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(1) Dnmt3aに関する検討
aP2プロモーターを用いて、脂肪組織特異的Dnmt3a過剰発現するトランスジェニックマウス(Dnmt3aマウス)を作出した。脂肪組織特異的に導入遺伝子の発現が検出された。DNAマイクロアレイ解析と定量的リアルタイムPCR法によりトランスジェニックマウスの脂肪組織において遺伝子Aの発現減少が認められた。脂肪組織における遺伝子AプロモーターのDNAメチル化をBisulfite法で解析したところ、野生型コントロールではDNAメチル化は観察されなかったが、Dnmt3aマウスでDNAメチル化がわずかに増加していた。現在、Dnmt3aマウスに高脂肪食およびメチル化促進飼料を与え、遺伝子発現やDNAメチル化に対する影響を検討しつつある。
(2) 胎仔期〜新生仔期のDNAメチル化標的遺伝子の同定と機能解析
DNAメチル化が肥満プログラムに関与するか否かを明らかにするため、母マウスにメチル化促進飼料を与え、仔マウス肥満の発症に対する影響を検討した。授乳期の母獣にメチル化促進飼料を与えた際、仔マウスでは高脂肪食(10週間)による体重増加がメチル化促進飼料により抑制された。仔マウスの白色脂肪組織の重量および脂肪細胞のサイズは高脂肪食により増加した。しかしながら、メチル化促進飼料は白色脂肪組織重量および脂肪細胞のサイズには影響を与えなかった。一方、肝重量は高脂肪食で増加した。興味深いことに、メチル化促進飼料群では高脂肪食による肝臓重量および肝臓中トリグリセリド量の増加が著しく抑制され、脂肪肝の改善が認められた。肝臓サンプルの遺伝子発現を検討し、今後、標的遺伝子のDNAメチル化を解析する予定である。
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