血小板凝集時に放出されるSDFー1による骨髄細胞動員増強作用と臓器線維化の誘導

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20659038
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 熊谷 雄治 北里大学, 医学部, 准教授 (40215017)
• 研究分担者: 川村 道子 北里大学, 医学部, 助教 (00154104) ; 天野 英樹 北里大学, 医学部, 助教 (60296481) ; 馬嶋 正隆 北里大学, 医学部, 助教 (70181641)
• キーワード: マトリゲル / 血管新生 / 線維化 / CD34陽性 / fibrocyte / PGE2 / TXA2 / 血小板

研究概要

マウス背部皮下にマトリゲルを接種し、必要に応じてbFGFを混入させることで、肉芽組織の増殖を促し、線維化が進行するか否か検討を加えた。このモデルでは、2週間にわたって血管新生(肉芽組織内ヘモグロビン濃度、CD31発現量で評価)が進行した。その後、4週まで同程度のレベルを保ったあとで、8週目で急激に低下した。肉芽組織内のコラーゲン量を線維化の指標として測定すると、2週目までに急激に増加し以後高値を8週目まで示した。肉芽内には好中球はほとんど存在せず、主要細胞成分はMac-1陽性のマクロファージとMac-1/CD3 double negativeのfibroblast様細胞であった。後者の中にはCD34陽性の骨髄から動員されたfibrocyte様の細胞が多くを占め、骨髄機能が重要な血管新生、線維化の制御要因であることが推定された。PGE2の作用に加え、さらに血小板でのトロンボキサン(thromboxane)の役割を解析するために、マトリゲルモデルマウスにOKYO46(トロンボキサン合成酵素阻害薬)あるいはS-146(トロンボキサン受容体TP拮抗薬)を連日投与し、血管新生、線維化を評価した。肉芽組織を4%PFAで固定し、パラフィン抱埋し、組織切片標本を作成、線維芽細胞をVimentin抗体、S100抗体で免疫染色して同定すると、TPシグナリングが血管新生、線維化を増強していることが判明した。コラーゲン沈着量も同様にTPシグナリングが増強していることが判明した。同組織内のSDF-1およびVEGF-AをELISAで測定すると、TPシグナリングを阻害することにより、低下することが判明した。生体顕微鏡下で新生血管床に接着する血小板を調べると、TPシグナリングにより接着が増強していることが判明した。我々の既報に従いトロンボキサン合成酵素を過剰発現するfibroblastを作成し、ゲル局所に投与すると血管新生、線維化が増強することが判明した。(713字)

研究成果

• [雑誌論文] Estimating the contribution of genes to variation in renal drug clearance by active secretion using multiple data from clinical phase I studies. (2010)
  • 著者名/発表者名: Fujita T, Kumagai Y, Nakahara I, Ohtani Y, Majima M.
  • 雑誌名: J Clin Pharmacol. 巻: 50 ページ: 109-114
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of prostaglandin E2-EP1 receptor signaling in regulation of gastric motor activity and emptying. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mizuguchi S, Ohno T, Hattori Y, Ae T, Minamino T, Satoh T, Arai K, Saeki T, Hayashi I, Sugimoto Y, Narumiya S, Saigenji K, Majima M.
  • 雑誌名: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 巻: 64 ページ: G1078-1086
  • 査読あり
• [雑誌論文] COX-2 and prostaglandin EP3/EP4 signaling regulate the tumor stromal proangiogenic microenvironment via CXCL12-CXCR4 chemokine systems. (2010)
  • 著者名/発表者名: Katoh H, Hosono K, Ito Y, Suzuki T, Ogawa Y, Kubo H, Kamata H, Mishima T, Tamaki H, Sakagami H, Sugimoto Y, Narumiya S, Watanabe M, Majima M.
  • 雑誌名: Am J Pathol. 巻: 176 ページ: 1469-1483
  • 査読あり
• [学会発表] Recruitment of mast cells to the tumor microenvironment via leukotriene B4 receptor regulates tumor-associated angiogenesis (2010)
  • 著者名/発表者名: Masataka Majima
  • 学会等名: 4th Tumor-Host Interaction and Angiogenesis : Mechanisms and Therapeutic Implication
  • 発表場所: Ascona, Switzerland
  • 年月日: 20101031-20101104
• [図書] First in man試験の革新 (2010)
  • 著者名/発表者名: 熊谷雄治
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: メディカルドウ