ポリフェノールのオートファジー促進作用とシヌクレノパチ-治療への可能性

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20650053
• 研究種目: 萌芽研究
• 研究機関: (財)東京都医学研究機構
• 研究代表者: 橋本 款 (財)東京都医学研究機構, 東京都神経科学総合研究所, 副参事研究員 (50189502)
• キーワード: パーキンソン病 / シヌクレイン / オートファジー / リソソーム / オートファゴソーム / LC3 / Theaflavin / ポリフェノール

研究概要

平成20年度:Theaflavinのオートファジー促進作用の機序を解明する。
i)紅茶の主成分であるテオフラビン(Theaflavin)と緑茶に含まれるカテキン(Epigallocatechin-3-Gallate)、赤ワインに含まれるResveratrolなど他のポリフェノールのオートファジー促進、リソソーム形成能を比較検討する。マウス神経芽細胞(Neuro2A細胞)を無血清培地におきかえた後、目的とする化合物を種々の濃度加えて一定時間培養した。Dancylcadaverine(MDC)を培養液に加え、生理的食塩水で洗浄し、蛍光顕微鏡をもちいてオートファゴソーム/オートリソソームを観察した。また、96 wellsのプレートを用いて蛍光強度を測定することにより、定量化をおこなった。LC3-IからLC3-IIへの変換、さらにbeclin-1,ATG5などのオートファジー関連分子の発現誘導を、ウェスタンブロット法により、定量的に評価した。また、電子顕微鏡による観察により、種々のオートファゴソーム/オートリソソームなどの生成を形態的に確認した。
ii)Theaflavinによるオートファジー促進能のメカニズムをシグナル伝達経路に重点をおいて検討する。シグナル伝達によるオートファジー制御に関しては、mTORによる初期段階の制御、P38によるオートファゴソーム形成の抑制などが知られている。まず、これらの経路に重点を置き、他の経路に関しても検討を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Differential microglial activation between acute stress and lipopolysaccharide treatment (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugama, S Takenouchi T, Fujita M, Conti B, Hashimoto M.
  • 雑誌名: J Neuroimmunol 207 ページ: 24-31
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Activation of P2X7 Receptor Impairs Lysosomal Functions and Stimulates the Release of Autophagolysosomes in Microglial Cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Takenouchi T, Nakai M, Iwamaru Y, Sugama S, Tsukimoto, M, Fujita M, Wei J, Sekigawa A, Sato M, Kojima, S, Kitani H, Hashimoto M.
  • 雑誌名: J Immunol 182 ページ: 2051-2062
  • 査読あり
• [雑誌論文] Microglial activation is inhibited by corticosterone in dopaminergic neuro degeneration (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugama, S Takenouchi T, Kitani H, Fujita, M, Hashimoto M.
  • 雑誌名: J Neuroimmunol 208 ページ: 104-114
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mitochondrial association of alpha-synuclein causes oxidative stress (2008)
  • 著者名/発表者名: Parihar MS, Parihar A, Fujita M, Hashimoto M. Ghafourifar P
  • 雑誌名: Cell Mol Life Sci. 65 ページ: 1272-1284
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lysophospholipids and ATP mutually suppress maturation and release of IL-1 beta in mouse microglial cells using a Rho-dependent pathway (2008)
  • 著者名/発表者名: Takenouchi T, Iwamaru Y, Sugama S, Sato M, Hashimoto M. Kitani H.
  • 雑誌名: J Immunol 180 ページ: 7827-7839
  • 査読あり
• [雑誌論文] alpha-Synuclein aggregates interfere with Parkin solubility and distribution : role in the pathogenesis of Parkinson's disease (2008)
  • 著者名/発表者名: Kawahara K, Hashimoto M. Baron P, Ho GJ, Crews L, Mizuno H, Rockenstien E, Imam SZ, Masliah E.
  • 雑誌名: J Biol Chem. 283 ページ: 6979-6987
  • 査読あり
• [学会発表] Transgenic mice model for Lewy body disease (2008)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto M, Fujita M, Nakai, M, Sekigawa A
  • 学会等名: 第17回パーキンソン病治療学会(ノバルティス_ファーマ主催)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-09-27
• [学会発表] Protectiverole of glycoshingolipids for lysosomal pathology in synuclein opathies (2008)
  • 著者名/発表者名: Wei J, Nakai M, Fujita M, Hashimoto M
  • 学会等名: 第31回日本神・経科学大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-07-10
• [学会発表] βシヌクレイン(P123H)過剰発現型トランスジェニックマウスの解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 藤田雅代, 中井雅晶, 魏建設, 藁谷正明, 津久井通, 井上聡, 橋本款
  • 学会等名: 第49回日本神経病理学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-05-20