743)
羽鳥 仁志 昭和大学, 歯学部, 准教授 (20245814)
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| キーワード | 樹状細胞療法 / TGFβ / 口腔癌 / 癌特異抗原 / 遺伝子導入 |
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| 研究概要 |
C57BL6マウスc DNAライブラリから、完全長TGFβ1およびTGFβR遺伝子をクローニングし、それぞれ5つのtruncated geneを作製した。これらのinsertをプラスミドベクターとカチオニックリポソーム法でNIH3T3細胞に遺伝子導入、real-time RT-PCRでmRNA発現を確認し、強発現されているトランスフェクタントを選択した。これらのトランスフェクタントをC57BL6マウス肺癌細胞株3LL Lewis lung car cinomaと共培養したところ、truncated TGFβ1またはtruncated TGFR1Rのトランスフェクタントで増殖の抑制がみられたが、各truncated genesの間での有意差はなかった。現在、癌細胞の浸潤能に対するtruncated proteinの影響をinvasion chamber法にて検索中である。
C57BL6マウス骨髄細胞由来の培養樹状細胞を作製し、3LLのcell lysate存在下で3日間培養した。この樹状細胞を放射線照射した3LL生細胞と5日間共培養したが、cell lysateで培養しなかった樹状細胞と比較してIL-12の産生亢進はみられなかった。そこで、cell lysate添加培養を2回とし、培養時間を5日にしたところ、両者の間でIL-12産生に有意差がみられた。このようにして得られた活性化樹状細胞をlysate-pulsed DCsとした。
現在、マウス移植3LL腫瘍モデルにおける、lysate-pulsed DCs局所注射の腫瘍縮小効果を評価中である。
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