研究課題/領域番号 |
20592463
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研究機関 | 岩手医科大学 |
研究代表者 |
吉田 康夫 岩手医科大学, 歯学部, 准教授 (10315096)
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研究分担者 |
岸 光男 岩手医科大学, 歯学部, 准教授 (60295988)
中野 善夫 九州大学, 大学院・歯学研究院, 准教授 (80253459)
帖佐 直幸 岩手医科大学, 歯学部, 助教 (80326694)
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キーワード | インドール / 歯周病細菌 / トリプトファナーゼ |
研究概要 |
本研究課題では歯周病細菌の産生するインドールと歯周疾患の関連を明らかにすることを目的にしている。本年度は、歯周病細菌のインドール産生メカニズムについて研究をおこなった。まず、代表的な歯周病細菌であるPorphyromonas gingivalis W83株の全塩基配列から、大腸菌のトリプトファナーゼをコードする遺伝子tnaAのホモログを検索したところ、pg1401遺伝子が高い相同性を示した。同遺伝子をクロラムフェニコール耐性遺伝子と置き換えた変異株の粗酵素抽出物を得て、基質であるトリプトファンを加えてインドール産生能を高速液体クロマトグラフィーで分析したところ、変異株のインドール産生能が失なわれていたことが確認され、pg1401遺伝子はPorphyromonas gingivalis W83株のトリプトファナーゼをコードすることが明らかとなった。またその変異株に同遺伝子の導入したところインドール産生能は補完された。さらに、大腸菌の組み換えタンパク質としてTnaAを精製して、反応条件や基質特異性などの酵素学的性質を決定した。これらの実験結果を通して、歯周病細菌のインドール産生能に関する生化学的メカニズムの一端が明らかとなった。
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