Aktを介したサーカディアンリズムの制御

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20659014
• 研究種目: 萌芽研究
• 研究機関: (財)癌研究会
• 研究代表者: 藤田 直也 財団法人癌研究会, 癌化学療法センター基礎研究部, 部長 (20280951)
• キーワード: 癌 / 生体分子 / 体内時計 / 抗がん剤

研究概要

本研究課題では、時計遺伝子発現制御機構、特にサーカディアンリズムを刻むのに欠かせないCLOCK/BMAL1ヘテロ二量体のAktによる制御機構を明らかにすることを目指している。研究代表者は既に、CLOCK/BMAL1ヘテロ二量体によるマウスPer1遺伝子転写が、野生型Akt遺伝子導入により抑制されること、逆にドミナントネガティブAkt遺伝子導入により促進されることを発見していた。種間での相違を考慮し、ヒトPer1プロモーター部位をルシフェラーゼ遺伝子の前につないだレポーターコンストラクトを作製し比較する事で、AktはヒトとマウスのPer1プロモーター活性にほぼ同様な抑制活性を示す事を証明した。ヒトPer1プロモーター領域を短くしたレポーターコンストラクトを多数作製することで、Aktにより制御されるヒトPer1転写部位として、ヒトPer1プロモーター上のE-boxドメインを同定した。E-boxドメインを3つタンデムにつなげたレポーターコンストラクトと、そのE-boxドメインに変異を入れた変異レポーターコンストラクトを作製した結果、AktはCLOCK/BMAL1ヘテロ二量体のE-boxへの結合をキナーゼ活性依存的に抑制していることを明らかにした。さらに、ChIPアッセイの結果、Aktのキナーゼ活性依存的にCLOCK/BMAL1ヘテロ二量体のDNAへの結合が低下する事も明らかにした。今後、時計遺伝子産物のAktによるリン酸化の可能性を検討していく。

研究成果

• [雑誌論文] TUSC4/NPRL2, a novel PDK1-interacting protein, inhibits PDK1 tyrosine phosphorylation and its downstream signaling (2008)
  • 著者名/発表者名: Atsuo Kurata
  • 雑誌名: Cancer Sci. 99 ページ: 1827-1834
  • 査読あり
• [雑誌論文] ss 1 integrin/Fak/Src signaling in intestinal epithelial crypt cell survival : integration of complex regulatory mechanisms (2008)
  • 著者名/発表者名: Veronique Bouchard
  • 雑誌名: Apoptosis 13 ページ: 531-542
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pim kinases promote cell cycle progression by phosphorylating and down-regulating p27^<Kip1> at the transcriptional and post-transcriptional levels (2008)
  • 著者名/発表者名: Daisuke Morishita
  • 雑誌名: Cancer Res. 68 ページ: 5076-5085
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tetraspanin family member CD9 inhibits Aggrus/podoplanin-induced platelet aggregation and suppresses pulmonary metastasis (2008)
  • 著者名/発表者名: Youya Nakazawa
  • 雑誌名: Blood 112 ページ: 1730-1739
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of the lysophosphatidic acid-generating enzyme autotaxin in lymphocyte-endothelial cell interactions (2008)
  • 著者名/発表者名: Tae Nakasaki
  • 雑誌名: Am. J. Pathol. 173 ページ: 1566-1576
  • 査読あり
• [雑誌論文] Platelet aggregation in the formation of tumor metastasis (2008)
  • 著者名/発表者名: Takashi Tsuruo
  • 雑誌名: Proc. Jpn. Acad., Ser. B 84 ページ: 189-198
  • 査読あり
• [雑誌論文] Freud-1/Akil, a novel PDK1-interacting protein, functions as a scaffold to activate the PDK1/Akt pathway in epidermal growth factor signaling (2008)
  • 著者名/発表者名: Akito Nakamura
  • 雑誌名: Mol. Cell. Biol. 28 ページ: 5996-6009
  • 査読あり
• [学会発表] Novel cross-talk between circadian rhythms and AKT (2008)
  • 著者名/発表者名: 大原智子
  • 学会等名: 第67回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場、愛知
  • 年月日: 2008-10-28
• [学会発表] TUSC4/NPRL2, a novel PDK1-interacting protein, inhibits PDK1 tyrosine phosphorylation and its downstream signaling (2008)
  • 著者名/発表者名: 片山量平
  • 学会等名: 第67回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場、愛知
  • 年月日: 2008-10-28
• [学会発表] Drug resistance mediated by survival- and growth-promoting signaling pathways (2008)
  • 著者名/発表者名: 藤田直也
  • 学会等名: 第67回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場、愛知
  • 年月日: 2008-10-28
• [学会発表] Pim kinases promote cell cycle progression by phosphorylating and down-regulating p27^<Kip1> at the transcriptional and post-transcriptional levels (2008)
  • 著者名/発表者名: Daisuke Morishita
  • 学会等名: Keystone Symposia -Stem Cells, Cancer and Aging-
  • 発表場所: Singapore、Singapore
  • 年月日: 2008-10-03
• [学会発表] Metastasis suppressor CD9 inhibits platelet aggregation (2008)
  • 著者名/発表者名: Youya Nakazawa
  • 学会等名: The 12th International Congress of Metastasis Research Society
  • 発表場所: Vancouver、Canada
  • 年月日: 2008-08-04
• [学会発表] Tetraspanin family CD9による転移抑制機構の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 中澤侑也
  • 学会等名: 第17回日本がん転移学会総会
  • 発表場所: 鹿児島サンロイヤルホテル、鹿児島
  • 年月日: 2008-07-25
• [学会発表] Chemoresistance in breast cancer stem-like cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Naoya Fujita
  • 学会等名: Second JCA-AACR Special Joint Conference
  • 発表場所: 淡路路夢舞台、兵庫
  • 年月日: 2008-07-16
• [学会発表] 新規TRAIL受容体結合タンパク質PRMT5によるNF-κBの活性化を介したTRAIL誘導性細胞死の制御 (2008)
  • 著者名/発表者名: 藤田直也
  • 学会等名: 第12回がん分子標的治療研究会
  • 発表場所: 学術総合センター、東京
  • 年月日: 2008-06-27
• [備考]
  • URL: http://www.jfcr.or.jp/laboratory/ccc/fundamental/index.html