細胞老化制御に基づく上皮・実質・内皮幹細胞と人工実質による三次元的再生角膜の移植

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20689032
• 研究機関: (財)冲中記念成人病研究所
• 研究代表者: 三村 達哉 (財)冲中記念成人病研究所, 研究員 (70463867)
• キーワード: 前駆細胞 / 幹細胞 / 角膜 / 結膜

研究概要

近年我々は、角膜上皮、実質、内皮細胞よりスフェアー法により老化した細胞を除去し、non-senescentな組織幹細胞を選択的に採取することに世界で初めて成功した。またスフェアー法により採取した角膜上幹細胞を用いた角膜上皮幹細胞シート、又は角膜内皮幹細胞塊を動物眼に移植することにより、角膜を透明にする治療に成功した。しかし、臨床的に角膜移植を必要とする患者は実質の混濁が生じている症例が大半を占めるため、角膜上皮や内皮のみならず、角膜実質の再生が必要となる。同様の方法により我々は、角膜実質より採取した組織幹細胞と人工実質を用いて、角膜実質を再生し、動物眼に移植することにより角膜透明性を維持することにも成功した。本研究では、角膜上皮・実質・内皮の各層より得られた幹細胞を用いて作成した各シートを組み合わせることにより、ドナー角膜に匹敵する幹細胞を用いた人工角膜を開発することを第一の目標とし、幹細胞主体の再生角膜を臨床応用することにより慢性的なドナー角膜不足を解消することを最終目的とする。昨年度までに我々は角膜上皮・実質・内皮の各層より組織細胞を選択的に採取し、採取した組織幹細胞を用いて、上皮、実質、内皮幹細胞シートを作成した。本年度は各幹細胞を動物眼に移植を行った。その結果、角膜上皮では移植後に通常の培養細胞を用いて移植を行ったものと比較して、細胞の更なる重層化に成功した。実質ではゼラチン素材と実質幹細胞を共培養することにより人工角膜実質を作成することに成功し、動物眼に移植することにより、通常の培養実質細胞を移植したものと比較して、細胞基質の産生能が高く、未分化マーカーネスチンなどの発現が高いことを証明した。内皮細胞を脱落させると角膜浮腫を起こすが、内皮組織幹細胞塊を移植することにより、角膜浮腫を抑制することに成功した。いずれのシートも、動物眼に移植した後は角膜透明性維持に働くことを証明できた。

研究成果

• [雑誌論文] Visual prognosis and vitreous molecules after vitrectomy for macular edema with branch retinal vein occlusion. (2011)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Mimura T, Eguchi S, Shimada K.
  • 雑誌名: Clin Ophthalmol 巻: 5 ページ: 223-229
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sudden onset of amantadine-induced reversible bilateral corneal edema in an elderly patient : Case report and literature review. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hotehama A, Mimura T, Usui T, Kawashima H, Amano S.
  • 雑誌名: Jpn J Ophthalmol 巻: 55 ページ: 71-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relationship between conjunctivochalasis and refractive error. (2011)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Usui T, Yamagami S, Funatsu H, Noma H, Toyono T, Mori M, Amano S.
  • 雑誌名: Eye Contact Lens 巻: 37 ページ: 71-78
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relation Between Total Tear IgE and Specific Serum IgE in Seasonal Allergic Conjunctivitis. (2011)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Usui T, Mori M, Funatsu H, Noma H, Yamamoto H, Aixinijueluo W, Amano S.
  • 雑誌名: Cornea 巻: (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vitreous levels of pigment epithelium-derived factor and vascular endothelial growth factor in macular edema with central retinal vein occlusion. (2011)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Mimura T, Eguchi S, Shimada K, Hori S.
  • 雑誌名: Curr Eye Res 巻: 36 ページ: 256-263
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relationship between Total Tear and Serum IgE in Allergic Conjunctivitis. (2011)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Usui T, Mori M, Funatsu H, Noma H, Yamamoto H, Aixinjueluo W, Amano S.
  • 雑誌名: Int Arch Allergy Immunol 巻: 154 ページ: 349-352
  • 査読あり
• [雑誌論文] Laser treatment of giant iris cyst with nanophthalmos. (2011)
  • 著者名/発表者名: Honda N, Mimura T, Hotehama A, Usui T, Sugisaki K, Fukuoka S, Amano S.
  • 雑誌名: Int Ophthalmol 巻: 31 ページ: 17-20
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rapid immunochromatography of total tear immunoglobulin E in allergic conjunctivitis with Allerwatch. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Usui T, Mori M, Funatsu H, Noma H, Aixinjueluo W, Yamamoto H, Amano S.
  • 雑誌名: J Investig Allergol Clin Immunol. 巻: 20 ページ: 627-628
  • 査読あり
• [雑誌論文] Severity and determinants of pinguecula in a hospital-based population. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Usui T, Obata H, Yamagami S, Mori M, Funatsu H, Noma H, Dou K, Amano S.
  • 雑誌名: Eye Contact Lens 巻: 37 ページ: 31-35
  • 査読あり
• [雑誌論文] High-dose steroid therapy for idiopathic optic perineuritis : a case series. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tatsugawa M, Noma H, Mimura T, Funatsu H
  • 雑誌名: J Med Case Reports 巻: 4 ページ: 404
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of soluble vascular endothelial growth factor receptor-2 in macular oedema with central retinal vein occlusion. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Mimura T, Eguchi S, Shimada K.
  • 雑誌名: Br J Ophthalmol 巻: (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Influence of macular microcirculation and retinal thickness on visual acuity in patients with branch retinal vein occlusion and macular edema. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Harino S, Nagaoka T, Mimura T, Hori S.
  • 雑誌名: Jpn J Ophthalmol 巻: 54 ページ: 430-434
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rapid Immunochromatographic Measurement of Specific Tear Immunoglobulin E in Moderate to Severe Cases of Allergic Conjunctivitis With Immfast Check J1 in the Spring. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Usui T, Mori M, Funatsu H, Noma H, Amano S.
  • 雑誌名: Cornea 巻: (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunochromatographic assay for measurement of total IgE in tears, nasal mucus, and saliva of patients with allergic rhinoconjunctivitis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Usui T, Mori M, Aixinjueluo W, Funatsu H, Noma H, Amano S.
  • 雑誌名: J Asthma 巻: 47 ページ: 1153-1160
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vitreous inflammatory factors and macular oedema. (2010)
  • 著者名/発表者名: Funatsu H, Noma H, Mimura T, Eguchi S.
  • 雑誌名: Br J Ophthalmol. 巻: (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pinguecula and contact lenses. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Usui T, Mori M, Yamamoto H, Obata H, Yamagami S, Funatsu H, Noma H, Honda N, Amano S.
  • 雑誌名: Eye (Lond) 巻: 24 ページ: 1685-1691
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation of adult progenitor cells with neuronal potential from rabbit corneal epithelial cells in serum- and feeder layer-free culture conditions. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Yamagami S, Uchida S, Yokoo S, Ono K, Usui T, Amano S.
  • 雑誌名: Mol Vis 巻: 16 ページ: 1712-1719
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increase of aqueous inflammatory factors in macular edema with branch retinal vein occlusion : a case control study. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Mimura T, Shimada K.
  • 雑誌名: J Inflamm (Lond) 巻: 7 ページ: 44
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pigment epithelium-derived factor and vascular endothelial growth factor in branch retinal vein occlusion with macular edema. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Mimura T, Harino S, Eguchi S, Hori S.
  • 雑誌名: Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol 巻: 248 ページ: 1559-1565
  • 査読あり
• [雑誌論文] Contact lens-induced subconjunctival hemorrhage. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Yamagami S, Mori M, Funatsu H, Usui T, Noma H, Amano S.
  • 雑誌名: Am J Ophthalmol 巻: 150 ページ: 656-665
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bilateral limbal stem cell deficiency with chromosomal translocation of 3p and 9p. (2010)
  • 著者名/発表者名: Usui T, Nakagawa S, Yokoo S, Mimura T, Yamagami S, Amano S.
  • 雑誌名: Jpn J Ophthalmol 巻: 54 ページ: 357-358
  • 査読あり
• [雑誌論文] Biology of corneal endothelial cells in vivo and in vitro. (2010)
  • 著者名/発表者名: Amano S, Kaji Y, Mimura T.
  • 雑誌名: Jpn J Ophthalmol 巻: 54 ページ: 211-214
  • 査読あり
• [雑誌論文] Visual acuity and foveal thickness after vitrectomy for macular edema. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Mimura T, Shimada K.
  • 雑誌名: Ophthalmologica 巻: 224 ページ: 367-373
  • 査読あり
• [雑誌論文] Visual acuity and foveal thickness after vitrectomy for macular edema associated with branch retinal vein occlusion : a case series. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Mimura T, Eguchi S, Shimada K.
  • 雑誌名: BMC Ophthalmol 巻: 10 ページ: 11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of latanoprost on the expression of matrix metalloproteinases and tissue inhibitor of metalloproteinase 1 on the ocular surface. (2010)
  • 著者名/発表者名: Honda N, Miyai T, Nejima R, Miyata K, Mimura T, Usui T, Aihara M, Araie M, Amano S.
  • 雑誌名: Arch Ophthalmol 巻: 128 ページ: 466-471
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association between macular microcirculation and soluble intercellular adhesion molecule-1 in patients with macular edema and retinal vein occlusion. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Sakata K, Mimura T, Hori S.
  • 雑誌名: Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol 巻: 248 ページ: 1515-1518
  • 査読あり
• [雑誌論文] Extended long-term results of penetrating keratoplasty for keratoconus. (2010)
  • 著者名/発表者名: Fukuoka S, Honda N, Ono K, Mimura T, Usui T, Amano S.
  • 雑誌名: Cornea 巻: 29 ページ: 528-530
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ocular involvement by epstein-barr virus-positive diffuse large B-cell lymphoma of the elderly : a new disease entity in the world health organization classification. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tsuji H, Tamura M, Yokoyama M, Takeuchi K, Mimura T.
  • 雑誌名: Arch Ophthalmol 巻: 128 ページ: 258-259
  • 査読あり
• [雑誌論文] Primary epithelioid haemangioendothelioma of the eyelid. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tsuji H, Kanda H, Kashiwagi H, Mimura T.
  • 雑誌名: Br J Ophthalmol 巻: 94 ページ: 261-262
  • 査読あり
• [雑誌論文] Corneal epithelial MT1-MMP inhibits vascular endothelial cell proliferation and migration. (2010)
  • 著者名/発表者名: Azar DT, Casanova FH, Mimura T, Jain S, Zhou Z, Han KY, Chang JH.
  • 雑誌名: Cornea 巻: 29 ページ: 321-330
  • 査読あり
• [雑誌論文] Aqueous humor levels of vasoactive molecules correlate with vitreous levels and macular edema in central retinal vein occlusion. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Mimura T, Harino S, Hori S.
  • 雑誌名: Eur J Ophthalmol 巻: 20 ページ: 402-409
  • 査読あり
• [雑誌論文] Macular microcirculation before and after vitrectomy for macular edema with branch retinal vein occlusion. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Sakata K, Mimura T, Hori S.
  • 雑誌名: Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol 巻: 248 ページ: 443-445
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selective isolation of young cells from human corneal endothelium by the sphere-forming assay. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Yamagami S, Yokoo S, Usui T, Amano S.
  • 雑誌名: Tissue Eng Part C Methods 巻: 16 ページ: 803-812
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recent causes of subconjunctival hemorrhage. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Usui T, Yamagami S, Funatsu H, Noma H, Honda N, Amano S.
  • 雑誌名: Ophthalmologica 巻: 224 ページ: 133-137
  • 査読あり
• [雑誌論文] Location and extent of subconjunctival hemorrhage. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mimura T, Yamagami S, Usui T, Funatsu H, Noma H, Honda N, Fukuoka S, Hotta H, Amano S
  • 雑誌名: Ophthalmologica 巻: 224 ページ: 90-95
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increase of vascular endothelial growth factor and interleukin-6 in the aqueous humour of patients with macular oedema and central retinal vein occlusion. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noma H, Funatsu H, Mimura T, Harino S, Sone T, Hori S.
  • 雑誌名: Acta Ophthalmol 巻: 88 ページ: 646-651
  • 査読あり
• [学会発表] 秋季アレルギー性結膜炎患者における涙液中特異的IgE (2011)
  • 著者名/発表者名: 三村達哉、森樹郎、臼井智彦、天野史郎
  • 学会等名: 角膜カンファランス2011第35回日本角膜学会総会第27回日本角膜移植学会
  • 発表場所: 品川
  • 年月日: 2011-02-17
• [学会発表] 涙液中総IgE抗体価とアレルギー性結膜炎重症度の関係 (2011)
  • 著者名/発表者名: 保手濱充啓、三村達哉、森樹郎、臼井智彦、天野史郎
  • 学会等名: 角膜カンファランス2011第35回日本角膜学会総会第27回日本角膜移植学会
  • 発表場所: 品川
  • 年月日: 2011-02-17
• [学会発表] Role of MT1-MMP (MMP14) on anti-angiogenic proteoglycan, Decorin, in corneal angiogenesis (2010)
  • 著者名/発表者名: Tatsuya Mimura
  • 学会等名: 16th Kyoto Cornea Club
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-12-03
• [学会発表] 外来でできる涙液・アレルギー検査 (2010)
  • 著者名/発表者名: 三村達哉
  • 学会等名: 第1回 虎門会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-11-24
• [学会発表] 多種抗原測定キットを用いたアレルギー性結膜炎患者涙液中の特異的IgE (2010)
  • 著者名/発表者名: 三村達哉
  • 学会等名: 第64回日本臨床眼科学会・専門別研究会オキュラーサーフェス研究会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-11-11
• [学会発表] アマンタジン内服による両眼性・可逆性角膜浮腫の1症例 (2010)
  • 著者名/発表者名: 保手濱充啓、三村達哉、臼井智彦、天野史郎、川島秀俊
  • 学会等名: 第64回日本臨床眼科学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-11-11
• [学会発表] Rapid measurement of specific tear IgE in allergic conjunctivitis using immfast check J1 in spring (2010)
  • 著者名/発表者名: Tatsuya Mimura1, Tomohiko Usui, Mikiro Mori, Hideharu Funatsu, Hidetaka Noma, Shiro Amano.
  • 学会等名: The Association for Research in Vision and Ophthalmology
  • 発表場所: Fort Lauderdale, Florida, USA
  • 年月日: 2010-05-02
• [学会発表] 網膜静脈閉塞症に伴う黄斑浮腫と細胞接着因子との関連性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 野間英孝、船津英陽、針野正誉、三村達哉、堀貞夫
  • 学会等名: 第114回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2010-04-15
• [学会発表] アレルギー性結膜炎患者における血清IgE抗体価と屈折の関係 (2010)
  • 著者名/発表者名: 三村達哉、森樹郎、臼井智彦、天野史郎
  • 学会等名: 第114回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2010-04-15