• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2009 年度 実績報告書

質量顕微鏡によるアミロイド組織内沈着分子プロフィル異常と線維形成阻止法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 20659093
研究機関大阪医科大学

研究代表者

田窪 孝行  大阪医科大学, 医学部, 教授 (60163359)

研究分担者 中西 豊文  大阪医科大学, 医学部, 准教授 (10247843)
キーワード神経科学 / タンパク質 / 痴呆 / 脳神経疾患 / プロテオーム
研究概要

・質量顕微鏡によるアミロイド組織片直接解析法の確立を目的に、市販アルツハイマー病患者脳組織切片スライドを解析試料とし、コンゴーレッドあるいは標識抗□アミロイド前駆蛋白抗体により染色・画像化した病変部位を直接質量顕微鏡にて連続マススペクトルを測定し、βアミロイド前駆蛋白、βアミロイドペプチド(アミノ酸残基1-39~43)などの分子プロフィルを明らかにした。同時に、共存タンパク質であるミエリン塩基性タンパク(MBP)とトランスサイレチンとの存在比を明らかにし、Aβペプチド蓄積部位にはMBPの発現低下が認められ、脱髄が亢進していることを示唆する結果が得られた(専門誌に投稿中)。
・得られたマススペクトル情報と染色画像情報に重ね合わせ視覚化し、上記βアミロイド分子の組織内局在を明らかにした。同時に、マススペクトルのイオン強度より量的変動を明らかにした。
・既知のβアミロイド前駆蛋白、βアミロイドペプチド以外の分子プロフィルを明らかにした。
・市販正常組織片スライドをin vitro弱アルカリ条件下、37℃放置し、経時的発現分子プロフィル、組織内局在、質的変動を明らかにした。我々が提唱した「S-sulfonation化」が進行している事が証明出来た。
・市販組織切片スライドを用いた予備実験を踏まえ、我々がin vitro実験で得られたアミロイド原性を有する種々の翻訳後修飾TTRなどの分子プロフィルを明らかにし、アミロイド原性獲得やその生成/阻止機序など我々の仮説を分子レベルで立証した。アミロイド線維化の重要な第一反応が「S-sulfonation化」であり、その反応によって誘導されたデヒドロアミノ酸(α-acryl amino acid)がランダムポリマー形成→アミロイド線維化に重要な役割を果たしていることを明らかにした(専門誌に投稿・印刷中)。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2009

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (5件)

  • [雑誌論文] MSイメージングによる組織内発現タンパク質の局在性、量的・質的解析と医学応用2009

    • 著者名/発表者名
      中西豊文
    • 雑誌名

      大阪医科大学雑誌 68(2)

      ページ: 64-65

    • 査読あり
  • [学会発表] Causative cysteine-S-sulfonate is a good reagent to elucidate a myloid precipitation by mass spectrometry for image analysis2009

    • 著者名/発表者名
      M.Yoshioka, K.Moriuchi, T.Nakanishi
    • 学会等名
      6^<th> International forum on chemistry of functional organic chemicals(IFOC-6)
    • 発表場所
      学士院会館(東京)
    • 年月日
      20091115-20091206
  • [学会発表] 質量イメージング/切片上断片化法を用いた組織切片中のタンパク質解析の現状と問題点2009

    • 著者名/発表者名
      中西豊文, RM.Caprioli
    • 学会等名
      日本ヒトプロテオーム機構(JHUPO)第7回大会
    • 発表場所
      北里大学(東京)
    • 年月日
      20090727-20090728
  • [学会発表] 質量イメージング/切片上断片化法を用いた組織切片中のタンパク質解析2009

    • 著者名/発表者名
      中西豊文, RM Caprioli
    • 学会等名
      第57回質量分析総合討論会
    • 発表場所
      大阪国際交流センター(大阪市)
    • 年月日
      20090513-20090515
  • [学会発表] MALDI-イメージングによる組織切片内発現タンパク質の空間的・質的・量的解析2009

    • 著者名/発表者名
      中西豊文
    • 学会等名
      第70回北陸質量分析談話会(日本医用マス学会北陸支部会)
    • 発表場所
      福井大学医学部(福井市)
    • 年月日
      2009-11-21
  • [学会発表] イメージングマススペクトロメトリー2009

    • 著者名/発表者名
      中西豊文, RM.Caprioli
    • 学会等名
      第34回日本医用マススペクトル学会
    • 発表場所
      近畿大学(大阪市)
    • 年月日
      2009-11-21

URL: 

公開日: 2011-06-16   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi